Do sự định đoạt giới tính ở cá Rô phi chịu ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố như: di truyền, nhiệt độ ương cá non...cho nên cá thí nghiệm cần có sự đồng nhất về các yếu tố đảm bảo kết quả thí nghiệm được chính xác.
Một thuận lợi quan trọng khi thực hiện thí nghiệm tại Trung Tâm Quốc Gia Giống Thủy Sản Nước Ngọt Nam Bộ là toàn bộ khu ấp nằm trong nhà có mái che và có bể nước dự phòng khi cúp điện. Điều này giúp nước được cung cấp ổn định về lượng, tốc độ dòng chảy và nhiệt độ (giao động trong khoảng 22-250C). Do đó nhiệt độ nước không ảnh hưởng đến sự kết quả chuyển giới tính của cá trong suốt thời gian thực hiện thí nghiện trong khu ấp.
Các phôi có cùng tuổi phát triển đến giai đoạn 4 (cá vừa mới nở, có mang khối noãn hoàng lớn ở bụng) ở các khay ấp khác nhau được chọn ra các khay riêng biệt để chuẩn bị dùng làm thí nghiệm. Tập trung cá ngay ở giai đoạn 4 của phôi vì đây là giai đoạn dễ nhận biết nhất và cũng là giai đoạt quyết định để tính tuổi cá. Điều này đảm bảo sự đồng nhất về tuổi cá thí nghiệm và đủ về số lượng (do thu từ các cá mẹ khác nhau).
Tuổi của cá tính từ thời điểm nở là DPH (Day Post Hatching), ngày trứng được ấp nở thành cá được tính là ngày 0
Cá có 2 DPH được chia vào các khay thí nghiệm, mỗi khay có từ 110 đến 120 con tùy thuộc vào số phôi giai đoạn 4 có trong mỗi lần thu trứng. Phân chia cá 2 DPH để chuẩn bị thí nghiệm vì giai đoạn này cá ít di chuyển, thao tác đếm và phân chia cá theo các nghiệm thức được thực hiện dễ dàng, chính xác, nhanh chóng.
Các khay thí nghiệm sau đó tiếp tục được theo dõi, loại bỏ cá chết và bổ sung cá có cùng độ tuổi. Điều này đảm bảo đủ số lượng và sự đồng đều của cá thí nghiệm khi đến thời điểm xử lý.
26
Thời điểm được xác định để tiến hành thí nghiệm ngâm là 8-11-14 DPH
Cá đến 8 DPH thì tiến hành nghiệm thức 1: ngâm trong nước có pha MT với 3 mức nồng độ 1,2 - 1,6 - 2,0 mg/L. Thí nghiệm ngâm cá được thực hiện trong túi PE có kích thước 20 x 30 cm có bơm oxy. Mỗi túi có 200 ml nước có pha MT, 100 con cá và 200 ml oxy, thời gian ngâm cá là 2 giờ.
Thực hiện tương tự như trên cho nghiệm thức 2 là 11 DPH và nghiệm thức 3 là 14 DPH.
Các nghiệm thức:
- Nghiệm thức 1: nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ MT lên kết quả đực hóa ứng với cá bột 8 ngày sau nở
- Nghiệm thức 2: nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ MT lên kết quả đực hóa ứng với cá bột 11 ngày sau nở
- Nghiệm thức 3: nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ MT lên kết quả đực hóa ứng với cá bột 14 ngày sau nở
Cá bột 2 DPH Cá bột 11 DPH Cá bột 14 DPH
Ngâm trong túi nước có pha MT với nồng độ (1,2 - 1,6 - 2,0 mg/L) với thời gian ngâm là 2 giờ, mật độ ngâm 100 con/l, dinh dưỡng bình thường
Nghiệm thức 1 Nghiệm thức 2 Nghiệm thức 3 Cá bột 8 DPH
Đối chứng
Đến 21 DPH thì chuyển ra ao nuôi riêng biệt từng thí nghiệm trong vèo, cá 90 DPH thì kiểm tra cá chỉ tiêu