6 Lịch sử nghiên cứu và tách chiết collagen:
3.7 Xác định đặc tính lý hoá của collagen thu được:
Dịch chiết collagen được tạo tủa bằng NaCl ở 40C, 3h. Lấy tủa đem phân tích thu được kết quả như sau:
• Hàm lượng ẩm: 86.2 ± 0.7 %
• Tro: 1.92 ± 0.02 %
• Hàm lượng chất hữu cơ: 5.42 ± 0.09 %
• Hàm lượng lipid 0.13 ± 0.02 %.
3.8 Quy trình chiết collagen từ da cá tra bằng acid acetic và enzyme pepsin như sau:
Acid acetic + enzyme pepsin
Rửa sạch bằng nước Ngâm với NaOH 0.05N Ngâm H2O20.5% Rửa sạch bằng nước Cắt nhỏ Chiết collagen Collagen Da cá Ly tâm Kết tủa collagen bằng NaCl Ly tâm thu tủa Rửa sạch bằng nước
Chương 4:
KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận:
Qua kết quả nghiên cứu, chúng tôi đã tìm được điều kiện thích hợp cho quá trình thu nhận collagen như sau:
- Xử lý da cá bằng NaOH 0.05N trong thời gian 3h, H2O2 1% trong thời gian 3h, da cá sạch, có màu trắng, mùi giảm nhiều, da cá trương nhẹ, da không bị biến tính.
- Phương pháp tách chiết bằng enzyme pepsin kết hợp với acid acetic cho hàm lượng collagen cao( 5.4g/l) hơn phương pháp chiết bằng acid acetic (3.67g/l.)
- Xác định được nhiệt độ và thời gian, nồng độ tách chiết tốt nhất của enzyme pepsin kết hợp với acid acetic là:
• Nhiệt độ: 40C
• Thời gian: 24h
• Nồng độ enzyme: 0.05%
• Nồng độ acid: 0.5M
• Kết quả điện di cho thấy collagen thu được là collagen type I gồm hai chuỗi α1,2 (khoảng 115kDa) và 1 chuỗi β (khoảng 210kDa).
4.2 Kiến nghị:
- Trong quá trình nghiên cứu do thời gian có hạn nên việc thu thập tài liệu, tìm hiểu sâu rộng về quy trình sản xuất gelatin còn nhiều thiếu sót.
- Các trang thiết bị trong thí nghiệm còn nhiều hạn chế nên việc thực hiện đề tài gặp nhiều khó khăn.
Do đó, hướng đề xuất để hoàn thiện đề tài là:
-Phòng thí nghiệm cần được đầu tư thêm các trang thiết bị để thuận lợi cho việc nghiên cứunhư: máy đông khô, bộ chiết béo sohxlet, tủđông ...
PHỤ LỤC
MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH SẢN XUẤT
COLLAGEN
Hình 1: Da cá nguyên liệu
TÀI LIỆU THAM KHẢO
TIẾNG VIỆT
[1] Đỗ Quý Hải, Nguyễn Bá Lộc, Trần Thanh Phong và Cao Đăng Nguyên – Hoá Sinh – NXB đại học Huế.
[2] Phạm Thị Thanh Hồng, Trần Mỹ Quan, Nguyễn Thị Huyên, Nguyễn Quang Tâm – Thực Tập Sinh Hoá Cơ Sở - NXB đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh – 2004.
[3] Nguyễn Đức Lượng, Cao Cường, Nguyễn Ánh Tuyết, Lê Thị Thuỷ Tiên, Tạ Thu Hằng, Huỳnh Ngọc Oanh, Nguyễn Thuý Hương, Phan Thị Huyền – Công Nghệ Enzyme – NXB Đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh – 2004.
[4] Đỗ Minh Phụng – Đặng Văn Hiệp, Phân tích kiểm nghiệm sản phẩm thủy sản, Đại Học Thủy Sản Nha Trang,1997.
[5] Phan Thị Thanh Quế - Công Nghệ Chế Biến Thủy Sản – Đại Học Cần Thơ - 2005.
[6] Đặng Thị Thu, Lê Ngọc Tú, Tô Kim Anh, Phạm Thu Thuỷ, Nguyễn Xuân Sâm - Công Nghệ Enzyme – NXB Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội – 2004.
TIẾNG ANH
[7] Perumal, S., O. Antipova, and J.P. Orgel, collagen fibril architecture, domain organization, and triple – helical conformation gorvem its proteolysis. Proc nalt Acard Sci USA, 2008.105(8).
[8] Shimizu, johsuke; shimizu, hideki; nagashima, koji; yamada, kunishige; takamashu, minori – Fish collagen and method of producing same – united stases patent 6271350 -2001.
[9] T.Randal – nature and structure of collagen – 1953.
TÀI LIỆU INTERNET
[10] http://www.biquyet.vn/Cham-soc-da/Tre-lai-nho-collagen-chuyen-dung.html
[11] http:// www Collagenline.com [12] http:// www Collagen4u.com
[13] http://hungvuongpanga.com/index.php?option=com content&task=view&id =59&Itemid=6§ionid=&catid=&title=Tin%20t%E1%BB%A9c
[14] http://vi.wikipedia.org/wiki/C%C3%A1_tra