Nguyờn liệu
Lỏ neem tươi thu hỏi trực tiếp trờn cõy, cựng thời gian vào ngày 15 hàng thỏng trong năm 2004 tại Trại Thạnh Lộc và Thủ Đức TP HCM và tại Ninh Phước, Ninh Thuận được xử lý đồng thời và phõn tớch ngay trong ngày.
Rầy nõy do Trung tõm nghiờn cứu bảo vệ thực vật phớa Nam (Tiền Giang) cung cấp. Lỳa Tài Nguyờn D14 do Viện Khoa học Kỹ thuật Nụng nghiệp miền Nam cung cấp. Chiết bột nhõn hạt neem bằng ethanol, hexane và nước và tiến hành thử nghiệm so sỏnh với dầu neem.
Phương phỏp :Định lượng dẫn xuất azadirachtin và nimbin trong lỏ neem
20 g mẫu lỏ neem được nghiền thành dạng past, ngõm chiết với 200 ml methanol trong 2 giờ và lọc qua giấy lọc. Lặp lại 5 lần. Gom dịch lọc và loại bỏ chlorophyll bằng than hoạt tớnh và rửa thụi bằng methanol. Cụ dịch thu được ở 50oC cũn 10 ml và loại mỡ trong dịch cụ bằng n-hexane. Dịch sau loại mỡ được lọc qua lọc 0,45 àm và đem phõn tớch HPLC trờn cột Bondapak C18, 125 A, 10 àm, 3,9 x 300 mm với lượng mẫu bơm vào cột 5 àl, tốc độ dũng 0,5 ml/phỳt, sử dụng dung mụi thụi cột là acetonitril : H2O2 (55 : 45) với detector DAD ở λ = 220 nm.
Đỏnh giỏ hiệu lực xua đuổi, gõy chết và biến thỏi đối với rầy nõu của dịch chiết nhõn hạt neem
Đỏnh giỏ hiệu lực xua đuổi: thả 10 con rầy nõu cỏi đó bị bỏđúi 5 giờ vào giữa ống nhựa dài 7 cm, đường kớnh 12 cm nằm ngang nối 2 chậu lỳa xử lý thuốc và khụng xử lý thuốc. Đếm số lượng rầy nõu bỏm trờn lỳa. Thớ nghiệm bố trớ theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiờn, 3 lần lặp lại với 4 loại dịch thử nghiệm ở cỏc nồng độ: 1,0 - 5,0 - 10,0 %. Hệ số xua đuổi tớnh theo Saxena (9).
Đỏnh giỏ hiệu lực gõy chết và biến dạng: thả 20 rầy nõu (7 ngày tuổi và trưởng thành) vào mỗi lồng cú sẵn chậu lỳa đó xử lý cỏc dịch thử nghiệm theo dóy nồng độ từ 0,2 -3,0%. Đếm số lượng rầy bị chết. Tiếp tục nuụi số rầy cũn sống để ghi nhận sự phỏt triển và biến dạng của rầy trưởng thành. Thớ nghiệm bố trớ theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiờn, 3 lần lặp lại với 4 loại dịch thử nghiệm ở cỏc nồng độ: 0,2 - 0,5 -1,0 - 2,0 - 3,0 %. Tớnh tỷ lệ chết của rầy nõu theo từng nghiệm thức, từđú tớnh giỏ trị LD50 của cỏc dịch thử nghiệm bằng phương phỏp phõn tớch Probit thao tỏc trờn phần mềm Excel.
Cỏc số liệu được phõn tớch Anova và xếp hạng cỏc nghiệm thức theo trắc nghiệm Duncan thao tỏc trờn phần mềm Statgraphic 7.0 (1).