PHẦN 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1.2.Phân lập các chủng Rhizopus delemar từ một số mẫu nông sản, thực phẩm
phẩm
4.1.2.1. Kết quả phân lập các chủng R.delemar từ một số mẫu nông sản và thực phẩm thu thập ở một số tỉnh miền Bắc
Kết quả phân lập một số chủng Rhizopus delemar từ một số mẫu nông sản và thực phẩm thu thập tại các chợ của các tỉnh Hà Nội, Hưng Yên, Nam Định, Bắc Ninh được trình bày ở bảng 4.3.
Bảng 4.3. Kết quả phân lập các chủng Rhizopus delemar từ một số mẫu nông sản, thực phẩm STT Loại nông sản, thực phẩm Số lượng mẫu Số chủng R.delemar phân lập được Tỉ lệ chủng R.delemar phân lập được / số mẫu (%) 1 Bánh men thuốc bắc 8 7 87,5 2 Xoài 7 4 57 3 Quýt 6 4 6 7 4 Gạo mốc 4 3 75 Tổng số 4 25 20 80
Kết quả ở bảng 4.3 cho thấy trong số 25 mẫu nông sản và thực phẩm thu thập ở chợ của một số tỉnh đã phân lập được 20 chủng Rhizopus delemar . Trong đó, từ bánh men thuốc bắc phân lập được 7 chủng, chiếm chiếm 87,5%. Từ 7 mẫu xoài phân lập được 4 chủng R.delemar , chiếm 57%. Từ quýt, số chủng R.delemar phân lập được trên tổng số mẫu là 4/6, chiếm 67%. Số chủng R.delemar phân lập được từ 4 mẫu gạo mốc là 3 chủng, chiếm 75% và tỉ lệ chủng R.delemar phân lập được / tổng số mẫu nông sản và thực phẩm thu thập được là trung bình là 80%.
Mặc dù các mẫu nông sản và thực phẩm được sử dụng để phân lập
R.delemar còn kém đa dạng nhưng có thể nói rằng tần suất xuất hiện của R.delemar trên nông sản và thực phẩm là rất cao, đặc biệt là trên bánh men
thuốc bắc (87,5%).
Để có thể khẳng định những chủng phân lập được đúng là Rhizopus
4.1.2.2. Đặc điểm phân loại chủng R.delemar được tuyển chọn
Trong số 25 mẫu nông sản và thực phẩm được khảo sát, chúng tôi phân lập được 15 chủng R.delemar. Để xác định đặc điểm phát triển của các chủng nấm mốc phân lập được đúng là của chủng R.delemar, chúng tôi tiến hành nuôi cấy chủng này trên môi trường Sabauroud ở nhiệt độ 28 – 30oC. Hình thái khuẩn lạc sau 24 giờ nuôi cấy khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, bề mặt khuẩn lạc xốp, có dạng như sợi bông vải, màu trắng. Sau 28h nuôi xuất hiện các khối bào tử chín màu nâu chuyển sang màu đen. Khuẩn ty khí sinh chuyển từ màu trắng sang màu xám hoặc màu xám hơi vàng. Mặt trái khuẩn lạc màu trắng nhờ. Cấu trúc vi học của chủng R.delemar được quan sát dưới kính hiển vi điện có gắn máy chụp ảnh với độ phóng đại 100, 400 và 1000 lần. Cuống sinh bào tử không phân nhánh, thành cuống nhẵn, đường kính 6 – 15 µm. Bọng bào tử có kích thước lớn, đường kính 40 – 350 µm. Bọng đỉnh giá hình cầu. bào tử nội sinh, hình tròn hoặc hình trứng, bề mặt trơn, đường kính 4-11 µm.
Kết quả nghiên cứu về đặc điểm nuôi cấy, đặc điểm hình thái và cấu trúc vi học của chủng nấm mốc này và đối chiếu với khóa phân loại của Larone, chúng tôi nhận thấy những chủng này giống loài R.delemar. Chúng tôi khẳng định những chủng này đúng là chủng R.delemar để thuận thuận tiện cho những nghiên cứu về sau.
Chúng tôi đã tuyển chọn 10 chủng R.delemar đại diện cho 25 chủng đã phân loại ở trên. Đặc điểm hình thái và cấu trúc vi của 10 chủng R.delemar được miêu tả dưới đây.
- Chủng R. delemar R1 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, khuẩn lạc màu trắng, màu xám. Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 4-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 70 - 75μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 4-6μm.
trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 4-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 70 - 80μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 9-10μm.
- Chủng R. delemar R 3: Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, màu xám. Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 4-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 80 - 85μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 9-10μm.
- Chủng R. delemar R4 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, màu xám hơi vàng . Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 4-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 90 - 95μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 9-11μm.
- Chủng R. delemar R5 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, khuẩn lạc màu xám . Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 4-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 70 - 75μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 4-7μm.
- Chủng R. delemar R6 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, màu xám. Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 4-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 60 - 70μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 5-17μm.
- Chủng R.delemar R7 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, màu xám hơi vàng. Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 3-6μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 50 - 60μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 9-10μm.
- Chủng R.delemar R8 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, khuẩn lạc màu trắng, màu xám. Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 5-6μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 60 - 80μm. Bào tử nội sinh, hình cầu, kích thước 9- 11μm.
- Chủng R.delemar R9 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, khuẩn lạc màu trắng, màu xám . Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 3-5μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 60 - 65μm. Bào tử nội sinh, hình cầu, kích thước 11-12μm.
- Chủng R.delemar 10 : Khuẩn lạc trên môi trường Sabouroud sau 5 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC , khuẩn lạc mọc kín đĩa Petri, màu xám hơi vàng. Mặt trái khuẩn lạc có màu trắng nhợt. Cuống sinh bào tử nhẵn, đường kính 5-6μm. Túi mang bào tử lớn, hình cầu, kích thước 70 - 80μm. Bào tử nội sinh, hình cầu hay hình trứng, kích thước 8-10μm.
Hình 3: Cấu trúc vi học của chủng R.delemar R1 phân lập được từ mẫu bánh men thuốc bắc
Hình 4.:Hình ảnh bào tử của chủng R.delemar phân lập được từ mẫu bánh men thuốc bắc