- Hoàn thiện quy trỡnh biến nạp Trichoderma harzianum: biến nạp plasmid pPK2 cú mang gen khỏng hygromycin vào A.tumefaciens, biến nạp T.harzianum giỏn tiếp nhờ A.tumefaciens, theo dừi độ ổn định của cỏc dũng biến nạp và kiểm tra sự hiện diện của gen hph (khỏng hygromycin) bằng PCR.
- Hoàn thiện quy trỡnh biến nạp nấm gõy bệnh cõy Phytophtora palmivora: quan sỏt gắn kết của A.tumefaciens lờn bề mặt tơ nấm P.palmivora, biến nạp
P.palmivora giỏn tiếp nhờ A.tumefaciens, chọn ngưỡng khỏng hygromycin thớch hợp và theo dừi độ ổn định của cỏc dũng biến nạp, kiểm tra sự hiện diện của gen hph bằng PCR.
- Hoàn thiện quy trỡnh biến nạp nấm ăn Volvariella volvacea: phõn lập và khảo sỏt cỏc điều để nuụi cấy V.volvacea trong điều kiện in vitro, biến nạp V.volvacea giỏn tiến nhờ A.tumefaciens, chọn ngưỡng khỏng hygromycin thớch hợp, theo dừi độ ổn định của cỏc dũng biến nạp và kiểm tra sự hiện diện của chỉ thị bằng PCR.
3. í nghĩa thực tiễn và hiệu quảứng dụng thực tiễn
Đõy là phương phỏp mới, hữu hiệu dựng để chuyển gen vào vi nấm một cỏch cú chọn lọc và hiệu suất cao.
4. Kết quảđào tạo sau đại học
Thạc sỹ: 0 Tiến sỹ: 0
5. Sản phẩm khoa học đó hoàn thành
5.1. Cỏc bỏo cỏo khoa học tại cỏc hội nghị, hội thảo KH
[1]. Hoàng Quốc Khỏnh, Trần Hoàng Ngọc Ai. Chuyển gen khỏng hygromycin B vào vi nấm Trichoderma harzianum bằng phương phỏp giỏn tiếp nhờ Agrobacterium tumefaciens. Hội nghị toàn quốc lần thứ II Nghiờn cứu cơ bản trong Sinh học, Nụng nghiệp, Y học, Huế, 25-27/7/2003.
[2]. Trần Hoàng Ngọc Ai, Hoàng Quốc Khỏnh. Biến nạp di truyền giỏn tiếp nhờ Agrobacterium tumefaciens vào nấm bệnh cõy Phytophtora palmivora. Hội nghị Khoa học lần thứ IV Đại học Khoa học tự nhiờn TP HCM, TP Hồ Chớ Minh, 21/10/2004.
[3]. Hoang Quoc Khanh, Tran Hoang Ngoc Ai. Agrobacterium tumefaciens- mediated genetic transformation of the phytopathogenic oomycete Phytophtora palmivora. XXII Fungal genetics Conference, Pacific Grove, USA, March 18-23, 2003.
[4]. Hoang Quoc Khanh, Tran Hoang Ngoc Ai. Agrobacterium tumefaciens- mediated genetic transformation of the phytopathogenic oomycete Phytophtora palmivora. XIX International Congress of Genetics, Melbourne, Australia, July 6-11, 2003.
[5]. Tran Hoang Ngoc Ai and Hoang Quoc Khanh. Agrobacterium tumefaciens-mediated gentic transformation of the edible straw mushroom Vovaviella volvacea. XXIII Fungal genetics Conference, Pacific Grove, USA, March 15-20, 2005.
6. Đỏnh giỏ và kiến nghị
Đề tài đó đạt được cỏc mục tiờu đề ra, mặc dự gặp phải một số khú khăn vềđiều kiện làm việc. Tiếp tục hỗ trợ kinh phớ.
AGROBACTERIUM TUMEFACIENS-MEDIATED GENETIC
TRANSFORMATION OF FILAMENTOUS FUNGI ABSTRACT ABSTRACT
Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation is ultilized widely
in transformation of plant. Nowadays, the method is applied for different cells such as animal cells, filamentous fungi and mushroom. The goal of this project is setting up a new method for transformation of filamentous fungi by using A.tumefaciens mediation. The method was tested in different kind of filamentous fungi such as
XÂY DỰNG HỆ THỐNG TÁI SINH VÀ ỨNG DỤNG TRONG NGHIấN CỨU TẠO CÂY CẢI NGỌT CHUYỂN GEN KHÁNG SÂU
Mó sốđề tài: 10521
Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS. NGUYỄN VĂN UYỂN
Cơ quan cụng tỏc: Viện Sinh học nhiệt đới Địa chỉ liờn lạc: 1- Mạc Đĩnh Chi, Q. I ,
Điện thoại: 8978796 E-mail: geneng@hcm.vnn.vn Thành viờn tham gia:
- TS. Nguyễn Hữu Hổ - KS. Lờ Tấn Đức - ThS. Phạm Thị Hạnh - CN. Phan Tường Lộc - CN. Mai Trường 1. Túm tắt mục đớch, nội dung nghiờn cứu
- Xõy dựng hệ thống tỏi sinh cõy cải ngọt thụng qua việc nuụi cấy cỏc cơ quan mụ tế bào khỏc nhau như lỏ mầm và trụ mầm và nghiờn cứu ảnh hưởng của cỏc chất chọn lọc đến khả năng tỏi sinh của cõy tạo tiền đề cho việc chuyển gen.
- Xõy dựng hệ thống chuyển gen cho cõy cải ngọt.
- Kiểm tra thể hiện gen bằng cỏc phương phỏp: trong mụi trường cú chất chọn lọc và phản ứng PCR