CHƯƠNG 2 NGHIÊN CỨU
2.2.9. Khảo sát cấu trúc hoá học hợp chất BH9.
Hợp chất BH9 có màu trắng, dạng vơ định hình, tan tốt trong dung môi methanol. Sắc ký bản mỏng với hệ dung môi n-hexane:ethyl acetate (6:4), hấp thu UV, hiện màu bằng dung dịch H2SO4 20% hơ nóng cho vết trịn màu hồng, có Rf= 0,6.
Phổ 13C-NMR(CD3OD, 125 MHz) (phụ lục 40) kết hợp phổ DEPT
(phụ lục 41) của BH9 cho thấy có sự hiện diện của hai carbon carbonyl ketone δC (200,7; 200,4) lần lượt tiếp cách với hai nối đôi, bốn carbon olefin tiếp cách với carbon carbonyl δC (165,0; 148,2; 131,7; 128,0), một nhóm methylene gắn carbon carbonyl [δC 50,6 (C-5)], hai carbon tứ cấp: trong đó, một carbon cetal [δC 80,0 (C- 7)] và một carbon tứ cấp [δC 42,7 (C-6)].
Từ những dữ liệu phổ trên, cho phép dự đốn hợp chất BH9 có khung sườn là một tetrahydro-oxepine.
Để làm rõ cấu trúc hợp chấtBH9, chúng tôi đã ghi phổ HSQC (phụ lục 42) và HMBC (phụ lục 43) của hợp chất này.
Phổ HMBC (phụ lục 43) của BH9 cho thấy hai proton olefin có cấu hình
ghép cặp trans δH 7,00 (H-1’) và δH 6,45 (H-2’) lần lượt tương quan với carbon cetal δC 80,0 (C-7), carbon methyl δC 27,7 (C-4’)và carbon carbonyl ketone δC 200,4 Phổ 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz) (phụ lục 39) của hợp chất BH9 cho thấy sự hiện diện của chín tín hiệu proton. Trong đó, có bốn tín hiệu proton methyl [δH 1,90 (3H, d, J=1,4 Hz, H-8); δH 1,02 (3H, s, H-9); δH 1,06 (3H, s, H-10)] và δH 2,31(3H, s, H-4’)]; hai tín hiệu của proton methylene [δH 2,26 (1H, d, J=17,2 Hz) và 2,60(1H, d, J=17,2 Hz), H-5] và ba tín hiệu proton olefin, trong đó đáng chú ý là hai tín hiệu proton olefinghép trans với nhau [δH 6,45 (1H, d, J=16,0 Hz, H-1’) và δH 7,00 (1H, d, J=16,0 Hz; H-2’)] .
Hình 2.10: Hệ nối đơi liên hợp ngồi vịng của hợp chất BH9.
Trong khi đó, proton olefin δH 5,96 (H-3) cho tương quanHMBC với carbon methyl δC 19,2 (C-8) và carbon methylene δC 50,6 (C-5). Đồng thời, proton methyl
H-8 cho tương quan với carbon olefin mang oxygen δC 128,0 (C-2) và proton
methylene H-5 cho tương quan với carbon carbonyl keton C-4, chứng tỏ C-2, C-3 đã tạo hệ nối đôi liên hợp với carbon carbonyl C-4. (hình 2.11)
Hình 2.11: Hệ nối đơi liên hợp trong vịng của hợp chất BH9.
Ngồi ra, proton methyl của H-9, H-10, H-8 và H-4’ lần lượt cho tương quan HMBC với các carbon C-2, C-6, C-2’, từ đó xác định được vị trí của các nhóm methyl gắn với các carbon tương ứng.
Mặc khác, proton H-8 cho tương quan HMBC với C-7, C-1’ và H-1’cho tương quan với C-7. Chứng tỏ, BH9 tạo vòng 7 như hình 2.12.
Khảo sát thành phần hóa học cao chloroform của lá bàng biển Calotropis gigantea L.
Dữ liệu khối phổ phân giải cao HR-ESI-MS (phụ lục 44) cho mũi ion phân tử giả [M + H]+ ở m/z 239,1278 phù hợp với công thức phân tử C13H19O4 (sai lệch 0,7 mmass). Nên công thức phân tử của BH9 là C13H18O4.
Tra cứu Scifinder ngày 28/8/2012 tại Caltech University, USA cho thấy hợp chất BH9 là hợp chất mới, lần đầu tiên được cô lập trên thế giới.
Dữ liệu phổ1H, 13C-NMR của hợp chất BH9 cho bởi bảng 2.15. Tương quan HMBC chính của hợp chất BH9 cho bởi hình 2.13.
Bảng 2.15: Dữ liệu phổ1H, 13C-NMRcủa hợp chất BH9. Vị trí Loại carbon BH9(CD3OD) δH ppm, J Hz δC ppm HMBC ( 1H →13C) 2J 3J 2 =C< - 165,0 - - 3 =CH- 5,96 (1H, t, J=1,2) 128,0 - 8, 5 4 >C=O - 200,4 - - 5 >CH2 2,26 (1H, d, J=17,2) 2,60 (1H, d, J=17,2) 50,6 4, 6 7, 10 6 >C< - 42,7 - - 7 >C< - 80,0 - - 8 -CH3 1,90 (3H,d, J=1,4) 19,2 2 3 9 -CH3 1,02 (3H, s) 24,9 6 5, 7, 10 10 -CH3 1,06 (3H, s) 23,5 6 5, 7, 10 1’ =CH- 7,00 (1H, d, J=16,0) 148,2 2’, 7 3’ 2’ =CH- 6,45 (1H, d, J=16,0) 131,8 1’, 3’ 7 3’ >C=O - 200,7 - - 4’ -CH3 2,31 (1H, s) 27,7 - 2’
Khảo sát thành phần hóa học cao chloroform của lá bàng biển Calotropis gigantea L.