10 lít, 300C, 25 giờ Điều chỉnh nhiệt độ, tốc độ khuấy, lưu
2.2.2Phương pháp làm tiêu bản quan sát hình thái vi khuẩn và khuẩn lạc
Dùng que cấy vô trùng lấy một ít chủng giông vi khuẩn Nitrobacter sp. trên môi trường thạch nghiêng hòa đều trong một ống nghiệm có chứa 9ml môi trường dinh dưỡng, đặt vào tủ ấm 320C ttrong 18-24 giờ.
Từ canh khuẩn 6-8 giờ nuôi cấy, dùng que cấy vô trùng tiến hành cấy ria trên các đĩa Petri có chứa môi trường thạch dinh dưỡng
ủ ấm các đĩa Petri trong tủ ấm ở nhiệt độ 300C trong 24 giờ.
Quan sát hình dạng khuẩn lạc Nitrobacter sp. ssau 18-24 giờ nuôi cấy. Quan sát hình thái vi khuẩn Nitrobacter sp. bằng phương pháp nhuộm Gram.
• Làm vết bôi
- Lấy một phiến kính sạch , nhỏ một giột NMSL lên mặt kính
- Dùng que cấy vô trùng lấy mọt ít khuẩn lạc trên môi trường thạch ở đĩa Petri, dàn đều với giọt NMSL trên lam kính.
- Làm khô tiêu bản bằng các hơ cao, nhẹ nhàng trên ngọn lửa đèn cồn hoặc để khô tự nhiên
• Nhuộm Gram
- Nhỏ một giọt tím gentian lên vết bôi, để yên trong một phút, rửa sạch bằng nước cất vô trùng.
- Nhỏ một giọt dung dịch Lugol, để yên trong một phút và rửa sạch bằng nước cất vô trùng.
- Để tấm lam kính nghiêng, nhỏ cồn900 trong vài giây và rửa lại bằng nước cất vô trùng
- Nhuộm tiếp bằng dung dịch Fucshin, để yên trong một phút, sau đó rửa lại bằng nước cất, thấm khô nước trên tiêu bản bằng giấy thấm.
• Quan sát
- Nhỏ một giọt dầu soi kính lên vết bôi và quan sát ở vật kính với độ phóng đại ×40 và ×100.
-
• Đọc kết quả
-Những tế bà bắt màu tím thuộc nhóm Gram (+) - Những tế bào bắt màu hồng thuộc nhóm Gram (-)