2.3.1. Dụng cụ:
Micropipette (100 µl, 1000 µl) Đầu típ (100 µl, 1000 µl)
Quả bóp cao su
Becher (50 ml, 100 ml, 250 ml, 500 ml, 1000 ml) Lọ thủy tinh (250 ml)
Muỗng múc hóa chất
Đĩa petri nhựa (5 cm x 1,2 cm) Giấy nhôm
Giấy thấm
Buồng đếm hồng cầu (Neubauer – Đức) Lamelle
Cá từ
Ly thủy tinh
Kim tiêm (1 ml, 5 ml, 10 ml) (Vinahankbook Medical Supplies – Việt Nam)
Eppendorf (1 ml)
Đĩa 4 giếng (Sigma – Singapore) Parafilm
Erlen (50 ml)
Gòn không thấm, gòn thấm
Ống đong (100 ml, 500 ml, 1000 ml)
2.3.2. Thiết bị:
Cân phân tích (Mettler AEO) Cân điện tử (A&D – Nhật Bản)
Máy khuấy từ gia nhiệt (IKA – Mỹ, OSA – Anh và Stuart) Máy lắc (IKA, Mỹ)
Tủ cấy vô trùng (Laminar flow class II – NUAIRE, USA) Tủ sấy (Snike,Trung Quốc)
Tủ lạnh –80oC (Nhật)
Tủ lạnh thường dùng và tủ lạnh –20oC Nồi hấp khử trùng (Daihan, Trung Quốc)
Phin lọc vô trùng 0,2 µm (Minisart, sartorius, Germany) Kính hiển vi quang học (Olympus CH 30, Nhật Bản)
Kính hiển vi đảo ngược pha (Nikon Eclipse TE 300, Nhật Bản) Tủ ấm CO2 dạng khô (SANYO – Nhật Bản)
Hình 21: Tủ cấy vô trùng
2.3.3. Hóa chất:
Chitosan (Khoa sinh hóa, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên TP.HCM).
Gelatin (Merk - Đức)
Axit Hyaluronic (Sigma – Đức)
1–ethyl–(3–3–dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC, Sigma – Đức)
Dispase (Gibco, Mỹ) Agar (Merk, Đức)
Aceton 99.5% (Trung Quốc) Cồn 96o, 70o
PBS KCl 0.2g KH2PO4 0.2g NaCl 8g Na2HPO4.12H2O 2.885g Nước cất 1000ml
Thuốc nhuộm Trypan Blue
HEPES HEPES 11.915g
Nước cất 50ml
Môi trường E’MEM: Môi trường E’MEM có thành phần như sau:
Thành phần Nồng độ(mg/l)
Muối vô cơ CaCl2 200.0
` KCl 400.0 MgSO4.7H2O 200.0 NaCl 6800.0 NaHCO3 2200.0 NaH2PO4.H2O 140.0 Glucose D – Glucose 1000.0
Amino acid L – Argimime HCl 126.0
L – Glutamin 292.0 L – Histidine HCl H2O 42.0 L- Isoleucine 52.0 L – Leucine 52.0 L – Lysine HCl 73.1 L – Methyonine 15.0 L – Phenylalanine 33.0 L – Threonine 48.0 L – Tryptophane 10.0 L – Tyrosine 36.0 L – Valine 47.0 ` Vitamine D – Ca pantothenate 1.0 Choline Chloride 1.0 Acid Folic 1.0 I – Inositol 2.0 Nicotinamide 1.0 Pyridoxal HCl 1.0 Riboflavine 0.1 Thyamine HCl 1.0 Phenol Red 0.4% : 1 ml NaHCO3 7.5% vô trùng : 7.5 ml HEPES 1M vô trùng : 10 ml
Amphotericin B vô trùng : 125 µl Pen – strep 200X : 2.5 ml
Glutamine 200mM : 5 ml
Huyết thanh : 50 ml
(FBS: Fetal Bovine Serum)
Nước cất : đủ 500 ml
Hình 22: Bột chitosan Hình 23: Bột gelatin