A吋 ch院 ph育m t瑛 rau má th吋 hi羽p"8逢嬰c các ho衣t tính t嘘t nh医t và d宇 dàng 泳ng d映ng vào trong m悦 ph育m, cao chi院v"tcw"oƒ"8逢嬰c tinh ch院x "p¤pi"ecq"j o"n逢嬰ng saponin t鰻ng b茨ng các lo衣i polymer h医p ph映.
Nh詠a HPD300 c栄a Shanghai Yuanye Bio-Technology Cọ Ltd. (Trung Qu嘘c), nh詠a HPD100 và AB-8 c栄a Donghong Chemical Cọ Ltd. (Trung Qu嘘e+"8逢嬰c s穎 d映ng
8吋 tinh ch院 x "p¤pi"ecq"j o"n逢嬰ng saponin trong cao chi院v"tcw"oƒ0"Eƒe"8員c tính c栄a nh詠a h医p ph映8逢嬰c li羽t kê trong B違ng 1.1.
31
Hình 2. 5. Quy trình tinh ch院 cao chi院t rau má b茨ng nh詠a h医p ph映
Nh詠a h医p ph映8逢嬰c ngâm trong ethanol 98% trong 24 gi運8吋 ho衣v"j„c"x "8逢嬰c r穎a l衣i nhi隠u l亥n b茨pi"p逢噂c c医v"vt逢噂c khi s穎 d映ng. C瓜t th栄y tinh (ø12 mm ×150 mm) 8逢嬰c nh欝i nh詠c"逢噂v"*8«"jq衣t hóa). Cao chi院v"tcw"oƒ"8逢嬰e"rj¤p"vƒp"vtqpi"p逢噂e"x "8員t trong b吋 uk‒w"¤o"8吋 t衣o thành dung d鵜ej"8欝ng nh医t. D鵜ej"rj¤p"vƒp"8逢嬰c cho qua c瓜t h医p ph映, sau
8„."e瓜v"8逢嬰c r穎a b茨ng 4 BV (BV: th吋v ej"v逢挨pi"8逢挨pi"x噂k"n逢嬰ng nh詠c"8逢嬰c nh欝i trong c瓜t) p逢噂c c医t. Ucrqpkp"8逢嬰c tách ra kh臼i nh詠a b茨ng dung môi r穎a gi違ị Dung d鵜ch r穎a gi違k"8逢嬰c lo衣i b臼 hoàn toàn dung môi b茨pi"e»"swc{"ej¤p"mj»pị"vjw"8逢嬰c b瓜t ch院 ph育m
e„"j o"n逢嬰ng saponin t鰻pi"ecq0"Ucw"8„."d瓜t ch院 ph育o"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"v pj"ej医t v壱t lý,
j o"n逢嬰ng saponin, ho衣t tính kháng oxi hóa (m映c 2.5+"x "8瓜 b隠n theo th運i gian.
Quy trình tinh ch院."p¤pi"ecq"j o"n逢嬰ng saponin b茨ng nh詠a h医p ph映 ch鵜u nhi隠u y院u t嘘 違pj"j逢荏pi"pj逢"p欝pi"8瓜 dung d鵜ch cao chi院t, lo衣i dung môi r穎a gi違i, lo衣i nh詠a h医p ph映È"Vtqpi"p瓜i dung này, nghiên c泳u ti院n hành xây d詠ng quy trình tinh ch院 ch院
ph育m t瑛 rau má d詠a trên kh違o sát luân phiên t瑛ng bi院n các y院u t嘘違pj"j逢荏ng. Kh違p<pi"
h医p ph映 và r穎a gi違k"8逢嬰c l詠a ch丑p"8吋8ƒpj"ikƒ"x "n詠a ch丑p"8k隠u ki羽n phù h嬰p nh医t cho quy trình. Kh違p<pi"j医p ph映 và r穎a gi違k"8逢嬰c tính theo công th泳c (11) và (12).
32
(11)
(12)
C瓜t th栄{"vkpj"8逢嬰c nh欝i 3 g nh詠c"逢噂t *v逢挨pi"8逢挨pi"x噂i th吋 tích t嘘i thi吋u (BV) là 6 mL), th吋 tích c栄a dung d鵜ch cao chi院t là 30 mL, quá trình tinh ch院 8逢嬰c ti院n hành 荏
nhi羽v"8瓜 rj”pi0"A¤{"n "eƒe"{院u t嘘8逢嬰c c嘘8鵜nh trong su嘘t quá trình kh違o sát.
KhＶo sát Ｖpj"j⇔ぞng cてa nげpi"8じ dung dおch cao chiｘt: Cao chi院t 8逢嬰c phân tán
vtqpi"p逢噂c thành các n欝pi"8瓜 dung d鵜ch 2,5; 5; 10 và 15 g/L. Ucw"8„."dung d鵜ej"8逢嬰c ch違y qua c瓜t nh詠a h医p ph映 HPD100 trong 2 gi運. C瓜v"8逢嬰c r穎a b茨pi"6"DX"p逢噂c c医v"vt逢噂c khi 2 BV dwpi"o»k"gvjcpqn"72'"8逢嬰c s穎 d映pi"8吋 r穎a gi違i saponin [40]. Kh違p<pi"t穎a gi違k"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"x "uq"uƒpj0"P欝pi"8瓜 dung d鵜ch cao chi院t có giá tr鵜 này cao nh医t s胤 8逢嬰c l詠a ch丑n cho các kh違o sát ti院p theọ
KhＶo sát Ｖpj"j⇔ぞng cてa dung môi rぬa giＶi: Sau khi quá trình h医p ph映 hoàn t医t, các dung môi r穎a gi違i (ethanol 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20% và 10%)
8逢嬰c kh違o sát kh違 n<pi"vƒej"ucrqpkp"tc"mj臼i nh詠a h医p ph映. Kh違q"uƒv"p {"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"
thông qua giá tr鵜 kh違p<pi"t穎a gi違ị Dung môi r穎a gi違i thích h嬰p s胤8逢嬰c l詠a ch丑n cho kh違o sát saụ
KhＶo sát Ｖpj"j⇔ぞng cてa polymer hＸp phつ: Quá trình kh違o sát 違pj"j逢荏ng c栄a polymer h医p ph映8逢嬰c ti院n hành trên 3 lo衣i nh詠a HPD300, HPD100 và AB-8. Các lo衣i nh詠a h医p ph映 này sau khi ho衣v"j„c."8逢嬰c s穎 d映pi"8吋 th詠c hi羽n quy trình tinh ch院 ch院
ph育m t瑛 rau má t衣k"8k隠u ki羽n thích h嬰p nh医t c栄a các kh違q"uƒv"vt逢噂e"8„0"Mj違 p<pi"j医p ph映 và kh違p<pi"t穎a gi違i n "vk‒w"ej "8吋8ƒpj"ikƒ"x "n詠a ch丑n lo衣i polymer phù h嬰p nh医t cho quy trình.
2.4.4. Aƒpj"ikƒ"các ch院 ph育m t瑛 rau má
Cao chi院t rau má r飲 qu衣t, cao chi院t rau má lá tròn và b瓜t ch院 ph育m vjw"8逢嬰c t瑛 quá trình tinh ch院."p¤pi"ecq"j o"n逢嬰ng saponin t鰻ng trong cao chi院v"tcw"oƒ"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"
33
ngo衣k"swcp."j o"n逢嬰ng saponin t鰻ng (m映c 2.3.2), ho衣t tính kháng oxi hóa và ho衣t tính h厩 tr嬰 tr逸ng dạ
T瑛8„."eƒe"ej院 ph育o"8逢嬰e"8鵜pj"j逢噂ng 泳ng d映ng vào các s違n ph育o"ej<o"u„e"eƒ"
nhân và m悦 ph育o0"A瓜鰻p"8鵜nh c栄a s違n ph育m m悦 ph育m ph映 thu瓜c vào nhi隠u y院u t嘘, trong
8„"8瓜 b隠n c栄a ho衣t ch医t là m瓜t trong nh英ng y院u t嘘 quan tr丑ng nh医t. Vì v壱y, các h羽 gi違
l壱p c栄a hai lo衣i cao chi院t rau má và b瓜t ch院 ph育o"8逢嬰e"rj¤p"vƒp"vtqpi"p逢噂e"x "8ƒpj"ikƒ" 8瓜 b隠p"j o"n逢嬰ng ho衣t ch医t saponin và màu s逸c theo th運k"ikcp"mjk"n逢w"vt英vtqpi"eƒe"8k隠u ki羽n kh違o sát.
40606030"Aƒpj"ikƒ"jqＴt tính kháng oxi hóa
Cao chi院t rau má r飲 qu衣t, cao chi院t rau má lá tròn và b瓜t ch院 ph育o"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"
ho衣t tính kháng oxi hóa b茨pi"rj逢挨pi"rjƒr"CDVU"x "FRRJ"8«"p‒w"vtqpi"o映c 2.3.3. Sau
8„."eƒe"m院t qu違8逢嬰c ti院n hành so sánh và rút ra k院t lu壱n.
40606040"Aƒpj"ikƒ"hoＴt tính hざ trぢ trｈng da
Cao chi院t rau má r飲 qu衣v"x "nƒ"vt”p"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"jq衣t tính h厩 tr嬰 tr逸ng da thông
swc"rj逢挨pi"rjƒr"8ƒpj"ikƒ"j o"n逢嬰ng melanin n瓜i bào (m映c 2.3.4) r欝i ti院n hành so sánh. Các th穎 nghi羽o"p {"8逢嬰c th詠c hi羽n d詠a trên s詠 h嬰p tác v噂i nhóm nghiên c泳u c栄a PGS. TS. Tr亥p"X<p"Jk院u (khoa Sinh h丑c Î Công ngh羽 Sinh h丑ẹ"vt逢運ng A衣i h丑c Khoa h丑c t詠
nhiên ÎA衣i h丑c Qu嘘c gia Thành ph嘘 H欝 Chí Minh).
40606050"Aƒpj"ikƒ"8じ bｚn
Các ch院 ph育m t瑛 rau má s胤8逢嬰c ph嘘i tr瓜n vào h羽 gi違 l壱p v噂i n欝pi"8瓜 0,1% f逢噂i s詠 h厩 tr嬰 c栄a 0,1% ch医t ho衣v"8瓜ng b隠 m員t PEG-40 và 0,05% natri benzoatẹ Các h羽 gi違
l壱r"p {"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ j o"n逢嬰ng saponin t鰻ng và màu s逸c trong 1 tháng v噂i chu k 7 ngày/l亥n 荏 eƒe"8k隠u ki羽p"n逢w"vt英 khác nhaụ
- Ak隠u ki羽n s嘘c nhi羽t: M磯w"8逢嬰e"n逢w"vt英 trong t栄 l衣nh (10 oE+"3"pi {."ucw"8„" 8逢嬰e"n逢w"vtqpi"v栄医m (45 oC) 1 ngày, l員p l衣i chu kì nhi隠u l亥n.
- Ak隠u ki羽n nhi羽v"8瓜 cao: M磯w"8逢嬰e"n逢w"vt英 trong t栄医m 荏 45 oC. - Ak隠u ki羽n nhi羽v"8瓜 th医p: M磯w"8逢嬰e"n逢w"vt英 trong t栄 l衣nh 荏 10 oC.
- Ak隠u ki羽n sáng: M磯w"8逢嬰e"n逢w"vt英 荏 8k隠u ki羽n nhi羽v"8瓜 phòng."rj挨k"uƒpi"v詠
34
- Ak隠u ki羽n t嘘i: M磯w"8逢嬰e"n逢w"vt英荏 nhi羽v"8瓜rj”pi"vtqpi"8k隠u ki羽n không có ánh sáng.
A瓜 b隠n h o"n逢嬰ng ho衣t ch医t
Rj逢挨pi"rjƒr"swcpi"rj鰻 h医p thu UV-Vis (m映c 40504040"Rj逢挨pi"rjƒr"swcpi"rj鰻
h医p thu (UV-Vis)8逢嬰c s穎 d映pi"8吋 8ƒpj"ikƒ"j o"n逢嬰ng saponin t鰻ng trong các h羽 gi違
l壱p.
A瓜 b隠n màu s逸c
Bên c衣pj"8瓜 b隠n c栄a saponin trong ch院 ph育m rau má, s詠 bi院p"8鰻i màu s逸c c栄a ch院
ph育o"e pi"u胤 違pj"j逢荏pi"8院n ngo衣i quan c栄a s違n ph育m m悦 ph育m. Fq"8„."piq衣i quan c栄a các h羽 gi違 l壱r"e pi"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ0"Oƒ{"8q"o w"Ejtqoc"Ogvgt"ET-622"8逢嬰c s穎
35
EJ姶愛PI"5: K蔭T QU謂 VÀ BÀN LU一N
3.1. CHU域N B卯 NGUYÊN LI烏U
Các công trình nghiên c泳u c栄c"pj„o"vt逢噂e"8¤{"8«"pijk‒p"e泳u, kh違o sát thành ph亥n c栄c"tcw"oƒ."pj逢pi"ej雨 t壱p trung vào rau má r飲 qu衣t t衣k"eƒe"8鵜c"rj逢挨pi"mjƒe"pjcw*A欝ng Nai, Long An và thành ph嘘 H欝 Chí Minh). Tuy nhiên, quy trình trích ly saponin t瑛 rau
oƒ"ej逢c"8逢嬰c nghiên c泳u sâụ Vì v壱y, lu壱p"x<p"p {"u胤 ti院n hành kh違o sát, xây d詠ng quy trình trích ly saponin t瑛 rau má r飲 qu衣v"x "tcw"oƒ"nƒ"vt”p0"A欝ng th運i, so sánh tính ch医t và thành ph亥n hóa h丑c c栄c"jck"8嘘k"v逢嬰ng nghiên c泳u nàỵ
Hình 3. 1. Rau má r飲 qu衣v"v逢挨k Hình 3. 2. Rau má r飲 qu衣t s医y khô
Hình 3. 3. Tcw"oƒ"nƒ"vt”p"v逢挨k Hình 3. 4. Rau má lá tròn s医y khô
A嘘k"v逢嬰ng nghiên c泳u c栄c"8隠 tài là rau má r飲 qu衣t (Centella asiatica+"8逢嬰c thu ho衣ch 荏A欝ng Nai và rau má lá tròn (Hydrocotyle verticillata) thu ho衣ch 荏 Ti隠n Giang.
Tcw"oƒ"v逢挨k"ucw"mjk"8逢嬰c lo衣i b臼 r宇 và r穎a s衣ej."8逢嬰c s医{"mj»"8院n mjk"8衣v"8瓜育m kho違ng 9% - 33'0"Ucw"8„."tcw"oƒ"mj»"8逢嬰c nghi隠n nh臼 x "n逢w"vt英 vtqpi"8k隠u ki羽n kín, tránh
36
B違ng 3. 1. Tính ch医t c栄a b瓜t rau má khô
Tính ch医t
Mô t違
Rau má r飲 qu衣t Rau má lá tròn
Ók"j逢挨pi J逢挨pi"vj違q"f逢嬰c nh姻 J逢挨pi"vj違q"f逢嬰e"pj姻
Màu s逸c Màu xanh l映c có ánh vàng O w"zcpj"n映e"e„"ƒpj"x pi J o"n逢嬰ng 育m (%) ~ 9 ~ 11
J o"n逢嬰ng saponin (%) 4,91 4,79
Rj逢挨pi"rjƒr"u逸c kí l噂p m臼pi"*VNE+"8逢嬰c s穎 d映pi"8吋8ƒpj"ikƒ"u挨"d瓜 thành ph亥n hóa h丑c c栄a hai lo衣i cao chi院t rau má. M磯u TECA (s違n ph育o"vj逢挨pi"o衣i c栄a SEPPIC)
8逢嬰c s穎 d映ng làm m磯w"8嘘i ch泳ng. TECA là m瓜t d衣ng chi院t xu医t tinh khi院t t瑛 Centella asiatica, e„" j o" n逢嬰ng saponin t鰻ng trên 95%, bao g欝m 3 thành ph亥n triterpenoid saponin: asiaticoside (39,7%), asiatic acid (23,6%) và madecassic acid (28,0%).
Hình 3. 5. S逸c kí l噂p m臼ng phân tách các h嬰p ch医t trong TECA (1), cao chi院t r飲 qu衣t (2) và cao chi院t lá tròn (3)
37
B違ng 3. 2. Giá tr鵜 Rf c栄a các h嬰p ch医t
Giá tr鵜 Rf TECA Cao chi院t r飲 qu衣t Cao chi院t lá tròn Thành ph亥n
0,93 - 1 v院t 1 v院t - 0,85 - 1 v院t 1 v院t - 0,82 - 1 v院t - - 0,72 1 v院t 1 v院t 1 v院t Asiatic acid 0,68 1 v院t 1 v院t 1 v院t Madecassic acid 0,52 - 1 v院t 1 v院t - 0,29 1 v院t 1 v院t 1 v院t Asiaticoside 0,21 - 1 v院t 1 v院t - 0,15 - - 1 v院t - 0,11 - 1 v院t 1 v院t -
Rjc"8瓜pi"8«"vƒej"jk羽u qu違 các h嬰p ch医t trong hai m磯u cao chi院t thành các v院t tách bi羽t v噂i màu s逸e"8員e"vt逢pi0"M磯w"vj逢挨pi"o衣i TECA có ba v院t tách r運i 荏 Rf là 0,29; 0,68 và 0,72. D詠c"x q"8瓜 phân c詠c c栄a các h嬰p ch医t triterpenoid saponin và các tài li羽w"8«"
công b嘘 vt逢噂e"8„ [24], có th吋 d詠 8qƒp"các kho違ng Rf vt‒p"v逢挨pi"泳ng v噂i aisaticoside, madecassic acid và asiatic acid. Hai lo衣i d鵜ch chi院t rau má có thành ph亥p"8c"f衣pi"j挨p."
th吋 hi羽n qua các v院t tr違i dài t瑛 kho違ng Rf2.3"8院n 0,9 (Hình 3. 5 và B違ng 3.2). TLC c栄a rau má r飲 qu衣t có 3 v院v"v逢挨pi"8欝ng v噂i m磯w"VGEC"pj逢pi"e逢運pi"8瓜 màu nh衣v"j挨p0"Ak隠u này ch泳ng t臼 trong d鵜ch chi院t r飲 qu衣t ch泳a 3 thành ph亥n asiaticoside, madecassic acid và asiatic acid v噂k"j o"n逢嬰ng th医p. K院t qu違VNE"p {"v逢挨pi"8欝ng v噂i TLC c栄a rau má r飲 qu衣v"8逢嬰c thu hái 荏 thành ph嘘 H欝 Chí Minh trong nghiên c泳u vt逢噂e"8¤{"e栄a nhóm [46]. A嘘i v噂i d鵜ch chi院t lá tròn, k院t qu違 TLC cho th医y, rau má lá tròn e pi"ej泳a 3 lo衣i triterpenoid saponin gi嘘pi"pj逢"rau má r飲 qu衣t. Tw{"pjk‒p."j o"n逢嬰ng c栄a các thành ph亥n này là r医t th医p, th医r"j挨p"uq"x噂i rau má r飲 qu衣t th吋 hi羽p"swc"e逢運pi"8瓜 màu t衣i các giá tr鵜
Rf 0,29; 0,68 và 0,72 c栄a rau má lá tròn r医t nh衣t.
Nhìn chung, k院t qu違 c栄c"rj逢挨pi"rjƒr"u逸c kí l噂p m臼ng 8«"u挨"d瓜zƒe"8鵜pj"8逢嬰c c違
hai lo衣i rau má r飲 qu衣v"x "nƒ"vt”p"8隠u ch泳a các thành ph亥p"vtkvgtrgpqkf"ucrqpkp"8逢嬰c quan tâm. M員c dù j o"n逢嬰ng c栄a các thành ph亥n này không cao pj逢pi"j o"n逢嬰ng saponin trong rau má caọ A¤{"n "e挨"u荏8吋 ti院n hành các kh違o sát v隠8鵜pj"n逢嬰ng saponin
38
3.2. XÂY D衛NG QUY TRÌNH TRÍCH LY
3.2.1. D鵜ch chi院t
3.2.1.1. Rau má rｔ quＴt (Centella asiatica)
謂nh j逢荏ng c栄a dung môi
Fwpi"o»k"8逢嬰c s穎 d映ng là h羽 ethanol-p逢噂c, cho kh違 p<pi"泳ng d映ng caọ Tuy nhiên, n欝pi"8瓜gvjcpqn"nk‒p"swcp"8院n tính ch医t d鵜ch chi院t. 雲 n瓜i dung này, tính ch医t dung môi hay n欝pi"8瓜gvjcpqn"8逢嬰c kh違q"uƒv"8吋 8ƒpj"ikƒ"v pj"ej医t c栄a d鵜ch chi院t x "n逢嬰ng ho衣t ch医v"vjw"8逢嬰c.
Hình 3. 6. Ngo衣i quan c栄a d鵜ch chi院t rau má r飲 qu衣t v噂i các lo衣i dung môi khác nhau
Các d鵜ch chi院t rau má c栄a các dung môi chi院t khác nhau có màu s逸e"vjc{"8鰻i (Hình
3. 6). D鵜ch chi院v"e„"zw"j逢噂ng chuy吋n t瑛 màu xanh l映c s磯m, nh衣t d亥n và chuy吋n thành màu vàng ánh nâu khi gi違m n欝pi"8瓜 EtOH c栄a dung môi chi院v0"A嘘i v噂i các d鵜ch chi院t c栄a dung môi chi院t có n欝pi"8瓜 EtOH nh臼j挨p"72'."f鵜ch chi院v"mj»pi"e”p"o w"zcpj"8員c tt逢pi"e栄a s逸c t嘘ejnqtqrj{nn0"Ak隠u này ch泳ng t臼, khi gi違m n欝pi"8瓜 EtOH c栄a dung môi chi院v"vj·"j o"n逢嬰pi"ejnqtqrj{nn"e pi"ik違m d亥n.
39
K院t qu違 Hình 3. 7 cho th医y dung môi 違pj"j逢荏ng r医t l噂p"8院n hi羽u qu違 chi院t saponin. C映 th吋, khi gi違m d亥n n欝pi"8瓜 ethanol, hi羽u su医t chi院t saponin e pi"e„"zw"j逢噂ng gi違m.
Ak隠u này có th吋 do các triterpenoid saponin trong rau má r飲 qu衣v"e„"8瓜 vcp"vtqpi"p逢噂c không caọ D鵜ch chi院t EtOH 98% cho hi羽u su医t chi院t saponin cao nh医v."8衣t 4,91%, cao g医p 2,7 l亥n so v噂i d鵜ch chi院v"p逢噂c. Vì v壱y, ethanol 98% là dung môi phù h嬰p cho nh英ng kh違o sát ti院p theọ
謂pj"j逢荏ng c栄a s嘘 l亥n t壱n trích
Trích ly là quá trình khu院ch tán phân t穎, ch医t c亥n trích ly hòa tan vào dung môi và khu院ch tán ra ngoài t院 bàọ Khi n欝pi"8瓜 c栄a saponin cân b茨ng gi英a trong và ngoài t院
bào thì quá trình trích ly k院v"vj¿e0"Fq"8„."e亥n ph違i trích ly nhi隠u l亥n và kh違o sát s嘘 l亥n t壱p"vt ej"8吋vjw"8逢嬰e"n逢嬰ng saponin t嘘i 8c0
Hình 3. 8. Ngo衣i quan d鵜ch chi院t EtOH 98% t瑛 b瓜t rau má r飲 qu衣t
D鵜ch chi院t EtOH 98% sau 3 l亥n t壱n trích c栄a rau má khô có màu s逸c gi違m d亥n theo s嘘 l亥n trích lỵ D詠a vào ngo衣i quan, có th吋 nh壱p"zfiv"u挨"d瓜 ph亥n l噂n ho衣t ch医t và các s逸c t嘘 bao g欝m chlorophyll t壱p trung trong d鵜ch chi院t l亥n th泳 nh医t và gi違m d亥n trong các l亥n chi院t ti院p theọ
B違ng 3. 3. N欝pi"8瓜 saponin t鰻ng c栄a d鵜ch chi院t rau má r飲 qu衣t
L亥n N欝pi"8瓜 saponin t鰻ng (mg/mL) Kh嘘k"n逢嬰ng saponin (mg) T雨 l羽 saponin trong m厩i l亥n chi院t (%) 1 3,062 ± 0,063 153,083 ± 3,170 68,01 2 1,107 ± 0,082 55,328 ± 4,110 24,58 3 0,333 ± 0,053 16,656 ± 2,669 7,40 H厩n h嬰p 1,501 ± 0,066 225,081 ± 3,316 100
40
Theo s嘘 li羽u B違ng 3.3, kh嘘k"n逢嬰ng saponin t鰻ng vjw"8逢嬰c trong d鵜ch chi院t l亥p"3"8衣t giá tr鵜 cao nh医t (153,083 mg) và gi違m d亥n sau 3 l亥n t壱n trích. C映 th吋, kh嘘i n逢嬰ng saponin t鰻ng trong d鵜ch chi院t l亥p"3"ecq"j挨p"5 l亥n so v噂i d鵜ch chi院t l亥n 2 (55,328 mg). Trong d鵜ch chi院t l亥n th泳5."n逢嬰pi"ucrqpkp"vjw"8逢嬰c ch雨 chi院m 7,40% nên các l亥n chi院t ti院p theo có th吋 b臼 quạ A吋 t嘘k"8c"n逢嬰pi"ucrqpkp"vjw"8逢嬰c, trong các kh違o sát ti院p theo quá trình trích ly 8隠w"8逢嬰c ti院n hành 3 l亥n.
謂pj"j逢荏ng c栄a t雨 l羽 nguyên li羽u: dung môi
T雨 l羽 nguyên li羽u: dung môi không ch雨違pj"j逢荏pi"8院n hi羽u su医t c栄a quá trình trích ly mà còn 違pj"j逢荏pi"8院n hi羽u qu違 kinh t院."p<pi"n逢嬰ng và quá trình lo衣i b臼 dung môi phía saụ
Hình 3. 9. 謂pj"j逢荏ng c栄a t雨 l羽 nguyên li羽u: dung môi (g/mL) 8院n hi羽u su医t chi院t saponin
K院t qu違 (Hình 3. 9) cho th医{."mjk"v<pi"n逢嬰ng dung môi chi院t thì hi羽u su医t chi院t
ucrqpkp"v<pi"n‒p0"Mjk"n逢嬰ng dung môi chi院v"v<pi"n‒p"4"n亥p"vj·"n逢嬰pi"ucrqpkp"vjw"8逢嬰c
e pi"v<pi"n‒p"i医r"8»k0"Tuy nhiên, 荏 t雨 l羽 nguyên li羽u: dung môi là 1:10 và 1:15, hàm
n逢嬰ng saponin trong d鵜ch chi院t không có s詠 chênh l羽ej"8ƒpi"m吋. Xét v隠 y院u t嘘 kinh t院,
mjk"n逢嬰ng dung môi l噂n, quá trình lo衣i b臼 dung môi c亥n t嘘n nhi隠u th運k"ikcp"x "p<pi" n逢嬰pi"j挨p0"X·"x壱y, ch丑n t雨 l羽 1:10 (nguyên li羽u: dung môi) thích h嬰p cho quá trình trích lỵ
41
Ak隠u ki羽n chi院t thích h嬰p c栄a quá trình trích ly rau má r飲 qu衣t:
‚ Dung môi: ethanol 98%.
‚ T雨 l羽 b瓜t rau má khô/dung môi: 1:10 g/mL.
‚ Nhi羽v"8瓜: nhi羽v"8瓜 sôị
‚ S嘘 l亥n chi院t: 3 l亥n.
‚ Th運i gian chi院t m厩i l亥n: 1 gi運.
3.2.1.2. Rau má lá tròn (Hydrocotyle verticillata)
Do Hydrocotyle verticillata là m瓜t 8嘘k"v逢嬰ng nguyên li羽u rau má khác nên có th吋
thành ph亥n khác bi羽t, do v壱y 違pj"j逢荏ng c栄c"fwpi"o»k"8院n quá trình trích ly s胤 8逢嬰c ki吋m tra l衣ị 雲 các kh違o sát c栄a rau má r飲 qu衣t thì dung môi ethanol có n欝pi"8瓜 th医p
j挨p"72'"không có hi羽u qu違 khi tách saponin (3.2.1.1). Do v壱y trong ph亥n này, b瓜t rau
oƒ"nƒ"vt”p"mj»"8逢嬰c th穎 l亥p"n逢嬰t b茨ng các dung môi ethanol 98%, 90%, 75%, 60% và 50%.
Hình 3. 10. Ngo衣i quan c栄a d鵜ch chi院t rau má lá tròn v噂i các lo衣i dung môi khác nhau
B違ng 3. 4. N欝pi"8瓜 saponin t鰻ng trong các d鵜ch chi院t l亥n th泳 nh医t v噂i dung môi khác nhau
P欝pi"8瓜"ucrqpkp"v鰻pi" (mg/mL) Jk羽w"uw医v"ejk院v saponin (%) F鵜ej"ejk院v"GvQJ";:' 2,262 ± 0,091 2,54 ± 0,10 F鵜ej"ejk院v"GvQJ";2' 2,289 ± 0,098 2,57 ± 0,11 F鵜ej"ejk院v"GvQJ"97' 2,849 ± 0,076 3,20 ± 0,09 F鵜ej"ejk院v"GvQJ"82' 2,172 ± 0,040 2,44 ± 0,05 F鵜ej"ejk院v"GvQJ"72' 2,049 ± 0,037 2,30 ± 0,04
42
Các d鵜ch chi院t v噂k"eƒe"fwpi"o»k"mjƒe"pjcw"8隠u có màu xanh l映c s磯m và màu s逸c gi違m d亥n khi gi違m n欝pi"8瓜 ethanol (Hình 3. 10). Fwpi"o»k"e pi"違pj"j逢荏pi"8院n hàm
n逢嬰ng saponin t鰻ng trong d鵜ch chi院t (B違ng 3. 4+0"Vtqpi"8„."dung môi EtOH 75%vj吋" jk羽p"jk羽w"sw違"ejk院v"v嘘v"pj医v trong l亥n chi院t th泳 nh医t v噂i n欝pi"8瓜 saponin t鰻ng cao nh医t (2,849 mg/mL) và t雨 l羽 saponin so v噂i nguyên li羽w"mj»"dcp"8亥w"8衣t 3,20%.
Hi羽u qu違 chi院t hay kh違p<pi"v壱p"vt ej"vt‒p"tcw"oƒ"nƒ"vt”p"e pi"e„"mjƒe"dk羽t so v噂i rau má r飲 qu衣t. V噂i dung môi EtOH 98% và 荏 nhi羽v"8瓜 sôi, quá trình chi院v"8逢嬰c t壱n trích 3 l亥n chi院t, các d鵜ch chi院v"vjw"8逢嬰c có ngo衣i quan và tính ch医t pj逢"trong Hình 3. 11 và
B違ng 3. 5.
Hình 3. 11. Ngo衣i quan d鵜ch chi院t EtOH 98% c栄a rau má lá tròn
B違ng 3. 5. N欝pi"8瓜 saponin t鰻ng c栄a d鵜ch chi院t EtOH 98% c栄a rau má lá tròn