Chuẩn bị 5 bỡnh định mức dung tớch 25 ml, đỏnh số từ 1 đến 5, lần lượt cho vào cỏc bỡnh: 5ml H2SO4 0,75 M sau đú thờm vào mỗi bỡnh như sau:
+ Bỡnh 1: mẫu trắng; + Bỡnh 2: 2,5ml KBrO3 2.10-2 M + Bỡnh 3: 2,5ml KBrO3 2.10-2 M thờm 2,5 NO2- 50 ppm + Bỡnh 4: 2,5ml KBrO3 2.10-2 M thờm 5ml NO2- 50 ppm + Bỡnh 5: 2,5ml KBrO3 2.10-2 M thờm 5 ml NO2- 100 ppm
Cuối cựng thờm vào tất cả cỏc bỡnh 2 ml MB1,5. 10-4 M, thờm nước cất đến vạch mức, lắc đều. Ghi lại phổ hấp thụ của cỏc dung dịch trong bỡnh từ 1 đến 5 với dung dịch so sỏnh là dung dịch axit cú nồng độ 0,15M sau 1 phỳt kể từ khi thờm MB ở dải bước súng từ 500 nm đến 800 nm. Kết quả phổ hấp thụ quang của 5 dung dịch được biểu diễn ở hỡnh 1.
Đường (1) phổ hấp thụ của dung dịch MB và H2SO4 Đường (2) phổ hấp thụ của dung dịch MB; H2SO4 ; KBrO3 Đường (3,4,5) phổ hấp thụ của dung dịch MB; H2SO4 ; KBrO3; NO2- lần lượt cú nồng độ 5ppm,10ppm,20ppm
Hỡnh 1: Phổ hấp thụ quang của dung dịch MB khi cú mặt H2SO4 ; KBrO3 và NO2-
(Trong đú nồng độ cuối: MB 1,2 ì 10-5 M, H2SO4 0,15M, KBrO3 2.10-3 ). 1 3 4 5 2
Thực nghiệm cho thấy metylen blue (MB) là thuốc thử màu xanh, cú hai bước súng hấp thụ cực đại tại 1=612 nm và 2=650 nm trong mụi trường axit mạnh (đường 1,2). Hỡnh 1 cho thấy mật độ quang (A) giảm khi trong dung dịch cú KBrO3 (đường 2) chứng tỏ cú xảy ra phản ứng yếu giữa KBrO3
và MB. Khi cú mặt lượng vết nitrit trong hỗn hợp phản ứng thỡ A giảm nhanh (đường 3,4,5) chứng tỏ nitrit đó xỳc tỏc cho phản ứng. Tuy nhiờn khi cú mặt của nitrit thỡ bước súng hấp thụ cực đại của MB bị dịch chuyển với 1=640 nm và 2=664 nm. Vỡ vậy, cú thể định lượng được nitrit khi dựng nú làm xỳc tỏc cho phản ứng oxi hoỏ MB bằng KBrO3 khi đo độ giảm hấp thụ quang ở bước súng 2=664 nm.