1.1. Tuyển chọn chủng cĩ khả năng sử dụng dầu mạnh
Từ bộ sưu tập gồm 16 chủng vi khuẩn phân lập được trong mùn khoan dầu
khí mỏ Bạch Hổ –Vũng Tàu, chúng tơi tiến hành khảo sát khả năng sử dụng dầu
của chúng. Thí nghiệm được tiến hành trên mơi trường khống Gost cĩ bổ sung
5% dầu DO, lắc ở nhiệt độ 30o C trong 7 ngày. Khả năng sử dụng dầu được đánh giá định tính thơng qua độ đục của mơi trường và sự thay đổi trạng thái vật lí
của các giọt dầu. Từ đĩ, chúng tơi tìm được 3 chủng cĩ khả năng sử dụng dầu
mạnh là M150, MT3 và MX. Các chủng này lựa chọn cho các nghiên cứu tiếp
theo.
1.2. Đặc điểm hình thái của một số chủng phân huỷ dầu
Các chủng vi khuẩn ria trên đĩa chứa mơi trường hiếu khí tổng số 1% NaCl, để trong tủ ấm 30o C. Sau 24 giờ nuơi cấy đem ra quan sát hình thái khuẩn lạc, đồng thời cũng tiến hành nhuộm Gram để xác định hình thái tế bào, làm tiêu bản
giọt ép để quan sát khả năng chuyển động. Kết quả được thể hiện ở Bảng 1.
Bảng 1. Đặc diểm hình thái của một số chủng vi khuẩn phân lập
cĩ khả năng phân huỷ dầu
Kí hiệu
chủng Đặc điểm khuẩn lạc Đặc điểm tế bào
MT3 Trịn dẹt, mép khơng đều, màu
vàng nâu, hơi dẹt, khuẩn lạc to
2,5 -3 cm.
Que ngắn, Gram âm, khơng cĩ
khả năng chuyển động
MX Trịn đều, mầu xanh lá cây,
bĩng, lồi, khuẩn lạc nhỏ 1cm.
Que ngắn, Gram dương, khơng cĩ khả năng chuyển động.
M150 Trịn đều, bĩng lồi, mầu vàng, nhỏ 1 cm.
Que ngắn, hơi cong, Gram dương, khơng cĩ khả năng
Hình1. Hình thái khuẩn lạc chủng M150 trên mơi trường
hiếu khí tổng số 1% NaCl
1.3. Khả năng sinh CHHBMSH của các chủng vi khuẩn phân huỷ dầu
Để lựa chọn tiếp chúng tơi tiến hành đánh giá sơ bộ khả năng tạo CHHBM
của các chủng này. Khả năng tạo CHHBMSH được xác định bằng phương pháp
Pruthi - xác định chỉ số nhũ hố E24.
Các chủng được nuơi lắc trên mơi trường khoáng Gost chứa 5% (v/v) dầu
DO. Theo dõi liên tục và đo chỉ số nhũ hố E24 sau 5 ngày nuơi lắc, kết quả cho
thấy chủng M150 cĩ chỉ số nhũ hố cao nhất là 69,8%, chủng MT3 là 59%, chủng MX là 63%, đặc biệt chủng M150 cĩ tốc độ tạo CHHBM nhanh nhất chỉ
sau 3 ngày nuơi lắc.
Bảng 2. Khả năng sinh CHHBM của các chủng vi khuẩn
Chủng E24 (%)
M150 69,8
MT3 59,0
MX 63,0
Chủng M150 được lựa chọn nghiên cứu sâu hơn.
Theo kết quả phân tích trình tự 16S rARN đã xác định chủng M150 thuộc
tiếp theo chúng tơi tiến hành nghiên cứu một số các đặc điểm sinh lí sinh hố
của chủng này.