loài bọ ựuôi kìm bắt mồi có ý nghĩa thuộc giống Euborellia
3.4.2.1. Nghiên cứu ựặc ựiểm hình thái
+ Phương pháp nghiên cứu ựặc ựiểm hình thái
-Pha trưởng thành: thu thập trưởng thành ngoài tự nhiên và những con nuôi trong phòng, mô tả ựặc ựiểm hình thái cơ thể, ựo kắch thước cơ thể, chiều dài, chiều rộng thân, ựếm số ựốt râu, ựếm số ựốt bụng. Mô tả ựặc ựiểm khác nhau giữa con ựực và con cái (số cá thể n ≥ 30).
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 19 - Pha trứng: nuôi trưởng thành cho ghép ựôi và cho ựẻ trứng, ựo chiều dài và chiều rộng của trứng. Quan sát mô tả hình dạng kắch thước, màu sắc của trứng từ khi ựẻ cho ựến khi sắp nở. đo kắch thước trứng (n ≥30).
- Pha ấu trùng: khi có trứng nở thì tiến hành nuôi ấu trùng cùng với nuôi sinh học trong phòng nuôi ở nhiệt ựộ 25- 300C, có bổ sung ẩm ựộ thường xuyên. đo kắch thước ấu trùng qua các tuổi bằng kắnh hiển vi soi nổi ựồng thời chụp ảnh minh hoạ, mô tả ựặc ựiểm hình thái ấu trùng BđK ựen các tuổi (n ≥ 30).
3.4.2.2. Nghiên cứu ựặc ựiểm sinh học
- Thắ nghiệm 1: Nghiên cứu thời gian phát dục từng pha, vòng ựời, khả năng ựẻ trứng, tỷ lệ trứng nở của bọ ựuôi kìm Euborellia annulipes Lucas nuôi bằng thức ăn công nghiệp (cám mèo) và thức ăn tự nhiên (rệp cải, sâu non sâu tơ, sâu khoang, sâu xanh bướm trắng):
+Vật liệu nghiên cứu
để nghiên cứu ựặc ựiểm sinh học của bọ ựuôi kìm Euborellia annulipes
Lucas cần chuẩn bị tốt nguồn vật liệu ban ựầu ựể ựảm bảo thành công cho thắ nghiệm. Nguồn vật liệu phải chuẩn bị cụ thể như sau:
- Rệp cải và các loài sâu dùng làm vật mồi trong các thắ nghiệm ựược nuôi trong các khay nhựa 60x40x20 cm trồng rau họ hoa thập tự và ựược ựặt trong phòng nuôi côn trùng cách ly bằng lưới dàỵ Rau cải bắp cũng ựựơc chuẩn bị trồng trước thắ nghiệm ngoài ruộng thực nghiệm tại Trung tâm BVTV phắa Bắc ựể lấy thức ăn tự nhiên là rệp cải, sâu tơ cho thắ nghiệm.
- Nguồn bọ ựuôi kìm
Thu thập trưởng thành, ấu trùng loài bọ ựuôi kìm ựen trên ruộng rau họ hoa thập tự ựem về phòng nuôi tập thể cho ựẻ trứng lấy nguồn bọ ựuôi kìm cho thắ nghiệm.
- Hộp nuôi bọ ựuôi kìm: Là các hộp nhựa có kắch thước khác nhau, nắp khoét lỗ rộng bịt lưới mắt dày ựể cho bên trong hộp thông thoáng, BđK non không chui ra ựược.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 20 - Giá ựể các hộp nuôi bọ ựuôi kìm.
- Panh, bút lông, giấy thấm, hồ gián, dao, kéo cắt giấy, sổ sách, kắnh lúp, nhiệt ẩm kế.
- BđK tuổi 1 mới nở cùng ngàỵ + Phương pháp nghiên cứu * đối với pha trứng
- Theo dõi số lượng trứng ựẻ và thời gian phát dục pha trứng: tiến hành thu thập bọ ựuôi kìm ngoài ựồng ruộng về nuôi cho ựến pha trưởng thành. Sau ựó ghép ựôi theo cặp thả trong hộp nuôi bọ ựuôi kìm, có bổ sung thức ăn và ựộ ẩm thường xuyên. Theo dõi ghi chép thời gian bọ ựuôi kìm ựẻ trứng, số quả trứng/ổ, số ổ trứng/ 1 BđK ựẻ, tỷ lệ trứng nở, sự thay ựổi màu sắc của trứng qua các ngày ựồng thời xác ựịnh thời gian phát dục của pha trứng (n = 30).
* đối với pha ấu trùng
- Nuôi BđK ựen mới nở cùng ngày trong hộp nhựa nhỏ, mỗi hộp thả một BđK, ựáy hộp ựựng bông thấm nước ựể gĩư ựộ ẩm.
- Số lượng cá thể nuôi: Nuôi 50 cá thể trong ựiều kiện thức ăn bằng cám công nghiệp, 50 cá thể nuôi bằng thức ăn tự nhiên (sâu non, rệp rau).
- Hàng ngày vào những giờ nhất ựịnh thay thức ăn kiểm tra và bổ sung ẩm ựộ, lấy mẫu ra quan sát theo dõi thời gian phát dục qua các tuổi của BđK, tiếp tục theo dõi cho tới khi bọ ựuôi kìm hoá trưởng thành. Theo dõi BđK lột xác, số lần lột xác, thời gian phát dục ở mỗi tuổi (n=50)
* đối với pha trưởng thành
- Khi bọ ựuôi kìm hóa trưởng thành tiến hành ghép cặp ựực cái và tiếp tục cung cấp thức ăn như trên, quan sát ghi nhận ngày ựẻ quả trứng ựầu tiên; trứng ựẻ ựược tách ra khỏi bố mẹ, tiếp tục nuôi theo dõi ựến khi trưởng thành chết ựể xác ựịnh ựời BđK (n=50
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 21 + Chỉ tiêu theo dõi: Thời gian phát dục từng pha, vòng ựời và ựời của bọ ựuôi kìm; Số trứng/ổ, tỷ lệ trứng nở.
-Thắ nghiệm 2: Tìm hiểu khả năng ăn rệp rau, sâu tơ, sâu khoang của BđK
Euborellia annulipes Lucas trong phòng thắ nghiệm:
+ Phương pháp nghiên cứu:
- Thức ăn thắ nghiệm: Thu rệp rau ngoài ựồng ruộng về thả trên cây rau ựể nhân số lượng; Thu sâu tơ tuổi 4-5, nhộng về phòng nuôi cho vũ hoá ựẻ trứng, khi trứng nở lấy sâu làm thắ nghiệm; Sâu khoang: Thu trứng sâu khoang trên ruộng rau về, khi trứng nở lấy sâu tuổi 1-2 làm thắ nghiệm.
- Thắ nghiệm tiến hành trong hộp nuôi cá thể bọ ựuôi kìm. Mỗi hộp thả một cá thể bọ ựuôi kìm mới hoá trưởng thành; Cung cấp thức ăn với lượng dư thừa (sâu non sâu khoang tuổi 1-2: 150 cá thể; Sâu tơ: 150 cá thể; Rệp: 200 cá thể;) và ựếm số vật mồi bị ăn/ ngàỵ
+ Chỉ tiêu theo dõi: Số vật mồi bị ăn 1, 2, 3 ngày sau thả.
- Thắ nghiệm 3: Xác ựịnh hệ số nhân bọ ựuôi kìm trong hộp nhân nuôi:
*Bố trắ thắ nghiệm: thắ nghiệm ựược bố trắ trong phòng với 3 công thức, 3 lần nhắc lại:
+ Công thức 1: 5 cặp bọ ựuôi kìm trưởng thành/hộp. + Công thức 2: 10 cặp bọ ựuôi kìm trưởng thành/hộp. + Công thức 3: 20 cặp bọ ựuôi kìm trưởng thành/hộp.
Hộp nhựa nuôi cá thể bọ ựuôi kìm Miệng hộp bịt lưới dày
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 22 Thức ăn là cám mèo ựược cung cấp dư thừa hàng ngàỵ Sau 2 tháng ựếm tổng số cá thể bọ ựuôi kìm trong mỗi công thức.
* Cách nhân nuôi bọ ựuôi kìm trong phòng: Thả bọ ựuôi kìm trưởng thành vào các hộp nhân nuôị Hộp nhân nuôi bọ ựuôi kìm là các hộp nhựa có kắch thước 17x21x8 cm, nắp khoét lỗ rộng bịt lưới mắt dày, trong có giá thể là ựất nghiền nhỏ trộn rơm rạ mục ựến 1/3-1/2 chiều cao hộp, giữ ẩm ựộ 70- 75%. Cung cấp thức ăn công nghiệp ( cám mèo) và hàng ngày thay thức ăn. * Chỉ tiêu theo dõi: Số cá thể bọ ựuôi kìm, hệ số nhân.
- Thắ nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của một số loại thuốc trừ sâu tới bọ
ựuôi kìm:
+ Bố trắ thắ nghiệm trong phòng: 5 công thức, nhắc lại 3 lần:
Thắ nghiệm với BđK ựen trưởng thành . Mỗi công thức thắ nghiệm với 25 cá thể bọ ựuôi kìm. Dung dịch thuốc ựã pha ựược thấm ựều trên giấy thấm, ựể khô tự nhiên trong bóng mát, lót giấy thấm ựó xuống ựáy hộp và thả bọ ựuôi kìm vào hộp, sau 30 phút ựưa bọ ựuôi kìm sang ựĩa petri sạch. Cung cấp thức ăn là rệp cải trong suốt thời gian theo dõị
+ Chỉ tiêu theo dõi: Số cá thể bọ ựuôi kìm chết sau 1, 3, 6, 24, 48 giờ.