3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.3. Dụng cụ nghiên cứu
Vợt thu mẫu, lồng lưới nuôi sâu, tủ ựịnh ôn, hộp petri, hộp nhựa nuôi sâu, kắnh lúp, kắnh hiển vi soi nổi, thước ựo, bút lông, cồn, lọ ựựng mẫu, ống nghiệm, kéo, bút lông, kim cắm mẫu, vải màn cách ly, bình phun nước, chậu trồng cây, hộp xốp, hoá chất nghiên cứu, sổ sách ghi chép số liệụ
Bình bơm tay ựeo vai, quần áo bảo hộ lao ựộng, găng tay, ủng, mũ, khẩu trang, thùng gánh nước, xô, chậu pha chế thuốc, cọc tiêu, dây nilon....
3.3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.3.1. Thắ nghiệm trong phòng 3.3.1. Thắ nghiệm trong phòng
+ Nguồn sâu: Thu sâu non tuổi lớn trên ruộng lạc tại khu khảo nghiệm ựem về nuôi tiếp cho vào nhộng ựến trưởng thành. Sau ựó cho ghép ựôi ựể thu trứng. Nuôi tiếp ựến khi sâu non qua các lần lột xác và vào nhộng.
+ Tiến hành quan sát mô tả ựặc ựiểm hình thái, màu sắc, ựo ựếm kắch thước các pha phát dục bắt ựầu từ pha trứng. Sau khi trứng nở, nuôi sâu non bằng thức ăn là lá lạc, quan sát chúng lột xác chuyển tuổi cho ựến pha nhộng, rồi trưởng thành. Mỗi pha phát dục quan sát ắt nhất 30 cá thể.
- Tìm hiểu ựặc ựiểm sinh vật học của sâu róm Ọ postica: Kết hợp thắ nghiệm nghiên cứu ựặc ựiểm hình thái, sau khi thu ựược trứng, tiến hành nhân nuôi trong phòng thắ nghiệm và theo dõi các chỉ tiêu: Thời gian phát dục các pha, sức ựẻ trứng, thời gian sống của trưởng thành, tỷ lệ giới tÝnh, sức sống.
Thời gian phát dục các pha:
- Pha trứng: Chọn những quả trứng ựẻ trong một ngày cho vào hộp
petri, quan sát theo dõi ựến khi trứng nở ựể xác ựịnh thời gian phát dục của pha trứng và tỷ lệ trứng nở. Số trứng theo dõi: N ≥ 100 quả.
- Pha sâu non: Chọn những sâu non nở ra cùng một ngày, tiếp tục nuôi
ựể theo dõi ựến khi sẹu non lột xác chuyển sang tuổi 2. Thắ nghiệm tương tự ựể xác ựịnh thời gian phát dục của cịc tuổi 2, tuổi 3, tuổi 4, tuổi 5, tuổi 6 cho ựến khi sâu non hóa nhộng. N mỗi pha ≥ 30 cá thể.
- Pha nhộng: Chọn những cá thể vào nhộng cùng một ngày, theo dõi
ựến khi hóa trưởng thành, N ≥ 30 cá thể.
- Pha trưởng thành (Theo dõi thời gian tiÒn ựẻ trứng và sức ựẻ
trứng): Chọn những cá thể vũ hóa cùng một ngày, cho ghép ựôi ựể theo dõi thời gian tiền ựẻ trứng; thu cả số liệu về sức ựẻ trứng (N=30).
- Tỷ lệ giới tắnh: Tiến hành theo dõi tất cả các cá thể vũ hóa trưởng thành và xác ựịnh tỷ lệ ựực, cái của chúng.
- Tỷ lệ sống sót: Chọn các cá thể từ sâu tuổi 1 mới nở cùng ngày, tiến hành nuôi bằng lá lạc cho ựến khi chúng vào nhộng rồi vũ hóa trưởng thành. Mỗi ựợt theo dõi 100 cá thể.
3.3.2. Ngoài ựồng ruộng
3.3.2.1. Phương pháp ựiều tra
- điều tra xác ựịnh thành phần sâu róm hại lạc:
điều tra theo phương pháp tự do, không gian, thời gian cũng như ựiểm ựiều tra không cố ựịnh. Thu bắt toàn bộ mẫu sâu hại bắt gặp về nuôi tiếp ựể giám ựịnh; ựồng thời thu mẫu côn trùng ký sinh.
- điều tra diễn biến mật ựộ sâu non và trưởng thành sâu róm Ọ postica: điều tra theo phương pháp của Viện BVTV (2000) [23], ựiều tra 5 ựiểm chéo góc, mỗi ựiểm 1m2. điều tra ựịnh kỳ 7 ngày/lần. Riêng ựối với trưởng thành do mật ựộ thấp, nên ựiều tra băng cuốn chiếu, diện tắch băng ựiều tra mỗi lần: 10 m2 .
3.3.2.2. Khảo sát hiệu lực một số thuốc BVTV phòng chống sâu róm Ọ postica Bao gồm 2 thắ nghiệm diện hẹp, mỗi thắ nghiệm gồm 5 công thức, mỗi công thức nhắc lại 3 lần. Các thắ nghiệm ựược bố trắ theo khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh, diện tắch mỗi ô thắ nghiệm 50m2 , dải phân cách giữa các ô thắ nghiệm là 2m. Tổng diện tắch toàn khu thắ nghiệm là 1.500m2
ThÝ nghiỷm 1: Khảo sát hiệu lực của 1 số loại thuốc BVTV có nguồn gốc hoá học phòng trừ sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica giai ựoạn sâu non nở rộ.
Công thức Tên thuốc (Tên
thương phẩm) Chất hoạt ựộng Liều lượng 1 Lorsban 40 EC Chlorpyrifos Ethyl 1,00 lắt/ha
2 Regent 800WG Fipronil 0,08 kg/ha
3 Patox 95SP Captap 0,75 kg/ha
4 Dylan 2 EC Emamectin benzoate 0,25 lắt/ha 5 ậèi chụng - Phun nước lã
Ghi chú: Xử lý thuốc khi sâu non ra rộ (sau trưởng thành rộ 7 ngày)
ThÝ nghiỷm 2: Khảo sát hiệu lực của 1 số loại thuốc BVTV có nguồn gốc sinh học phòng trừ sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica giai ựoạn sâu non nở rộ.
Công thức Tên thuốc (Tên
thương phẩm) Chất hoạt ựộng Liều lượng 1 Dibaroten 5 WP Rotenone 1,00 lắt/ha 2 Kuraba WP Anbamectin +
Bacilus thuringgiensis 0,08 kg/ha 3 Delfin WG Bacilus thuringgiensis 0,75 kg/ha 4 Beauveria Beauveria bassiana
Vuill 0,25 lắt/ha
5 ậèi chụng - Phun nước lã
Ghi chú: Xử lý thuốc khi sâu non ra rộ (sau bướm rộ 7 ngày)
Phương pháp tiến hành: Thắ nghiệm ựược phun 1 lần với lượng nước thuốc 500 lắt/ha, ựược phun bằng bình bơm tay ựeo vai và ựược phun rải ựều trên toàn bộ ô thắ nghiệm
Thời ựiểm phun thuốc thắ nghiệm: Phun thuốc vào buổi chiều mát. - đối với thuốc phun thời ựiểm sâu non tuổi 1, 2 rộ:
điều tra mật ựộ sâu róm 4 ngù vàng trước khi phun thuốc và sau khi phun 1, 3, 7 và 14 ngàỵ
Xử lý số liệu: Số liệu thu thập ựược hiệu ựắnh theo công thức tắnh hiệu lực thuốc của Henderson Tilton và ựược xử lý thống kê theo các chương trình IRRISTAT 3.0, Excel
Ta x Cb --- Hiệu lực trừ sâu của thuốc (E %) = (1-
Ca x Tb
) x 100
Trong ựó: E % : Hiệu lực thuốc
Ca: Mật ựộ sâu sống trên công thức ựối chứng ở thời ựiểm sau phun. Cb: Mật ựộ sâu sống trên công thức ựối chứng ở thời ựiểm trước phun.
3.4. PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ VÀ BẢO QUẢN MẪU VẬT
Toàn bộ mẫu sâu hại ựược ngâm vào trong các lọ có chứa dung dịch cồn 35Ứ. Mẫu trưởng thành ựực của sâu róm 4 ngù vàng ựược ghim vào xốp và sấy khô ở tủ sấy 45o C trong thời gian 3-4 ngàỵ
3.5. GIÁM đỊNH MẪU VẬT
Mẫu sâu róm ựược PGS.TS đặng Thị Dung - Bộ môn Côn trùng, Khoa Nông học, Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội giám ựịnh theo tài liệu của Nhật Bản và trang Web. Googlẹcom.
3.6. PHƯƠNG PHÁP TÍNH TOÁN VÀ XỬ LÝ SỐ LIỆU
Σ ựiểm có sâu
* Tần suất xuất hiện (A%) = --- x 100 Σ ựiểm ựiều tra
Chỉ tiêu ựánh giá mức ựộ phổ biến của sâu hại ựược lượng hoá theo tần suất xuất hiện
- Rất ắt phổ biến (0-5% A); +: Ít phổ biến (6-25% A); ++: Trung bình phổ biến (26-50% A); +++: Rất phổ biến (> 50% A).
Tổng số sâu ựiều tra Mật ựộ (con/m2) =
Tổng diện tắch ựiều tra (m2) Σ nixi Thời gian phát dục từng pha =
N
Trong ựó: ni: Số cá thể có cùng thời gian phát dục ựến ngày thứ i; xi: Thời gian phát dục cá thể thứ i;
N: Tổng số cá thể theo dõi
Tổng số trứng ựẻ (quả) Sức ựẻ trứng (quả/cái) = Tổng số cá thể theo dõi Tổng số cá thể ựực Tỷ số ựực/cái = Tổng số cá thể cái * Xử lý số liệu
Số liệu nghiên cứu trong phòng sẽ ựược xử lý theo phương pháp thống kê thông thường (phần mềm của Microsolf Excel) và chương trình IRRISTAT 3.0
4. Kạt quờ nghiến cụu vộ thờo luẺn
4.1. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ SÂU RÓM 4 NGÙ VÀNG Orgyia postica Walker (Lep.: Lymantriidae)
4.1.1. đặc ựiểm hình thái sâu róm 4 ngù vàng Orgyia postica Walker
4.1.1.1. Pha trứng
Trứng sâu róm 4 ngù vàng có hình bán cầu, ựáy hơi lõm vào trong, ựây là vị trắ sâu non gặm vỏ trứng chui ra ngoàị Bề mặt vỏ trứng trơn nhẵn, kắch thước trứng nhỏ, trứng mới ựẻ có màu trắng sữa dần dần trứng có màu trắng ựục, trứng sắp nở có màu xám. Trứng ựược ựẻ tập trung thành các ổ gồm hàng trăm quả trứng, trên bề mặt ổ trứng có phủ một lớp lông của trưởng thành cáị đường kắnh quả trứng giao ựộng trong khoảng 0,5-0,9 mm, trung bình 0,74 ổ 0,02 mm (Bảng 4.1.)
Hình 4.1. Ổ trứng sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica
4.1.1.2 Pha sâu non
Sâu non sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica có 6 tuổị Cơ thể hình ống gồm 12 ựốt, lông rậm phủ khắp cơ thể, ựầu có 2 chùm lông nhô lên như 2 cái sừng,
các ựốt khác trên cơ thể. Có 8 ựôi chân: 3 ựôi chân ngực, 4 ựôi chân bụng và 1 ựôi chân mông. Mảnh ựầu và các ựôi chân màu vàng cam (trừ tuổi 1). Sâu non tuổi 3, 4, 5, 6 hoạt ựộng nhanh nhẹn, ăn khỏẹ Tuổi 1, 2 sâu chủ yếu ăn các lá non, lá búp chưa mở, ăn lá bánh tẻ thường chừa lại biểu bì dưới của lá.
Tuổi 1: Sâu non sau nở gặm ăn hết vỏ trứng, mới nở ắt hoạt ựộng, sâu
non có tập tắnh quần tụ lại quanh ổ trứng, sau nở vài giờ sâu hoạt ựộng nhanh nhẹn hơn. Sâu gặm ăn thịt lá chừa lại biểu bì dưới của lá, ở tuổi này sâu rất mẫn cảm với các ựiều kiện môi trường.
Sâu tuổi 1 cơ thể thon dài, màu vàng nâu nhạt, lông mọc thưa, chiều dài lông xấp xỉ chiều dài cơ thể, do cơ thể rất nhỏ và nhẹ sâu có thể nhả tơ phát tán nhờ gió tới nguồn thức ăn. đầu màu ựen, gốc 2 chùm lông ựầu màu ựen. Trên lưng 4 u thịt màu ựen nổi lên. Kắch thước sâu non tuổi 1 có chiều dài trung bình 3,21 ổ 0,09 mm, chiều rộng trung bình 0,59 ổ 0,02 mm (Hình 4.2, Bảng 4.1).
Hình 4.2. Sâu non tuổi 1 sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica
Tuổi 2: Sâu non tuổi 2 màu vàng tươi, ựầu màu vàng cam, lông dài ngắn
mọc tụ từ các gốc lông ở các ựốt trên cơ thể (chùm lông). Lưng ngực có 4 u thịt màu ựen nổi lên trên ựó có các lông ngắn mịn mọc, trên lưng 3 ựốt cuối có 3 ựốm ựen gắn liền nhaụ Hai bên sườn có 2 ựường vân màu nâu chạy dọc
ăn. Sâu non tuổi 2 có chiều dài trung bình 5,78 ổ0,16 mm, chiều rộng trung bình 1,24 ổ 0,04 mm (Hình 4.3, Bảng 4.1).
Tuổi 3: Sâu non tuổi 3 về hình thái tương ựối giống với tuổi 2, ở tuổi này các
các ựường vân 2 bên sườn và trên lưng ựậm hơn, các u lông mọc rõ trên lưng màu nâu ựen, có thể có u lông màu trắng xám ở u lông 3 hoặc 4. Trên lưng ựốt cuối có chùm lông dày mọc lên (chùm lông ựuôi). Hai chùm râu ựầu dài và rậm hơn so với tuổi 2. Lưng của ba ựốt 2,3,4 xuất hiện các vân màu nâu ựen. Sâu non tuổi 3 có chiều dài: 8-13 mm, chiều rộng trung bình: 10,37ổ0,29 mm (Hình 4.4, Bảng 4.1).
Tuổi 4: Sâu tuổi 4 các u lông vàng tươi bắt ựầu xuất hiện, gốc các u lông màu ựen. Thường thì 2 u lông thứ nhất và thứ hai dài và nhô cao hơn hai u lông còn lại, u lông thứ 3 nhỏ hơn, u lông thứ 4 màu trắng xám (ở ựa số cá thể), một số cá thể u lông này màu ựen. Hai bên sườn ựốt thân 5, 6 có 2 chùm lông màu trắng ựâm sang hai bên. Giữa lưng ựốt thân 10, 11 có hai chấm tròn màu ựỏ sậm. Chùm lông ựuôi màu nâu ựậm dày và dài ra, hướng chếch về phắa saụ Sâu non tuổi 4 có chiều dài trung bình: 12,85ổ0,28 mm, chiều rộng trung bình: 2,47ổ0,08 mm (Hình 4.5, Bảng 4.1).
Bảng 4.1. Kắch thước các pha phát dục của sâu róm Ọ postica
Chiều dài/ ựường kắnh (mm) Chiều rộng(1)/ sải cánh(2) (mm) Pha phát dục Nhỏ nhất Lớn nhất TB ổ SE Nhỏ nhất Lớn nhất TBổSE Trứng 0,5 0,9 0,74ổ0,02 SN tuổi 1 2 4 3,21ổ0,09 0,5 0,8 0,59 ổ 0,02 SN tuổi 2 4 7 5,72ổ0,16 0,8 1,6 1,24 ổ 0,04 SN tuổi 3 8 13 10,37ổ0,29 1.3 2,8 1,81ổ0,06 SN tuổi 4 10 15 12,85ổ0,28 2,0 3,0 2,47ổ0,08 SN tuổi 5 14 23 17,97ổ0,36 2,5 4,0 3,36ổ0,09 SN tuổi 6 19 26 23,43ổ0,28 3,0 4,5 4,12ổ0,07 Cái 10 15 11,72ổ0,2 4,5 5,5 4,78ổ0,05 Nhộng đực 8 11 9,43ổ0,15 3,0 4,0 3,55ổ0,38 Cái 9 14 10,62ổ0,22 4,0 6,0 4,82ổ0,97 2.3(1) 3,0(1) 2,63ổ0,04(1) TT đực 7,5 11.5 9,72ổ0,17 18,0(2) 26,0(2) 23,1ổ 0,4(2)
Ghi chú: TB: Trung bình; SE: Sai số chuẩn; Nhiệt ựộ TB 30,31oC, ẩm ựộ TB 75,11%.
Tuổi 5: Hình thái cơ thể khá giống tuổi 4, các u lông màu vàng tươi nhô
cao và phân biệt nhau rõ ràng. Các vân trên cơ thể màu nâu ựen chạy dọc lưng và 2 bên sườn, gần như bao phủ cả cơ thể sâu, phần thân màu vàng chỉ chiếm phần nhỏ. Sâu non tuổi 5 có chiều dài trung bình: 17,97ổ0,36 mm, chiều rộng trung bình; 3,36ổ0,09 mm (Hình 4.6, Bảng 4.1).
Tuổi 6: Hình thái hoàn toàn giống với tuổi 5, ựể xác ựịnh ựược tuổi này cần dựa vào lột xác (chủ yếu) và kắch thước sâụ đầu tuổi sâu hoạt ựộng mạnh, ăn khỏe; cuối tuổi sâu hoạt ựộng chậm chạp, ăn ắt, sâu thường bò lên cao tìm vị trắ hóa nhộng. Vị trắ sâu dệt kén hóa nhộng thường là nách lá, giữa hai lá, lắp hộp nuôị Sâu non tuổi 6 có chiều dài trung bình: 23,43ổ0,28 mm, chiều dài trung bình: 4,12ổ0,07 mm (Hình 4.7, Bảng 4.1).
Hình 4.7. Sâu non tuổi 6 sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica
4.1.1.3. Pha nhộng
Hình 4.8. Nhộng cái (a), nhộng ựực (b) sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica
Nhộng sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica thuộc loại nhộng màng, vỏ bọc nhộng là một màng mỏng, có thể nhìn rõ chân, râu ựầu, mầm cánh (nhộng ựực) úp ở phắa trước ngực. Phần lưng ngực của nhộng có ựám lông ựâm ra, ựây là dấu vết của các u lông còn lạị Dọc hai bên sườn nhộng có 6 ựôi lỗ thở màu nâụ Kén nhộng thường nằm ở dưới lá lạc hoặc giữa hai lá lạc ựược
kéo lạị Có thể phân biệt nhộng ựực, nhộng cái dựa vào hình thái, kắch thước nhộng.
Nhộng cái hình trụ, ựầu và ựuôi thon lại (nhộng cái cơ thể tròn hơn nhộng ựực). Có thể nhìn rõ mắt nhộng màu nâu nhạt. Ban ựầu nhộng có màu vàng xanh, vàng nhạt, sắp vũ hóa màu vàng nâu nhạt (Hình 4.8a). Nhộng cái có chiều dài trung bình 11,72ổ0,2 mm, chiều rộng trung bình: 4,78ổ0,05 mm (Bảng 4.1).
Nhộng ựực kắch thước nhỏ hơn nhộng cái, cơ thể nhộng hơi dẹt, phần ựầu và phần giữa to, phần ựuôi thon nhọn. Mầm cánh úp ở trước ngực cùng với chân, râu ựầụ Thấy rõ mắt nhộng màu ựen, to hơn mắt nhộng cáị Nhộng mới hóa màu vàng nhạt hoặc vàng xanh sau ựó có màu nâu, sắp vũ hóa nhộng màu nâu ựen (ựặc biệt là ựôi cánh, mắt, râu ựầu, lưng) (Hình 4.8b). Nhộng ựực có chiều dài trung bình 9,43ổ0,15 mm, chiều rộng trung bình: 3,55ổ0,38 mm (Bảng 4.1).
4.1.1.4. Pha trưởng thành
Trưởng thành cái không cánh, cơ thể dạng hình trụ, phần giữa phình to, ựầu và ựuôi thon lạị Phần ựầu và ngực ngắn khó phân biệt các ựốt; bụng có 6 ựốt, chiếm phần lớn cơ thể. đầu và mắt rất nhỏ. Cơ thể có màu trắng vàng hoặc màu vàng xanh, cơ thể ựược phủ một lớp lông dày, mịn. Khi ựẻ hết trứng, chết cơ thể chuyển thành màu nâu vàng. Trưởng thành cái có 3 ựôi chân ngực mảnh và yếu, thường rất ắt di chuyển, luôn bám vào vỏ nhộng, lá lạc; ựẻ trứng thành ổ, thời gian ựẻ trứng thường kéo dài 1, 2 ngàỵ Trưởng thành cái có chiều dài trung bình 10,62ổ0,22mm, chiều rộng trung bình: 4,82ổ0,97 mm (Hình 4.9a, Bảng 4.1).
Trưởng thành ựực cơ thể màu nâu sẫm, ngực và bụng màu vàng nâu, có các vân ngang màu ựen xen lẫn các khoảng nhỏ màu nâu nhạt trên cánh. Chân trưởng thành ựực có các lông to, dài bao phủ, ựặc biệt là ựốt ống và
sẫm. Khi ựậu cánh hơi xòe ra, 2 chân trước duỗi về phắa trước. Kắch thước cơ thể trưởng thành ựực dài trung bình 9,72ổ0,17 mm, rộng trung bình 2,63ổ0,04 mm, sải cánh trung bình 2,63ổ0,04 mm (Hình 4.9b, Bảng 4.1).
Hình 4.9. Trưởng thành cái (a), TT ựực (b) sâu róm 4 ngù vàng Ọ postica