2 O+ NH +3 ClO Phenol
3 3.21 Orthophosphate (PO )
4
3.21.1 Phương pháp xanh molybden
Nguyên tắc
Lân hòa tan trong nước được lọc qua màng lọc 0,45 µm. Các muối orthophosphate trong môi trường acid, ion PO
Molybdate ammonium. PO 4 3-
3-
4 sẽ cho một phức chất màu vàng chanh với thuốc thử
+ 12(NH 4 2) MoO 2 + 24H = (NH 4) 2PO 4.12MoO 3 + 21NH 4 + 12H 2O +
(-phospho molybdate NH ) 4
+ +
Dạng -phospho molybdate NH , trong sự hiện diện của các chất khử như SnCl , v.v..dễ bị khử thành dạng - phospho molybdate NH có màu xanh. Cường độ màu
4 2
+4 4
đậm hay nhạt phụ thuộc vào hàm lượng ion PO 4 3- có trong mẫu nước lúc ban đầu. +
(NH ) PO .12MoO + Sn + 16H = (NH ) PO .(4MoO .2MoO ) + Sn + 8H O Và được xác định bởi máy so màu quang phổở bước sóng 690m.
Hóa chất
- Dung dịch Amonium molybdate
Cân 25 g (NH 4 6) Mo 7O 24.4H 2O hòa tan trong 175 mL nước cất
Đong 280mL H 2SO 4đậm đặc pha với 400mL nước cất, để nguội Trộn lẫn hai dung dịch lại rồi pha loãng với nước cất thành 1000mL - Dung dịch SnCl2
Cân 2,5g SnCl 2.H 2O hòa tan trong 100mL Glycerin (Cung cấp nhiệt). Bảo quản dung dịch ở tủ lạnh
4 3 4 4 3 4 2 3 2 2
- Dung dịch chuẩn P-PO 4 3-
2+ + 4+
Dung dịch KH 2PO 4 500mg/l: hòa tan 0,2197g KH 2PO 4 trong 100mL nước cất Dung dịch KH 2PO 4 5mg/l: hòa tan 1mL dd KH 2PO 4 500mg/l thành 100mL với nước cất
Thiết lập mẫu chuẩn
Chọn 6 bình tam giác có dung tích 100mL, cùng kích thước, không màu lần lượt cho vào các hóa chất sau:
Phân tích chất lượng nước
Bảng 7.18. Các bước thiết lập mẫu chuẩn để phân tích orthophosphate bằng phương pháp xanh molypden . STT 1 2 3 4 5 6 Nồng độ mẫu chuẩn (mg/l) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Thể tích dung dịch KH PO 5mg/l (mL) 2 4 0 4 8 12 16 20 Thể tích nước cất (mL) 100 96 92 88 84 80 Tiến trình phân tích
- Lấy lần lượt 50mL nước mẫu đã được lọc loại bỏ vật chất lơ lửng có trong nước vào bình tam giác, cùng với 50mL từng nồng độ chuẩn cho vào 6 bình tam giác có kí hiệu sẵn nồng độ.
- Cho vào 2mL dd amonium molybdate, lắc đều - Cho vào 5 giọt SnCl 2, lắc đều
- Đo độ hấp thụ quang ở bước sóng 690m
Tính kết quả
Tính nồng độ P-PO 4 3- hiện diện trong mẫu dựa trên việc phương trình hồi qui tương quan giữa độ hấp thụ quang và nồng độ chất tan cần phân tích tương tự như các các phương pháp Methylen blue (phân tích H 2S), Indophenol blue (phân tích TAN), Salicilate (Phân tích NO )...
3.21.2 Phương pháp Acid ascorbic (4500-P E: Standard methods, 1998)
Nguyên tắc
Ammonium molybdate và potassium antimonyl tartrate trong acid trung tính phản
ứng với orthophosphate để tạo thành 1 dạng acid dị đa (heteropolyacid) acid- phosphomolybdate bị khử thành dạng có màu xanh tập trung molybde bởi acid ascorbic. - 3 Nồng độ của P-PO m. Thuốc thử 3-
4 sẽđược xác định bởi máy so màu quang phổở bước sóng 880
- H 2SO 4 5N: Pha 70 mL H 2SO 4đậm đặc với nước cất thành 500 mL.
- Dung dịch Potassium antimonyl tartrate: Hòa tan 0,12 g K(SbO)C 4H 4O 6.1/2H 2O trong 400 mL nước cất. sau đó pha loãng thành 500
mL.
- Dung dịch ammonium molybdate: hòa tan 20 g (NH 4 6) Mo 7O 24.4H 2O trong 500 mL nước cất.
Quản lý chất lượng nước nuôi trồng thủy sản
- Acid Ascorbic 0,1M: hòa tan 1,76 g trong 100 mL nước cất. Dung dịch ổn định o
khoảng 1 tuần ở 4 C.
- Thuốc thử kết hợp (combined reagent): Trộn các thuốc thử trên lại với nhau theo tỉ lệ sau đểđược 100 mL thuốc thử kết:
50 mL H 2SO 4 5N
5 mL potassium antimonyl tartrate 15 mL ammonium molybdate 30 mL acid ascorbic.
Trộn đều mỗi khi cho vào từng loại thuốc thử theo thứ tự nêu trên. Cho phép các thuốc thử trên ở nhiệt độ phòng trước khi phối hợp. Nếu độđục xuất hiện trong thuốc thử hổn hợp thì lắc đều rồi để yên cho đến khi độđục không còn xuất hiện. Thuốc thử này ổn định trong 4 giờ.
- Dung dịch mẹ (stock phosphate solution): Hòa tan 219,5 mg KH 2PO 4 trong 1000mL nước cất đểđược dung dịch có nồng độ chất chuẩn là 50 µg/mL hay 50 mg/L
- Dung dịch chuẩn (Standard phosphate solotion): Hòa tan 50 mL dung dịch mẹ
với 1000 mL nước cất để có được dung dịch chuẩn có nồng độ 2,5 µg/mL hay 2,5 mg/L
Tiến trình phân tích
- Lấy 50 mL mẫu nước và mẫu chuẩn cho vào bình tam giác 125 mL sạch và khô.
- Thêm 0,05 mL chỉ thị màu phenolphthalein. Nếu xuất hiện màu đỏ thì thêm từng giọt dd H 2SO 4 5N cho đến khi dung dịch vừa mất màu.
- Thêm 8 mL thuốc thử kết hợp (combined reagent) rồi khuấy đều.
- Sau 10 phút nhưng không quá 30 phút, đo độ hấp thụ quang từng mẫu ở bước sóng 880 m, sử dụng mẫu trắng làm dung dịch đối chứng.
- Khắc phục mẫu bịđục hay nhiễu màu: Nếu các mẫu sau khi cho vào các thuốc thử mà có màu hoặc đục thì phải chuẩn bị mẫu trắng bằng cách thêm tất cả các thuốc thử vào ngoại trừ acid ascorbic và antimonyl potassium tartrate. Lấy độ
hấp thụ quang của từng mẫu chuẩn và mẫu nước trừđi cho độ hấp thụ quang của mẫu trắng để loại trừ sau số do nhiễu màu
Quá trình thiết lập mẫu chuẩn, xây dựng đường chuẩn và tính kết quả (xác định nồng
độ chất tan cần phân tích) tương tự nhưở phương pháp xanh molypden.