KHẢ NĂNG SINH A. NIGER PME
(NH4)2SO4 không chỉ cung cấp nitơ cho môi trƣờng nuôi cấy mà nó còn quyết định giá trị pH của môi trƣờng. Nguyễn Đức Lƣợng (2004) cho rằng khi ion amoni (NH4+) đƣợc cơ thể vi sinh vật sử dụng, còn lại gốc anion vô cơ (SO42-) sẽ gây acid hóa môi trƣờng. Do đó, việc chọn tỉ lệ (NH4)2SO4 bổ sung thích hợp cho việc sinh tổng hợp enzyme có họat tính cao là điều đáng đƣợc quan tâm. Thí nghiệm khảo sát các tỉ lệ (NH4)2SO4 bổ sung (0,1; 0,2; 0,3) đến hiệu quả sinh PME. Trong thí nghiệm này, mật số nấm mốc vẫn đƣợc cố định (103 cfu/mL), cố định pH môi trƣờng là 4,0 để ủ trong 96 giờ ở nhiệt độ phòng để tiến hành khảo sát sự thay đổi hoạt tính PME sinh ra theo tỉ lệ (NH4)2SO4 đƣợc bổ sung vào trong môi trƣờng nuôi cấy. Kết quả thí nghiệm đƣợc ghi nhận ở bảng số liệu 7 và hình 16.
Bảng 7: Ảnh hƣởng của tỉ lệ (NH4)2SO4 bổ sung đến khả năng tổng hợp PME của A. niger
Tỉ lệ (NH4)2SO4, % Hoạt tính PME (U/mL)
0 (đối chứng) 355,14b 9,72
0,1 359,95b 9,10
0,2 383,20a 7,35
0,3 307,84c 13,39
Các chữ cái khác nhau trong cùng một cột biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa ở độ tin cậy 95% . Chữ số in đậm thể hiện hoạt tính PME cao nhất so với các mẫu còn lại.
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 0% 0.1% 0.2% 0.3% (NH4)2SO4 H oạt tí n h P M E ( U /mL)
Hình 16: Ảnh hƣởng của tỉ lệ (NH4)2SO4 bổ sung đến hoạt tính của PME
Việc bổ sung (NH4)2SO4 vào môi trƣờng có ảnh hƣởng đáng kể và làm tăng hoạt tính của pectinase (Sun Zhong-Tao, 2008).
Kết quả thí nghiệm cho thấy bổ sung (NH4)2SO4 ở tỉ lệ 0,2% là tối ƣu nhất. Ở tỉ lệ bổ sung này nấm mốc sử dụng tối đa nguồn nitơ và tạo ra pH môi trƣờng thích hợp nên gia tăng mật số nhanh chóng và sinh tổng hợp nhiều enzyme. Ở tỉ lệ bổ sung 0,1% không khác biệt ý nghĩa so với mẫu không bổ sung (NH4)2SO4, có thể do tỉ lệ bổ sung quá ít nên nấm mốc không sử dụng đƣợc nhiều do đó sự gia tăng mật số không khác biệt so với mẫu không bổ sung. Trong khi đó, với tỉ lệ (NH4)2SO4 bổ sung là 0,3%, do hàm lƣợng nitơ khá cao, nấm mốc sử dụng nitơ để gia tăng mật số và phát triển nhanh chóng, nên ít sử dụng thành phần dinh dƣỡng của môi trƣờng, nên mặc dù nấm mốc phát triển nhanh chóng nhƣng chƣa tổng hợp đƣợc enzyme thì đã chuyển sang giai đoạn tử vong. Theo Sun Zhong-Tao (2008), khi hàm lƣợng NH4+ bổ sung quá nhiều dẫn đến hoạt tính của các enzyme pectinse giảm xuống đáng kể. Nghiên cứu của Joshi (2006) cũng cho kết quả tƣơng đồng, ở hàm lƣợng (NH4)2SO4 bổ sung vào trong môi trƣờng nuôi cấy A.niger là 0,2% cho hoạt tính PME sinh ra cao nhất.
Vì vậy tỉ lệ bổ sung (NH4)2SO4 là 0,2% đƣợc lựa chọn cho sự sinh tổng hợp enzyme của nấm mốc.
CHƢƠNG 5 KẾT LUẬN-KIẾN NGHỊ