Định lượng sinh khối vi khuẩn bằng phương pháp mật độ quang.

Một phần của tài liệu Chọn nguồn nguyên liệu và điều kiện nuôi cấy thích hợp cho quá trình tạo sinh khối của chủng Lactobacillus fermentum HA6 (Trang 33 - 34)

Mục đích: Sử dụng phương pháp đo OD của dịch nuôi cấy vi khuẩn lactic từ

đó xác định được khối lượng sinh khối tạo thành. Cơ sở của phương pháp dựa vào sự phụ thuộc tuyến tính của OD giữa canh trường nuôi cấy vi khuẩn và khối lượng tế bào có trong canh trường đó khi ở một giới hạn nồng độ xác định.

Tiến hành: Xây dựng đường chuẩn sinh khối trước. Mẫu canh trường cần xác

định được ly tâm ở 6000 vòng trong 10 phút. Cân lượng sinh khối thu được rồi đem pha loãng với nước cất đến các nồng đô. 1/2, 1/3,1/4, 1/6, 1/8, 1/10 ... Sau đó đo OD của dung dịch sau pha loãng. Vẽ đường chuẩn sinh khối biểu diễn mối quan hệ giữa

OD và lượng sinh khối sau pha loãng. Sử dụng đường chuẩn cho các tính toán sau này.

Đo OD ở bước sóng 600 nm.

Xác định độ ẩm sinh khối theo phương pháp sấy

Nguyên tắc: Sinh khối vi khuẩn được sấy đến khối lượng không đổi. Căn cứ

vào khối lượng sinh khối trước và sau khi sấy, tính được hàm lượng nước trong nguyên liệu.

Tiến hành: Lấy một chén nhôm đem sấy ở 1050C đến trọng lượng không đổi, đặt chén trong bình hút ẩm đến khi nguội và cân chén chính xác đến 0.001g. Sau đó cho vào chén 3g mẫu, sấy ở 1050C trong 3 tiếng, sau đó lấy ra cho vào bình hút ẩm đến khi nguội bỏ ra cân, rồi lại đặt vào tủ sấy sấy tiếp trong 1 tiếng rồi đặt vào bình hút ẩm đến khi nguội và cân. Đến khi sai số giữa hai lần cân không quá0.001g thì quá trình sấy kết thúc. Kết quả: % 100 . 1 2 1 G G G G X − − = X: Độ ẩm(%)

G1: Trọng lượng chén và mẫu trước sấy (g) G2:Trọng lượng chén và mẫu sau sấy (g) G: Trọng lượng chén không (g).

Một số công thức tính

Một phần của tài liệu Chọn nguồn nguyên liệu và điều kiện nuôi cấy thích hợp cho quá trình tạo sinh khối của chủng Lactobacillus fermentum HA6 (Trang 33 - 34)