Hợp chất 1 và 2 được kiểm tra độ tinh khiết bằng SKLM và so sánh với cắn ethyl acetat trên cùng một bản mỏng, triển khai với 3 hệ dung môi:
- Hệ I: Dicloromethan– Methanol (10:1) - Hệ II: Toluen - Ethyl acetat (7:3) - Hệ III: n-hexan - Ethyl acetat (1:1)
Silica gel pha thuận, n-hexan : aceton Cắn PQLE PĐ4 PĐ5 11 PĐ còn lại Pha đảo RP18, MeOH: H2O PĐ4.5 5 PĐ còn lại
Silica gel pha thuận,
n-hexan : aceton Hợp chất 1
(51 mg)
7 PĐ còn lại Silica gel pha thuận,
n-hexan : ethyl acetat
Hợp chất 2
(10 mg)
Pha đảo RP18, MeOH: H2O
22
Quan sát dưới UV254nm và UV365nm hay ánh sáng trắng sau khi phun thuốc thử đều thấy một vết duy nhất trên bản mỏng ở mỗi chất (hình 3.4 – 3.6). Vì vậy sơ bộ kết luận hợp chất 1 và 2 là những chất tinh khiết.
Hình 3.4: Sắc ký đồ của hợp chất 1, cắn ethyl acetat, hợp chất 2 hệ I IA, IB, IC: Sắc ký đồ của hợp chất 1, cắn EtOAc, hợp chất 2 hệ I
lần lượt ở UV254nm, UV365nm và sau khi phun TT ở ánh sáng trắng
23
Hình 3.5: Sắc ký đồ của hợp chất 1, cắn ethyl acetat, hợp chất 2 hệ II IIA, IIB, IIC: Sắc ký đồ của hợp chất 1, cắn EtOAc, hợp chất 2 hệ II
lần lượt ở UV254nm, UV365nm và sau khi phun TT ở ánh sáng trắng IIA IIB IIC
24
Hình 3.6: Sắc ký đồ của hợp chất 1, cắn ethyl acetat, hợp chất 2 hệ III IIIA, IIIB, IIIC: Sắc ký đồ của hợp chất 1, cắn EtOAc, hợp chất 2 hệ III
lần lượt ở UV254nm, UV365nm và sau khi phun TT ở ánh sáng trắng IIIA IIIB IIIC
25
Bảng 2: Kết quả SKLM của 2 chất với 3 hệ dung môi
Chất Hệ dung môi I II III
1 Rf x 100 45,71 29,33 32,50
Màu sắc (TT) Màu tím Màu tím Màu tím
2 Rf x 100 25,72 5,33 10,00
Màu sắc (TT) Màu vàng nâu Màu vàng nâu Màu vàng nâu