c. Trang thiết bị của máy quang phổ hấp thụ nguyên tử
2.4.1.Khảo sát chọn dung môi chiết
Các loại dung môi: Ethanol, methanol, ethylacetate
Phương pháp: ngâm chiết trong cùng điều kiện (nhiệt độ, thời gian..) trong 5 ngày Chuẩn bị 3 bình tam giác 250ml đã rửa sạch, tráng bằng nước cất và sấy khô.
Đánh số thứ tự từ 1 đến 3.
Lấy khoảng 3g bột rau má khô cho vào mỗi bình.
Thêm vào mỗi bình 150ml lần lượt các dung môi: ethylacetate, ethanol, methanol. Ngâm trong khoảng 5 ngày
Lọc lấy dung dịch, pha loãng 50 lần.
Sau đó tiến hành đo UV – VIS ta được mật độ quang các mẫu và so sánh chọn loại dung môi.
Phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS
a. Giới thiệu phương pháp:
Đây là phương pháp phân tích dựa trên sự so sánh độ hấp thụ bức xạ đơn sắc (mật độ quang) của dung dịch nghiên cứu với độ hấp thụ bức xạ đơn sắc của dung dịch tiêu chuẩn có nồng độ xác định.
Phương pháp này được dùng chủ yếu để xác định lượng nhỏ các chất, tốn ít thời gian so với phương pháp khác. Phương pháp này dùng để định tính, định lượng, ngoài ra nó còn cho phép nghiên cứu mối quan hệ giữa cấu trúc phân tử và sự hấp thụ bức xạ do đó dẫn tới làm sáng tỏ mối quan hệ giữa cấu tạo và màu sắc của các chất.
b. Kỹ thuật thực nghiệm:
Những bộ phận chủ yếu của máy đo UV-VIS là: nguồn bức xạ, bộ phận tạo đơn sắc, bộ phận chia chùm sáng, bộ phận đo và so sánh cường độ ánh sáng rồi chuyển thành tín hiệu điện…(detector) và bộ phận ghi phổ.
Để phát bức xạ tử ngoại ta dùng dèn đơteri còn để phát bức xạ khả kiến người ta dùng đèn W/I2. Bộ phận tạo đơn sắc thường dùng lăng kính thạch anh có nhiệm vụ tách riêng từng dãi sóng hẹp (đơn sắc). Bộ phận chia chùm sáng sẽ hướng chùm tia đơn sắc
luân phiên đi tới cuvet đựng dung dịch mẫu và cuvet đựng dung môi. Bộ phân phân tích (detector) sẽ so sánh cường độ chùm sáng đi qua dung dịch (I) và đi qua dung môi (I0). Tín hiệu quang được truyền thành tín hiệu điện. Sau khi được phóng đại, tín hiệu sẽ chuyển sang bộ phận tự ghi để vẽ đường cong sự phụ thuộc của lg(I/I0) vào bước sóng. Nhờ máy vi tính, bộ tự ghi còn có thể chia ra cho ta những số liệu cần thiết như λmax cùng với giá trị độ hấp thụ A (D).
Cơ sở của phương pháp phân tích quang phổ tuân theo định luật Lambert – Beer
Trong đó : A: mật độ quang
C: nồng độ chất tan (mol/l) l: bề dày cuvet đựng mẫu (cm).
ε: hệ số hấp thụ mol đặc trưng cho cường độ hấp thụ của chất nghiên cứu .