M Ở ĐẦU
2.2.2.3 Phân l ập các hợp chất từ cao EA
Thực hiện SKC cao EA (m = 360 g) trên silica gel với hệ dung môi giải ly là Hexan:EA lần lượt từ Hexane 100%, 20:1, 10:1, 5:1, 1:1, EA 100%, EA-MeOH các phân đoạn giống nhau trên SKLM (thuốc thử hiện bản mỏng là H2SO4 10% trong EtOH) gom chung lại thành 7 phân đoạn, mã hóa thành E1 – E7. Quá trình thực hiện SKC được tóm tắt trong sơ đồ 3.
Sơ đồ 3 : Qui trình điều chế các phân đoạn từ cao EA
2.2.2.3.1 Khảo sát phân đoạn E7(150g)
Phân đoạn E7 được SKC silicagel với hệ dung môi Hexane:EA có độ phân cực tăng dần: 10:1, 5:1, 1:1, 1:5, EA, sau đó là hệ dung môi EA:MeOH 10:1, 5:1, 1:1 , dựa vào kết quả trên SKLM gom các đoạn giống nhau thành 5 phân đoạn E7.1 – E7.5.
Trong đó phân đoạn E 7.2 chứa 3 vết: 1 vết chính màu hồng, 1 vết màu xanh , 1 vết màu tím.
Phân đoạn E 7.5 chứa 3 vết : 1 vết màu vàng , 1 vết màu hồng, 1 vết màu đen
Cao EA 360g SKC silicagel E3 23,786 E2 26,678 E1 12,679 E4 39,987 E5 29,589 E6 14,796 Hexane Hexane:EA Hexane:EA Hexane:EA EA
E7 150
EA:MeOH EA:MeOH
2.2.2.3.2 Khảo sát phân đoạn E 7.2 (14,05g)
Phân đoạn E7.2 được SKC silicagel với hệ dung môi Hexane:EA với độ phân cực tăng dần: 15:1, 10:1, 5:1 dựa vào kết quả SKLM thu được 2 phân đoạn ký hiệu E7.2.1 – E7.2.2 . Trong đó phân đoạn E 7.2.2 chứa 2 vết, 1 vết chính màu hồng, 1 vết màu tím.
Tiếp tục sắc ký phân đoạn E7.2.2 bằng cột sephadex LH - 20, hệ dung môi CHCl3:MeOH = 1:1 thu được 1 chất kết tinh dạng tinh thể màu trắng MO5 (0,128g).
SKC silicagel hệ Hexan : EA =5:1 Thu được 2 phân đoạn E7.2.1-E7.2.2
SKC sephadex LH - 20, CHCl3:MeOH = 1:1
Thu được 2 phân đoạn E7.2.2.1-E7.2.2.2
Sơ đồ 4: Qui trình phân lập hợp chất MO5 từ cao E7.2 E7.2 14,05 g E7.2.2 1,08 g MO5 0,128 g