VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 3.1 Vật liệu, hóa chất và thiết bị
3.2.1.3 Xácđịnh hàm lƣợng lipid
Xác định hàm lượng lipid bằng phương pháp Soxhlet, theo tiêu chuẩn TCVN 4331 – 86.
Nguyên tắc
Dùng ether nóng để hòa tan tất cả chất béo tự do trong nguyên liệu, sau đó để bay hơi hết ether, cân chính xác mẫu còn lại và tính ra hàm lượng lipid.
Thiết bị, dụng cụ và hóa chất
+ Thiết bị và dụng cụ - Hệ thống Soxhlet - Máy xay hạt
- Cân phân tích có độ chính xác ± 0,002 mg - Tủ sấy điều chỉnh được nhiệt độ ± 10C - Giấy gói, lam kính và bình hút ẩm
+ Hóa chất: Ether petrolium
Cách tiến hành
Cắt giấy lọc có kích thước 8 x 9 cm, đem sấy ở nhiệt độ 1050C trong 3 giờ, sau đó cho vào bình hút ẩm và mang đi cân trọng lượng bì (Gb).
Cân 1 g bột mẫu khô tuyệt đối, chuyển sang bao giấy đã chuẩn bị sẵn như trên, gấp miệng bao để tránh cho mẫu bị rơi vãi, sấy lại bao đã đựng mẫu ở nhiệt độ 1050C đến trọng lượng không đổi, để nguội trong bình hút ẩm, đem cân, xác định được khối lượng bao và mẫu (Gm).
Cho gói mẫu vào bình trích ly của hệ thống Soxhlet. Lắp các ống dẫn dung môi theo nguyên tắc bình thông nhau, khởi động hệ thống sinh hàn.
Rót dung môi (Ether petrolium) vào bình trích ly cho đến miệng ống xiphông để dung môi trào xuống bình hứng, rót thêm cho đến 2/3 bình hứng thì dừng lại. Bình hứng được đặt trên bếp điện điều chỉnh được nhiệt độ.
Bật bếp điện ở nhiệt độ 45 – 500C để đun sôi dung môi, khởi động hệ thống Soxhlet. Quá trình trích ly kết thúc sau 10 – 12 giờ.
Kiểm tra xem đã trích ly hết lipid bằng cách: nhấc ống làm lạnh ra, lấy vài giọt dung môi trong bình trích ly nhỏ lên lam kính và để cho dung môi bay hết, nếu thấy không còn vết mờ do lipid bám trên lam kính thì việc trích ly xem như kết thúc.
Sau cùng, lấy gói mẫu ra để cho bay hơi hết dung môi, đem sấy khô gói mẫu ở nhiệt độ 1050C đến trọng lượng không đổi (khoảng 2 – 3 giờ), để nguội gói mẫu trong bình hút ẩm khoảng 30 phút, sau đó cân gói mẫu trên cân phân tích và xác định được khối lượng gói mẫu đã chiết rút mở ở độ khô tuyệt đối (Gc).
Tính kết quả
Hàm lượng lipid được tính theo công thức:
X = (Gm – Gc)*100/ G
Trong đó:
X: Hàm lượng lipid trong nguyên liệu ở độ khô tuyệt đối (%) Gm: Khối lượng gói mẫu ở độ khô tuyệt đối
Gc: Khối lượng gói mẫu đã chiết rút mở ở độ khô tuyệt đối G: Khối lượng mẫu đem phân tích