KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Đặc điểm chung của đối tƣợng nghiờn cứu
3.2.5.Chẩn đoỏn V.cholerae bằng kỹ thuật PCR
Kỹ thuật PCR dựng để phỏt hiện gen ctx, kỹ thuật này cú độ nhạy và độ đặc hiệu cao hơn nhiều kỹ thuật khỏc. Kỹ thuật PCR là phương phỏp hiện đại, nhanh sau 4-5 giờ, cú độ nhạy và độ đặc hiệu cao nhưng đũi hỏi trang thiết bị hiện đại sinh phẩm đắt tiền, kỹ thuật PCR ưu việt hơn cỏc kỹ thuật khỏc cú
thể phỏt hiện bệnh nhõn dương tớnh với V. cholerae ngay khi đó dựng thuốc
khỏng sinh .
* Tỷ lệ V. cholerae O1 dƣơng tớnh bằng kỹ thuật PCR
Việc ỏp dụng kỹ thuật PCR trong chẩn đoỏn bệnh tả đó cung cấp một cụng cụ nhiều triển vọng đỏp ứng nhu cầu cấp thiết phương phỏp chẩn đoỏn nhanh cú hiệu quả, khắc phục những nhược điểm của phương phỏp nuụi cấy. Kỹ thuật PCR xỏc định vi khuẩn tả trực tiếp trong mẫu phõn nhờ khả năng sao chộp khuếch đại số lượng đoạn trỡnh tự đặc hiệu trờn genome của vi khuẩn, kết quả cuối cựng của phản ứng PCR là sau n chu kỳ, tớnh theo lý thuyết từ một đoạn khuụn mẫu sẽ cú 2n bản sao, từ một đoạn cú thể lờn tới hàng tỷ sau 30 đến 40 chu kỳ, cỏc bản sao này do cú cựng kớch thước phõn tử và đủ lớn về mặt số lượng nờn cú thể phỏt hiện dễ dàng nhờ điện di trờn gel agarose.
Bảng 3.18. Tỷ lệ V. cholerae O1 dƣơng tớnh bằng kỹ thuật PCR
Kết quả PCR Tỷ lệ %
Âm tớnh 254 94,07
Dương tớnh 16 5,93
Tổng 270 100
Kết quả nghiờn cứu của chỳng tụi ( Bảng 3.18) trờn 20 mẫu nghi ngờ dương tớnh, bằng phương phỏp nuụi cấy và kỹ thuật PCR cho kết quả 16 mẫu dương tớnh với V. cholerae O1, cũn lại 4 mẫu khụng phải là V. cholerae O1.
Tỷ lệ V.cholerae O1 dương tớnh bằng kỹ thuật PCR, cho kết quả chớnh xỏc, kết quả mẫu dương tớnh V. cholerae O1 của kỹ thuật PCR giống như kết quả
của kỹ thuật nuụi cấy đều là 16 trường hợp và tỷ lệ dương tớnh V. cholerae O1 bằng kỹ thuật PCR chiếm tỷ lệ 5,93 % ( Hỡnh 3.12 )
Hỡnh 3.12. Band 2 đến 12 là V. cholerae , band 13 đến 16 là õm tớnh 3.3. Đỏnh giỏ cỏc kỹ thuật chẩn đoỏn V. cholerae