HER2 và phân nhóm phân tử
4.3.4.1. Sự khuếch đại gen HER2 bằng kỹ thuật DISH
Tỷ lệ khuếch đại gen HER2 của bệnh nhân UTV trong nghiên cứu này là 24,0%. Có sự biến thiên khá rõ trong sự khuếch đại gen này từ 15,8% đến 44,2% qua các nghiên cứu khác nhau của các tác giả.
Theo ASCO 2007 [59], tỉ lệ khuếch đại gen HER2 trong ung thư vú trong khoảng 18-20%, tuy nhiên trong thực tế các nghiên cứu thì tỉ lệ có khuếch đại gen HER2 có thể không nằm trong giới hạn này. Điều này có thể khẳng định thêm tính chất khác biệt về sinh học tế bào ung thư vú giữa các cộng đồng, chủng tộc được nghiên cứu.
4.3.4.2. Mối liên quan giữa khuếch đại gen HER2 với sự biểu lộ protein HER2
Toàn bộ các trường hợp nhuộm HMMD có HER2(-) chiếm 66,0% và HER2(3+) chiếm 17,0% đều có kết quả lai tại chỗ gắn hai màu tương đồng. Trong số 17 trường hợp có HER2(2+) trên HMMD thì có 7 trường hợp có khuếch đại gen HER2 khi lai tại chỗ, chiếm 41,2%.
Nghiên cứu của Layfield (2016) cũng cho kết quả tất cả các trường hợp HER2 (-) đều không khuếch đại, HER2(3+) khuếch đại hoàn toàn và HER2(2+) khuếch đại 9,5%, [36].
Nghiên cứu của Đoàn Thị Phương Thảo (2013) tại Đại học Y Dược tp Hồ Chí Minh trên 46 trường hợp thực hiện kỹ thuật DISH, cho tỷ lệ khuếch đại gen ở nhóm HER2 (2+) là 20%, HER2 (3+) là 100% và 0% cho nhóm HER2 âm tính [11].
Bên cạnh đó, một số yếu tố quan trọng khác cũng có thể làm giảm sự bộc lộ các tín hiệu trong nhân tế bào đó là: 1/ Thời điểm xử lý mẫu mô, tối ưu là trong vòng 30 phút sau khi khối bệnh phẩm ung thư vú đã cắt
bỏ phải được chuyển đến khoa Giải phẫu bệnh để phẫu tích, chọn mẫu. 2/ Dung dịch cố định phải là dung dịch formol 10% trung tính (pH=7). 3/ Mẫu mô phải được cố định, tốt nhất trong 12-72 giờ tùy theo kích thước và số lượng mẫu.
Khi đọc kết quả lai tại chỗ cần tuân thủ theo hướng dẫn của ASCO/CAP khi khảo sát 1 tiêu bản DISH: 1/ Các tín hiệu của gen HER2, CEP17 phải hiện diện trên tế bào nội chứng; 2/ Chỉ khảo sát tín hiệu HER2, CEP17 trên vùng tế bào ung thư xâm lấn; 3/ Nhuộm nền phải được phân biệt rõ với các tín hiệu.
Nghiên cứu của Nunes (2013) khi thực hiện trên 184 cas để so sánh tỷ lệ khuếch đại gen HER2 trong 5 trường hợp sử dụng 5 kháng thể khác nhau để bộc lộ gen HER2 bằng hóa mô miễn dịch cho thấy với mỗi loại kháng thể khác nhau thì tỷ lệ khuếch đại gen cũng khác nhau
Để tối ưu hóa kết quả lai tại chỗ phát hiện sự khuếch đại gen HER2 trong UTV, qua nghiên cứu này chúng tôi có 2 nhận xét và khuyến nghị như sau: 1. Nên sử dụng hóa chất, kháng thể đồng bộ của cùng 1 hãng cung cấp để thực hiện cả kỹ thuật HMMD và ISH; 2. Cần chuẩn hóa quy trình xét nghiệm HMMD và ISH cho đồng bộ trên cùng 1 máy của cùng hãng sản xuất.
4.3.4.3. Phân nhóm phân tử dựa trên hóa mô miễn dịch và lai tại chỗ gắn hai màu
Nhóm lòng ống A chiếm tỷ lệ cao nhất (31,0%), sau đó là nhóm lòng ống B (28,0%) và nhóm bộ ba âm tính (23,0%), nhóm HER2 thấp nhất, chiếm 18,0.
Nhìn chung sự phân bố các phân nhóm phân tử UTV có khác nhau giữa các nghiên cứu nhưng đa phần các nghiên cứu đều cho kết quả phân nhóm lòng ống A chiếm tỷ lệ cao nhất bao gồm cả nghiên cứu của chúng tôi. Sự phân bố các phân nhóm có sự khác biệt như vậy, vì có sự khác nhau về đối tượng nghiên cứu, cách đánh giá kết quả nhuộm các dấu ấn và bảng phân nhóm phân tử sử dụng.