Thành phần hóa học của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.)

1 3 Đặc điểm thực vật

3.1.Thành phần hóa học của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.)

3.1.1. Kết quả xác định thành phần hóa học và hàm lợng % tinh dầu lá cây bởi bung

Bằng phơng pháp cất lôi cuốn hơi nớc, chúng tôi đã cất đợc tinh dầu của lá cây bởi bung có hàm lợng 0,45% (so với mẫu tơi) nh bảng 7. Tinh dầu bởi bung thu đợc có màu vàng nhạt mùi thơm hắc.

Bảng 7 : Kết quả tách tinh dầu cây bởi bung

Mẫu số 1 2 Khối lợng (kg) 2,5 2,5 Thời gian (phút) 150 180 Thể tích (ml) 11 11,25 Hàm lợng (%) 0,44 0,45

Kết quả từ phân tích GC-MS (hình 3.1) đợc trình bày ở bảng 8.

Bảng 8: Thành phần hóa học và tỷ lệ % các hợp chất trong tinh dầu lá cây bởi bung. TT Tên chất Tỷ lệ % 1 β- Pinen 0,67 2 dl- Limonen 0,05 3 β- Oximen 0,22 4 Linalol 0,09 5 Perilen 0,07 6 Xyclohexasiloxan 0,24 7 1,8-iridadien 0,60 8 α- Cubeben 0,52 9 α- Copaen 2,39 10 β- Elemen 11,73 11 iso- caryophylen 0,34 12 β- Caryophylen 43,11 13 α- Tecpinolen 0.06 14 Becgamoten 0.10

15 β- Selinen 5,33 16 Aromadendren 0,65 17 α- Amopheren 0,56 18 Gemaren- D 0,26 19 (+ -)- Lepidozen 1,74 20 β- Bisabolen 12,62 21 α- Amophen 0,10 22 δ- Cadinen 1,64 23 α- Calacoren 0,04 24 Caryophylen oxit 3,03 25 Nerolidol 0,34 26 β-Spathulennol 0,52 27 δ- Gujunen 0,09 28 Guaiol 0,18 29 γ- Cadinen 0,44 30 α- Bisabolen epoxit 0.30 31 α- Ylangen 0,20 32 Aromadendren 0,30 33 Allo-aromadendren 0,39 34 Adamantan 0,30 35 δ- Cadinen 0,37 36 γ-Muurolen 0,16 37 β- Eudesmol 0,37 38 α- Eudemol 0,70 39 Agathadiol 0,43

40 Dẫn xuất của azulen 0,16

41 Caryophylen oxit 0,16

42 Lanceol 0,20

43 2- (5,- nitro-3,- thietyl) pyrimidin 0,11

44 Camphen 0,08

45 Axit phenylaxetic 0,23

46 Axetat farnesyl- 2 0,18

47 Phytol 4,10

48 Các chất cha xác định 5,43

Từ kết quả phân tích GC-MS cho thấy trong lá cây bởi bung có tới hơn 47 hợp chất, trong đó 47 hợp chất đã đợc xác định, thành phần chính là: β- caryophylen (43,11%), β-bisabolen (12,62%) và β- elemen (11,73%).

So sánh với thành phần chính của tinh dầu bởi bung của các tác giả [21] là limonen (31,7%), β- pinen (24,4%), β- caryophyllen (11,1%)- (gọi là chemotype 1) và [6] có thành phần chính là limonen (31,7- 42,4%), β - pinen (24,4 – 27,4%), β- caryophylen (3,5 – 11,1%)- (gọi là chemotype 2) nhận thấy cây bởi bung do chúng tôi nghiên cứu trên là một chemotype mới (chemotype 3: β- caryophylen (43,11%), β-bisabolen (12,62%) và β- elemen (11,73%) )

Hình 3.1: Sắc kí đồ mao quản GC của tinh dầu lá cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.)

3. 2. Xác định cấu trúc của hợp chất A thu thu đợc từ thân cây bởi bung 3.2.1. Giải phổ chất A

Trớc khi đo phổ thì ta xác định định tính các nguyên tố có mặt trong phân tử. Để xác định các nguyên tố lạ khó nhìn thấy trong phổ nh: các halogen (trừ Br), S, kim loại, phốt pho… thì ta dùng phơng pháp định tính với thuốc thử thờng dùng. Tạo màu xanh beclanh để nhận biết nitơ, dùng mẫu thử lassaigue để nhận biết các halogen, lu huỳnh, phốt pho và nung trong không khí để xác định kim loại. Qua phép thử này cho ta thấy hợp chất A chỉ chứa C, H, O.

3.2.2. Dựa vào các tính chất hóa lý, phổ khối lợng, phổ 1H-NMR, 13C-NMR, HMBC và HSQC

- Các tính chất hóa lý.

Hợp chất A là chất dạng tinh thể hình kim màu trắng hơi vàng, dễ tan trong CH3OH, CHCl3, nóng chảy ở 108-1090C.

- Từ phổ khối lợng của chất A cho thấy có 8 pic ion phân tử trong đó pic ion có m/z lớn nhất tơng ứng với [M+H]+ (positive) có khối lợng bằng 259 do đó ta suy ra khối lợng phân tử của A là MA= 258. (hình 3.2 và hình 3.3)

Hình 3.2: Phổ khối của chất A

Hình 3.3: Phổ khối của chất A

- Từ phổ 1H – NMR (500MHz, CDCl3) (hình 3.4 và hình 3.5) cho thấy chất A có 14 nguyên tử hiđro ở các tín hiệu sau:

- Tín hiệu có δ= 1.5 ppm, singlet có J=10Hz ứng với 6H của 2 nhóm -CH3 ở vị trí C4' và C5'.

- Tín hiệu có δ= 3,96 ppm, singlet có J=10Hz ứng với 3H của nhóm metoxy ở vị trí C8.

- Tín hiệu có δ=5,69 ppm, duplet có J=10Hz ứng với 1H ở vị trí C2'. - Tín hiệu có δ= 6,21 ppm, duplet có J=9,5Hz ứng với 1H ở vị trí C3. - Tín hiệu có δ= 6,81 ppm, singlet ứng với 1H ở vị trí C5. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

- Tín hiệu có δ= 7,55 ppm, duplet có J=9,5Hz ứng với 1H ở vị trí C4. - Tín hiệu có δ= 6,31 ppm, duplet có J=10Hz ứng với 1H ở vị trí C1'.

Hình 3.4: Phổ 1H-NMR của hợp chất A

Hình 3.5: Phổ 1H-NMR của hợp chất A - Từ phổ 13C - NMR (125 MHz, CDCl3) (hình 3.6 - hình 3.8) cho thấy hợp chất A có 15 nguyên tử C, ở các tín hiệu: δ (ppm): 160,6 (C- 2); 113,2 (C- 3); 143,6 (C- 4); 113,0 (C- 4a); 119,1 (C- 5); 119,1 (C- 6); 121,1 (C- 1'); 131,2 (C- 2'); 77,8 (C- 3'); 28,2 (C- 4'); 28,2 (C- 5'); 149,3 (C- 7); 135,6 (C- 8); 148,3 (C- 8a); 61,3 (C- OCH3) .

Hình 3.6: Phổ 13C-NMR của hợp chất A

Hình 3.8: Phổ 13C-NMR của hợp chất

Bảng 9: Số liệu phổ 1H - NMR, 13C – NMR của chất A Vị trí Nhóm δH (ppm; J,(Hz)) δc (ppm) Thí nghiệm δc (ppm) Tài liệu [14] 2 C 160,6 160,3 3 CH 6,21 (d; 9,5) 113,2 112,8 4 CH 7,55 (d; 9,5) 143,6 143,4 4a C 113,0 114,3 5 CH 6,81 119,1 120,8 6 C 119,1 118,9 7 C 149,3 148,8 8 C 135,6 135,1 8a C 148,3 147,9 1' CH 6,31(d;10,0) 121,1 118,9 2' CH 5,69 (d; 10,0) 131,2 130,9 3' C 77,8 75,5 4’, 5’' CH3 1,5 (s) 28,2 27,9 8-OCH3 OCH3 3,96 (s) 61,3 60,8 * Từ phổ HMBC (hình 3.9 - hình 3.11) cho các tơng tác H C; C2- H4; C2- H3; C8a- H4; C8a- H5; C7- H1, ; C7- H5; C8- H4; C8- H5; C1,- H5; C5- H4; C5- H1,; C6- H2,; C3- H4; C4a- H4; C4a-H3; C8- H4,; C8- H9; C2,- H5,; C1,- H4,; C1,- H5,; C5- H1,; C4a- H1,; C3,- H1,; C3,- H2,; C3,- H4,; C3- H5; C4,- H5,; C5,- H4’.

Hình 3.9: Phổ HMBC của hợp chất A

Hình 3.11: Phổ HMBC của hợp chất A

* Từ phổ HSQC (hình 3.12 và 3.13) cho các tơng tác HC; C3- H3; C4- H4; C5- H5; C1,- H1,; C2,-H2,; C4,- H4,; C5,- H5,, C9-H9.

Hình 3.13: Phổ HSQC của hợp chất A

* Tìm công thức phân tử của chất A nh sau:

Gọi công thức hợp chất A là CxHyOzNt (Điều kiện: x, y, z € N), nếu có nitơ thì phải là số chẵn vì MA=258t=số chẵn. Ta có phơng trình:

12x+y+16z+14t= 258 với x=15, y=14  16z+14t= 64

z=(64-14t):16t=0 và z=4. Vậy hợp chất A có công thức phân tử là :

C15H14O4

Kết hợp với, HMBC, HSQC và so sánh với số liệu của phổ tham khảo đã công bố [20] nhận thấy hợp chất A phù hợp với cấu trúc của chất luvangetin

có công thức cấu tạo là:

O O H3C H3C OCH3 O 1 2 3 4 5 4a 6 1' 2' 3' 4' 5' 7 8 8a 9 luvangetin

Chơng 4: Kết luận

Qua quá trình nghiên cứu thành phần hoá học của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr ) ở Nghệ An, chúng tôi thu đợc một số kết quả nh sau:

1. Bằng phơng pháp chng cất lôi cuốn hơi nớc thu đợc tinh dầu lá bởi bung ở Nghệ An chiếm 0,45% (so với mẫu tơi) và tinh dầu thu đợc chứa hơn 47 hợp chất, trong đó có 47 hợp chất đã xác định thành phần chính của tinh dầu cây lá cây bởi bung là: β-caryophylen (43,11%), β-bisabolen (12,62%), β- elemen (11,73%), β-selinen (5,33%), caryophylen oxit (3,03%) và α- copaen (2,39%). So sánh với thành phần chính của tinh dầu bởi bung của các tác giả [21] là limonen (31,7%), β- pinen (24,4%), β- caryophyllen (11,1%)- (gọi là chemotype 1) và [6] có thành phần chính là limonen (31,7- 42,4%), β- pinen (24,4 – 27,4%), β- caryophylen (3,5 – 11,1%)- (gọi là chemotype 2) nhận thấy cây bởi bung do chúng tôi nghiên cứu trên là một chemotype mới (chemotype 3: β- caryophylen (43,11%), β-bisabolen (12,62%) và β- elemen (11,73%) )

2. Bằng phơng pháp ngâm chiết mẫu với dung môi chọn lọc đã thu đợc cao metanol. Từ đó đã phân lập đợc các hợp chất A.

3. Đã xác định cấu trúc của các chất A bằng một số phơng pháp vật lý hiện đại nh: phổ EI-MS, 1H- NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC và phơng pháp so sánh với phổ chuẩn trong trong tài liệu [20].

Kết quả phân tích cho thấy hợp chất A là: luvangetin

Tài liệu tham khảo

Tiếng Việt

1. Đỗ Huy Bích và những ngời khác (2004), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, NXB Khoa học và kĩ thuật, Hà Nội.

2. Nguyễn Mạnh Cờng (1999), Nghiên cứu thành phần hoá học của cây cơm rợu (Glycosmis Peteloti), cây mù hơng (Cinnamomum balanasea) và cây mạnh châu (Carya tonkinensis) ở Việt Nam, Luận án tiến sĩ hoá học.

3. Đỗ Tất Lợi ( 1999), những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học. 4. Phạm Hoàng Hộ (1992), Cây cỏ Việt Nam, Mekong printing, Montreal,

Canada. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

5. Võ Văn Chi, Vũ Văn Chuyên, Phan Nguyên Hồng, Trần Hợp, Lê Khả Kế, Đỗ Tất Lợi, Lơng Ngọc Toản, Thái Văn Trừng (1973), Cây cỏ thờng thấy ở Việt Nam, NXB Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội.

6. Lê Văn Hạc, Nguyễn Minh Hờng(2007), Nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) ở Hà Tĩnh và Nghệ An, tạp

chí Dợc học số 317 tháng 9/2007.

Tiếng Anh

7. D.P.Chakraborty, Glycozoline, (1966), A carbaazole derivative from

Glycosmis pentaphylla (Retz) DC, Tetrahedron Letters 7(6) 661-664.

8. M. Sarkar and D.P.Chakraborty, (1977), Some minor constituents from

Glycosmis pentaphylla, Phytochemmistry 16(12) 2007-2008.

9. D.P.Chakraborty, Glycozoline, (1969), A carbazole derivative, From

Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry 8(4) 769-772.

10. M. Sarkar and D.P.Chakraborty, Glycophymoline, (1979), a new minor quinazoline alkaloid from Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry 18(4) 694- 695.

11. Kamaruzzman chakaraborty, Shyamali Roy and D.P.Chakraborty, (1989) ,Mupamine from Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry 28(2) 677-678.

12. P.Bhattacharyya and B.K. Chowdhury, Glycolone, (1985), a quinolone alkaloid from Glycosmis pentaphylla, phytochemistry 24(3) 634-635.

13. S. Mukherjee, M. Mukherjee and S.N. Ganguly, (1983), Glycozolinine, a carbazole derivative from Glycosmis pentaphilla, Phytochemistry 22(4) 1064- 1065.

14. P.Bhattacharyya, P.K. Chakrabartty and B.K. Chowdhury, Glycozolidol, (1985), an antibacterial carbazole alkaloid from Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry 24(4) 882-883.

15. S. S, Jash, G. K. Baswas, S. K. Bhattacharyya, P. Bhattacharyya, A. Chakrabortya and B. K. Chowdhury, (1992), carbazole alkaloids from

Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry 31(7) 2503-2505.

16. B. K. Chowdhury, A. Mustapha, M. Garba and P. Bhattacharyya, (1987), carbazole and 3-methylcarbazole from Glycosmis pentaphylla, Phytochemistry 26(7) 2138-2139.

17. M. A. Quader, M.T.H. Nutan and M.A. Rashid, (1999), Antitumor alkaloid from Glycosmis pentaphylla, Fitoterapia 70(93) 305-307.

18. T. R. Govindachari, B.R. Pai and P.S. Subramaniam, (1966), Alkaloids of

Glycosmis pentaphylla (Retz) correa. Tetrahedron 22(10) 3245-3252.

19. Harald Greger, Gabriela Zechner, Otmar Hofer, Frans Hadacek and Gerald Wurs, (1993), slphur-containing amides from Glycosmis species with different antifungal activity, Phytochemistry 34(1) 175-179.

Glycosmis pentaphylla (Retz) DC, Pharmaceutical Journal (J. of Pharmacy)

Vietnam, 1012-14.

20. Arthur H. R. Hui W. H. Ng Y. L. (1959) Examination of Rutaceae of Hong kong III. The akaloit, avincene from Zanthoxylum avicenae. J. Chem. Soc. 4007- 4009.

21. T.H. Thai; L.Severac and N.X Phuong, (2001), chemical composition of the essential oil extracted from branch with leaves and flowers of Glycosmis pentaphylla (Retz) DC, Pharmaceutical Joural (J. of Pharmacy) Việt Nam, 1012-14.

Phụ Lục

Sắc kí đồ mao quản GC của tinh dầu lá cây bỏi bung (Glycosmis pentaphylla Corr) ở Nghệ An.

Hình các phổ khối của hợp chất A

Hình các phổ HMBC của hợp chất A (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});