Trên thế giới có nhiều nghiên cứu sử dụng alloxan gây tiểu đờng typ 1, tuy nhiên liều sử dụng, đờng dùng và động vật thí nghiệm công bố có nhiều điểm cha t- ơng đồng. Qua nghiên cứu tài liệu, chúng tôi nhận thấy các nghiên cứu thờng sử dụng alloxan với liều tiêm tĩnh mạch đuôi từ 60 -100 mg/kg trên chuột nhắt trắng, liều tiêm màng bụng thờng gấp 2 lần liều tiêm tĩnh mạch đuôi trên cùng động vật. Trên cơ sở tổng quan tài liệu chúng tôi lựa chọn động vật thí nghiệm là chuột nhắt trắng, đờng dùng là đờng tiêm tĩnh mạch đuôi chuột, liều dùng đợc khảo sát từ 40- 100mg/kg trọng lợng chuột.
Bảng 4. Kết quả gây ĐTĐ typ 1 bằng alloxan tiêm tĩnh mạch đuôi chuột Lô thử nghiệm Chỉ số glucose huyết trung bình (mmol/l)X SE±
Ng y 0à Ng y 3à Ng y 7à Lô 1 (liều 40mg/kg) 4,87 ± 0,89 8,95 1,38•83,77%*± 9,11 1,34•87,06%*± Lô 2 (liều 60mg/kg) 5,86 1,24± 11,85 4,11•102,21%*± 12,22 4,03•108,53%*± Lô 3 (liều 80mg/kg) 5,27 0,49± 27,28 8,30•± 417,64%* 30,7 3,09•482,54%*± Lô 4 (liều 100mg/kg) 5,77 0,66± 30,9 3,72•± 435,52%* **
• Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với P<0,05 của chỉ số glucose huyết tại thời điểm nghiên cứu so với ngày 0.
*Tỷ lệ % tăng glucose huyết thời điểm nghiên cứu so với ngày 0 ** Chuột chết 100%
Hình 14. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc tỷ lệ tăng glucose huyết vào liều tiêm alloxan
Từ bảng 4 và đồ thị hình 14 cho thấy, ngày thứ 3 sau khi tiêm alloxan chuột ở các lô 2,3,4 có chỉ số glucose huyết trung bình ≥ 10 mmol/l. Chỉ số glucose huyết các lô 1,2,3,4 ở ngày 3 so với ngày 0 khác biệt có ý nghĩa thống kê với P<0,05. Chỉ số glucose huyết tăng ở tất cả các lô và cao nhất là ở lô 4 (435,52%). Tỷ lệ % glucose huyết tăng khi tăng nồng độ alloxan, sự thay đổi rõ rệt biểu hiện ở bớc chuyển liều từ lô 2(102,21%) sang lô 3 (417,64%) với tỷ lệ % tăng gấp 3 lần cho thấy ngỡng phá hủy mạnh của alloxan đối với tế bào β đảo tụy.
ở ngày thứ 7 tỷ lệ % tăng glucose huyết so với ngày 3 tăng không đáng kể nhng sự phá hủy mạnh của alloxan đối với tế bào β đảo tụy đã gây chết chuột. Chỉ số
glucose huyết các lô 1,2,3,4 ở ngày 7 so với ngày 0 khác biệt có ý nghĩa thống kê với P<0,05.
Bảng 5. Tỷ lệ % gây mô hình thành công, tỷ lệ tử vong và hệ số biến thiên của alloxan
Lô
Tỷ lệ chuột đợc gây
TĐ thành công (%) Tỷ lệ chuột chết (%)
Hệ số biến thiên Cv(%)
Ngày 3 Ngày 7 Ngày 3 Ngày 7 Ngày 3 Ngày 7
Lô 1 10 30 0 0 15,41 14,71
Lô 2 50 80 0 0 34,68 23,98
Lô 3 80 60 20 40 30,42 10,06
Lô 4 50 0 50 100 12,03 0
Tỷ lệ gây mô hình thành công cao nhất ở lô 3 (80% chuột có chỉ số glucose huyết ≥ 10mmol/l). Tuy nhiên hệ số biến thiên của lô này là khá cao (30,42%) và có chuột chết với tỷ lệ (20%).
ở ngày thứ 7, chuột ở lô 2, 3 có chỉ số glucose huyết trung bình ≥ 10 mmol/l. Tỷ lệ thành công cao nhất ở lô 2 (80%) nhng hệ số biến thiên cao (23,98%). Với sự phá hủy mạnh mẽ tế bào đảo tụy khi tăng dần liều alloxan, tỷ lệ chuột chết ở lô 3 là 40% , chuột ở lô 4 chết 10 con (chiếm 100%). Tăng liều alloxan tỷ lệ thuận với tỷ lệ tử vong và mức độ phá hủy đảo tụy mạnh (biểu hiện glucose huyết tăng cao).
Với liều tiêm tĩnh mạch 60mg/kg vào ngày thứ 7 cho kết quả tốt nhất đáp ứng tiêu chuẩn gây ĐTĐ typ 1 (glucose huyết ≥ 10 mmol/l) và tỷ lệ tử vong thấp (0%) mặc dù hệ số biến thiên cao (23,98%). Cũng nh nhiều kết quả nghiên cứu khác đánh giá dùng alloxan cho nghiên cứu gây ĐTĐ typ 1 có hệ số biến thiên cao do vậy sẽ khó đánh giá chính xác khi tiến hành các thí nghiệm thử tác dụng hạ đờng huyết. Dùng alloxan để gây mô hình ĐTĐ typ 1 sẽ đợc cân nhắc khi không có nhiều sự lựa chọn.