2. TỔNG QUAN TÀI LIỆ U
2.4Vacxin phũng bệnh viờm gan vịt do virus
Vacxin phũng bệnh viờm gan vịt do virus cú 2 loại: vacxin nhược ủộc và vacxin vụ hoạt.
2.4.1 Vacxin vụ hoạt
Virus cường ủộc dưới tỏc ủộng của cỏc yờu tố vật lý, hoỏ học, ủộc lực của virus giảm ủi hoặcmất hẳn, khi ủú virus khụng cũn khả năng nhõn lờn trong cở thể vật chủ, khụng cũn khả năng gõy bệnh, virus này ủược dựng làm vacxin.
Theo (Gough 1981), vacxin vụ hoạt chế từ virus viờm gan vịt nuụi cấy trờn phụi gà. Sử dụng 3 lần vacxin viờm gan vịt typ I vụ hoạt nhũ dầu cho ủàn
vịt giống sẽ tạo miễn dich thụ ủộng cho vịt con. Cũng theo tỏc giả dựng vacxin viờm gan vịt nhược ủộc cho vịt lỳc 2 - 3 ngày tuổi vào thời ủiểm 22 tuần tiờm nhắc lại bằng vacxin vụ hoạt sẽ tạo ủược khỏng thể trung hoà cao hơn khi sử dựng 3 lần vacxin vụ hoạt.
Theo (Woolcock 1991), vacxin viờm gan vịt vụ hoạt ủược sản xuất từ virus viờm gan vịt typ I, virus ủược nuụi cấy trờn phụi gà, thu hoạch dịch phụi, vụ hoạt virus bằng BEI (Binary Ethylenimine) dựng bổ trợ dạng nhũ dầu LES - STM (Lipid Emulsion System - Salmonella typhimurium) và lympho B phõn bào. Vacxin bảo quản ở 40C trong thời gian 20 thỏng vẫn giữủược hiệu lực của vacxin. Vacxin viờm gan vịt vụ hoạt cú khả năng tạo miễn dịch cho ủàn vịt.
Sử dụng vacxin viờm gan vịt nhược ủộc kết hợp với vacxin vụ hoạt cũng tạo ủược miễn dịch cao ở ủàn vịt giống. Sử dụng vacxin viờm gan vịt nhược ủộc typ I sau tiờm bắp một lần vacxin vụ hoạt cho vịt sẽ tạo ủược miễn dịch thụủộng tốt ởủàn vịt con trong suốt chu kỳủẻ trứng.
2.4.2 Vacxin nhược ủộc
Virus cường ủộc dưới tỏc ủộng của cỏc yếu tố sinh học, tiờm truyền nhiều lần qua ủộng vật ớt cảm thụ, qua phụi, ủộc lực của virus giảm ủi, virus vẫn cú khả năng nhõn lờn trong cơ thể vật chủ nhưng khụng gõy bệnh, virus này ủược dựng làm vacxin.
Theo (Asplin, 1958), virus viờm gan vịt cường ủộc sau khi truyền ủời qua phụi gà, khả năng gõy bệnh cho vịt con giảm.
Theo (Hwang, 1965), ủó tỡm thấy một chủng virus mất khả năng gõy bệnh cho vịt từ lần tiờm truyền phụi gà thứ 20 trở lờn. đồng thời ụng cũng thấy ở chủng ủú mất khả năng gõy bẹnh cho vịt sau lần cấy truyền thứ 6 cho xơ phụi vịt nhưng vẫn cú khả năng gõy bệnh cho gà.
Theo (Hwang, 1965), cỏc chủng virus viờm gan cường ủộc sau khi ủó cấy truyền qua phụi gà khụng cũn khả năng gõy bệnh cho vịt con, nhưng virus
vẫn nhõn lờn trong tế bào cỏc mụ so với chủng virus viờm gan cường ủộc thỡ mức ủộ nhõn lờn của virus này là thấp hơn.
Trờn cơ sở nghiờn cứu này nhiều chủng virus viờm gan vịt nhược ủộc ra ủời bằng phương phỏp giảm ủộc trờn phụi. Chủng TN do Asplin tạo ra (Asplin, 1958), virus viờm gan vịt giảm ủộc sau khi cấy truyền trờn phụi gà từ ủời thứ 23. Theo Hwang và Dougherty (1964), ở ủời thứ 26 virus mới giảm ủộc lực.
Hiện nay vacxin viờm gan vịt nhược ủộc typ I dựng chủ yếu ở Chõu Âu giảm ủộc sau 53 - 55 lần truyền ủời qua phụi gà. Ở Mỹ loại giảm ủộc sau 84 - 89 lần cấy truyền (OIE, 2000).
Vacxin viờm gan vịt nhược ủộc nhược ủộc typ I ủược sản xuất trờn phụi gà 8 - 10 ngày tuổi, vị trớ tiờm là xoang niệu mụ, nuụi cấy ở nhịờt ủộ 370C. Sau khi tiờm phần lớn phụi chết trong vũng 19 - 72 giờ với bệnh tớch: phụi cũi cọc, phự phụi, xuất huyết trờn da, gan sưng xuất huyết, sau 3 - 5 ngày thu vacxin, thời ủiểm này lượng vacxin ủạt số lượng cao nhất, phụi chết trước thời ủiểm 24 giờ loại bỏ. Vacxin bảo quản ở nhiệt ủộ õm 700C trong vài năm.
Vacxin viờm gan vịt typ II nhược ủộc ủược giảm ủộc khi cấy truyền qua phụi gà 25 lần. Quy trỡnh sản xuất vacxin giống như virus nhược ủộc viờm gan vịt typ I. Loại vacxin này khụng dựng trong sản xuất chỉ dựng cho vịt con trong phũng thớ nghiệm .
Vacxin viờm gan vịt typ III nhược ủộc ủược giảm ủộc khi cấy truyền 30 lần trờn màng nhung niệu của phụi vịt, nuụi cấy ở nhiệt ủộ 370C. Sau khi tiờm phụi chết trong vũng 6 - 10 ngày với bệnh tớch của virus gõy trờn phụi, thu nước trứng và màng nhung niệu bảo quản ở nhiệt ủộ õm 700C trong vài năm.
Theo Asplin (1961); Balla(1984), cú thể dựng phương phỏp cho uống, tiờm dưới da, tiờm bắp với vacxin nhược ủộc viờm gan vịt typ I ủều tạo miễn dịch tốt.
Theo (OIE, 2000), ủưa vacxin nhược ủộc viờm gan typ II bằng ủường cho uống, tiờm dưới da, tiờm bắp. Virus viờm gan vịt typ III bằng ủường tiờm dưới da sẽ tạo ủược ủỏp ứng miễn dịch cao cho ủàn vịt.
Vacxin viờm gan vịt ủược giảm ủộc trờn phụi khi sử dụng cho vịt rất an toàn, ủộc lực của chủng virus ổn ủịnh và khụng trở lại ủộc lực với vịt mẫn cảm.
Khi sử dụng phương phỏp tiờm vacxin nhắc lại cú khả năng tạo miễn dịch cao cho ủàn vịt.
2.5 Vấn ủề phũng và chống bệnh
* Phũng bệnh
để phũng bệnh viờm gan vịt cú hiệu quả ủũi hỏi người chăn nuụi phải thực hiện tốt quy trỡnh vệ sinh thỳ y kết hợp với việc sử dụng vacxin.
Phũng bệnh bằng vệ sinh thỳ y ủối với cỏc cơ sở chăn nuụi vịt cỏch ly nghiờm ngặt ủối với vịt con, nhất là trong 4 -5 tuần ủầu. Nhiều tỏc giả nghiờn cứu ủó cho thấy tớnh khả thi của việc thanh toỏn bệnh ở những khu vực ủó lựa chọn thớ nghiệm. Những nơi này ủó thành cụng trong việc cỏch ly ủể bảo vệ ủàn vịt con với bệnh, bờn cạnh cụng tỏc vệ sinh phũng bệnh phải dựng vacxin cho ủàn vịt.
Sử dụng vacxin viờm gan vịt ủể phũng bệnh nhằm mục ủớch tạo cho vịt con ở lứa tuổi cảm thụ với bệnh cú miễn dịch và ủề khỏng với bệnh. để tạo miễn dịch cho vịt con cú nhiều cỏch.
Theo (Crighton, 1978), với trường hợp vịt con mới nở khi tiờm vacxin nhược ủộc typ I, sau 48 -72 giờ vịt cú miễn dịch, miễn dịch kộo dài trong suốt giai ủoạn vịt mẫn cảm với bệnh.
Vịt con của ủàn vịt giống khụng cú miễn dịch với bệnh viờm gan vịt cú thể dựng vacxin viờm gan vịt nhược ủộc typ I lỳc một ngày tuổi bằng ủường cho uống hoặc tiờm dưới da ủể gõy miễn dịch. Vịt con ủược nở từủàn mẹ cú miễn dịch, khỏng thể thụủộng giảm dần trong 2 tuần, nờn dựng vacxin nhược
ủộc typ I cho vịt vào thời gian 7 -10 ngày tuổi (Tripathy, 1986).
để tạo miễn dịch cho ủàn vịt con với bệnh viờm gan vịt ngoài việc sử dụng vacxin cũn cú thể dựng khỏng thể viờm gan vịt chế từ lũng ủỏ trứng, nhưng thời gian miễn dịch với bệnh ngắn (OIE, 2000). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
* điều trị và khống chế bệnh
đối với bệnh viờm gan vịt do virus gõy ra, ủể làm giảm thiệt hại của bệnh cú thể tiến hành một số biện phỏp:
- Qua nhiều nghiờn cứu, Levine và Fabricant (1950), nhận thấy là cú thể bảo hộ vịt con bằng cỏch tiờm bắp 0,5 ml khỏng huyết thanh từ vịt cú miễn dịch hay tiờm bắp hoặc tiờm dưới da 0,5 - 1ml khỏng thể lũng ủỏ. Khi xuất hiện vịt chết ủầu tiờn trong ổ dịch viờm gan vịt thỡ việc sử dụng khỏng huyết thanh là một biện phỏp kiểm soỏt hữu hiệu.
- Phỏt hiện sớm, can thiệp bằng cỏch tiờm khỏng huyết thanh miễn dịch hay khỏng thể viờm gan vịt chế từ lũng ủỏủể gõy miễn dịch cho vịt.
- Dựng vacxin tiờm thẳng vào ổ dịch.
Thực hiện nghiờm ngặt quy trỡnh vệ sinh thỳ y, trong ủú chỳ trọng ngăn khụng cho mần bệnh lõy lan bằng cỏch: khụng bỏn chạy vịt, khụng mua vịt nơi cú ổ dịch, xử lý xỏc chết khụng vứt bừa bói, tiờu ủộc khử trựng chuồng nuụi, dụng cụ, thức ăn, nước uốngẦ
* Những nghiờn cứu về bệnh viờm gan vịt và vacxin phũng bệnh ở Việt Nam
Năm 1978, Trần Minh Chõu và cộng sự ủó nghi cú bệnh viờm gan do virus ở vịt nhưng vào thời ủiểm ủú chưa phõn lập ủược mần bệnh (Trần Minh Chõu và Lờ Thu Hồng, 1985).
Năm 1979 - 1983, bệnh xảy ra ở nhiều ủịa phương làm chết rất nhiều vịt con, theo cỏc tỏc giả Lờ Thanh Hoà, Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bỏ Hiờn (1984), ở Gia Lõm - Hà Nội bệnh viờm gan vịt do virus xảy ra làm chết hàng
ngàn vịt con.
Năm 1983, Trần Minh Chõu và cộng sự ủó phõn lập ủược chủng virus cường ủộc (chủng TT) tại một trại chăn nuụi vịt ở Phỳ Xuyờn- Hà Tõy. Tỏc giả cho biết khi nuụi cấy trờn phụi vịt 12 ngày tuổi virus gõy chết phụi 100%, thời gian chết phụi từ 48- 96 giờ, phụi cú bệnh tớch xuất huyết. Cỏc tỏc giả làm giảm ủộc virus bằng cỏch cấy truyền 39 ủời trờn phụi gà và tạo ủược chủng nhược ủộc (chủng VN) cú ELD50/0,2 ml (Trần Minh Chõu và Lờ Thu Hồng, 1985).
Năm 1984, Lờ Thanh Hoà, Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bỏ Hiờn (1984), ủó nghiờn cứu ủặc tớnh sinh học của virus viờm gan vịt nhược ủộc chủng TN của Asplin và ứng dụng quy trỡnh sản xuất vacxin của Hunggari vào Việt Nam, cỏc tỏc giả cho biết vacxin ủạt chỉ tiờu an toàn và hiệu lực khi sử dụng.
Năm 1985, nghiờn cứu thăm dũ chế tạo chủng vacxin nhược ủộc viờm gan vịt bằng chủng virus phõn lập ủược tại ủịa phương. Cỏc tỏc giả cho biết qua nhiều ủời tiếp truyền phụi gà, chủng virus ủó giảm ủộc với vịt con và cho miễn dịch tốt (Trần Minh Chõu và Lờ Thu Hồng, 1985).
Năm 1985, Trần Minh Chõu, Lờ Thị Nụng, Nguyễn đức Tạo ủó xõy dựng quy trỡnh sản xuất vacxin từ 3 chủng viờm gan vịt nhược ủộc: TN (Hunggari), E52
(Phỏp) và VN (Việt Nam). Theo cỏc tỏc giả cả 3 chủng virus vacxin ủều an toàn và cú hiệu lực khi sử dụng (Trần Minh Chõu và Cộng sự, 1989).
Nguyễn Văn Cảm, Nguyễn Thu Hà, Nguyễn Khỏnh Ly (2001), khi ủiều tra 20 ổ dịch từ thỏng 1- 6 năm 2001 tại cỏc ủịa phương Hưng Yờn, Hà Tõy, Hà Nam, Hà Nội, Tuyờn QuangẦ ủó cho kết luận: đú chớnh là bệnh viờm gan do virus với tỷ lệ nhiễm trong ủàn lờn tới 100%. Lứa tuổi mắc bệnh từ 1 - 21 ngày tuổi, tỷ lệ chết từ 48,57% - 90%.
Theo Nguyễn Hữu Vũ, Nguyễn đức Lưu và cộng sự (2001) gần ủõy nhiều giống vịt, ngan cao sản nhập vào nước ta chưa thớch nghi với ủiều kiện mụi trường nờn bệnh viờm gan vịt xảy ra nhiều hơn. Bệnh xảy ra ở tất cả cỏc
giống vịt, ngan, giống ngan phỏp bị nhiều nhất 31/ 104 ủàn, sau ủú là giống vịt siờu trứng Trung Quốc 18/ 104 ủàn.
Theo Nguyễn Văn Cảm và cộng sự (2001) ủó nghiờn cứu biến ủổi bệnh lý bệnh viờm gan vịt do virus nhằm ủưa ra một phương phỏp chẩn ủoỏn chớnh xỏc. Cỏc tỏc giả cho biết bệnh tớch ủiển hỡnh về ủại thể chủ yếu là viờm gan, xuất huyết hoại tử chiếm tỷ lệ 79,66%- 100%, bệnh tớch vi thểủiển hỡnh ở gan cú tế bào viờm dạng ủơn nhõn, xuất huyết, hoại tử, tăng sinh ống mật với tỷ lệ 100%.
Bệnh viờm gan vịt gõy tổn thất lớn cho người chăn nuụi, nhưng việc nghiờn cứu về biện phỏp phũng trị bệnh cũn ớt (Nguyễn đức Lưu và Cộng sự, 2001).
Bờn cạnh nghiờn cứu sử dụng vacxin một số tỏc giả cũn nghiờn cứu ứng dụng khỏng thể ủể phũng trị bệnh viờm gan vịt do virus.Thỏng 8 năm 2001 cụng ty Hanvet ủó tạo ủược chế phẩm khỏng thể viờm gan vịt (Nguyễn đức Lưu, Vũ Như Quỏn, 2002).
Nguyễn Hữu Vũ và cộng sự (2001), chế phẩm khỏng thể viờm gan vịt khi sử dụng an toàn và hiệu quả cao khi phũng trị bệnh.
Theo Bựi Thị Cỳc (2002), khi nghiờn cứu về biến ủổi bệnh lý ủại thể, vi thể và siờu vi thể bệnh viờm gan vịt do virus cho biết: bệnh tớch siờu vi thể ủiển hỡnh là màng nhõn của tế bào gan bị thoỏi hoỏ và hoại tử, cỏc glucogen trong tế bào gan bị phỏ huỷ, ủồng thời xuất hiện cỏc tiểu thể hỡnh cầu cú bỏn kớnh 100 -300nm.
Theo (đào Văn Dưỡng 2002), cho biết bệnh viờm gan vịt bệnh thường xảy ra trờn ủàn vịt nuụi ở huyện Việt Yờn, Yờn Dũng, Tõn Yờn của Tỉnh Bắc Giang (86/534 ủàn) lứa tuổi mắc bệnh cao nhất lỳc 1 - 7 ngày tuổi chiếm tỷ lệ 61,63%, tỷ lệ chết cao 53,9 - 72%.
Theo (Nguyễn Phục Hưng, 2004) cho biết bệnh viờm gan vịt trờn cỏc àn vt 10 huy n thu c 4 t nh: Hà N i, H ng Yờn, Hà Tõy, B c Ninh, t l
vịt chết rất cao. Ở vịt 1 - 7 ngày tuổi chết 45,23%, vịt 8-21 ngày tuổi chết 34,4%, ở vịt 22- 42 ngày tuổi chết 18,9%.
Theo (Nguyễn Khỏnh Ly, 2004), trong thời gian 2002- 2003 một số tỉnh phớa bắc ủó xảy ra dịch viờm gan vịt do virus ở cỏc ủộ tuổi rất khỏc nhau từ 2 - 14 ngày tuổi. Tổng số vịt ở cỏc ổ dịch ủiều tra là 7798 con, số vịt chết là 5614 con chiếm tỷ lệ 71,99%. Trong ủú tỷ lệ vịt chết cao nhất là ở Hà Tõy chiếm 90% và thấp nhất là đụng Anh chiếm 48,57%.
Theo (Nguyễn Phục Hưng, 2004), vacxin nhược ủộc viờm gan vịt chế từ chủng virus DH -EG -2000 trờn phụi gà ủạt cỏc chỉ tiờu của vacxin: thuần khiết, an toàn và cú hiệu lực cao khi phũng bệnh, cú thể dựng vacxin tiờm thẳng vào ổ dịch khi dịch xảy ra, tỷ lệ sống sút (83,3 - 88,4%).
Theo (Ngụ đỡnh Long, 2005) cho biết trờn ủịa bàn huyện Hiệp Hoà tỉnh Bắc Giang virus viờm gan vịt xuất hiện và gõy bệnh trờn cỏc ủàn vịt ở 26 xó thị trấn, ở cỏc lứa tuổi khỏc nhau tỡnh hỡnh mắc bệnh cú khỏc nhau. Nếu ủược can thiệp bằng khỏng thể hoặc vacxin tỷ lệ chết giảm ủi nhiều.
(Nguyễn Bỏ Hiờn, 2007) tiến hành khảo sỏt một số ủặc tớnh sinh học của chủng virus vacxin nhược ủộc viờm gan viờm DH- EG- 2000 và bước ủầu nghiờn cứu chế tạo vacxin phũng bệnh. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Theo (Bựi Thanh Khiết, 2007) cho biết chủng virus vacxin nhược ủộc viờm gan vịt DH - EG -2000 cú xuất xứ từ nước ngoài trong ủiều kiện bảo quản ở Việt Nam, khụng bị thay ủổi cỏc chỉ tiờu về sinh học của giống: như tớnh thớch ứng và nhõn lờn trờn phụi gà 10 ngày tuổi.
3. NỘI DUNG - NGUYấN LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨU 3.1 Nội dung nghiờn cứu 3.1 Nội dung nghiờn cứu
3.1.1 Nghiờn cứu tỡnh hỡnh chăn nuụi vịt ở một số huyện thuộc ngoại thành Hà Nội
3.1.2 Nghiờn cứu tỡnh hỡnh bệnh viờm gan vịt do virus trờn ủàn vịt con ở một số huyện ngoại thành Hà Nội
3.1.3 Phõn lập virus viờm gan vịt và ủịnh typ virus phõn lập ủược
3.1.4 Khảo sỏt một sốủặc tớnh sinh học của chủng virus cường ủộc phõn lập ủược
3.1.5 Nghiờn cứu phương phỏp phũng bệnh viờm gan vịt cho ủàn vịt con
3.2 Nguyờn liệu.
* Giống virus
- Virus vacxin viờm gan vịt nhược ủộc DH- EG -2000 do bộ mụn Vi sinh vật - Truyền nhiễm - Bệnh lý, Khoa Thỳ y cung cấp.
- Giống virus viờm gan vịt cường ủộc phõn lập từ cỏc ổ dịch tự nhiờn.
* Phụi vịt
Phụi vịt 12-13 ngày tuổi, khoẻ mạnh ủược lấy từ ủàn vịt mẹ khoẻ