3. ẹOÂI TệễẽNG VAỉ PHệễNG PHAÙP NGHIEĐN CệÙU
3.4.Khaỷo saựt thaứnh phaăn hoaự hoùc
3.4.1. Nguyẽn lieọu
• Chãn Chim Leo ( Schefflera elliptica (Bl.) Harms)
+ ẹũa ủieồm thu maĩu: Trung tãm troăng cheỏ bieỏn cãy thuoỏc ẹaứ Lát. + Thụứi gian thu maĩu: 2/9/2002
• Chãn Chim Taỷn Phoứng (Schefflera corymbiformis N. S.Bui
+ ẹũa ủieồm thu maĩu: laứng Lacpon – Ngóc Lei-Kontum + Thụứi gian thu maĩu : 27/10/2002
• Chãn Chim Hoa Khõng Cuoỏng (Schefflera sessiliflora V.D. Phan)
+ ẹũa ủieồm thu maĩu : Proựh- ẹụn Dửụng –ẹaứ Lát + Thụứi gian laỏy maĩu: 2/9/2002
• Xửỷ lyự nguyẽn lieọu: Caực dửụùc lieọu sau thu haựi ủửụùc ủeồ khõ tửù nhiẽn ụỷ nụi thoaựng maựt, baờm nhoỷ, xay thaứnh boọt. Baỷo quaỷn trong ló nhửùa kớn. • Maĩu tiẽu baỷn vaứ nguyẽn lieọu cuỷa 3 loai khaỷo saựt ủửụùc lửu giửừ tái boọ
mõn Taứi nguyẽn-Dửụùc lieọu thuoọc Trung tãm Sãm vaứ Dửụùc lieọu Tp. HCM.
3.4.2. Hoựa chaỏt vaứ trang thieỏt bũ 3.4.2.1. Hoựa chaỏt 3.4.2.1. Hoựa chaỏt
Dung mõi: aceton, benzen, cloroform, ether ethylic, ethyl acetat, ethanol, methanol, n-butanol (Trung Quoỏc) (caỏt lái trửụực khi sửỷ dúng).
Hoựa chaỏt:
- Anhydrid acetic, saột (III) clorid, magnesi, natri acetat, canxi sulfat khan, natri carbonat, p-nitro anillin, acid axetic baờng, acid hydrocloric, acid sulfuric, natri hidroxit, amoniac, kali hydroxyd…
3.4.2.2. Trang thieỏt bũ
- Cãn phãn tớch Meltler Toledo AB-204
- Maựy cõ quay BUCHI, cõ giaỷm aựp ụỷ nhieọt ủoọ 500C ♦ Phoồ hoăng ngoái (IR)
- Phoồ ủửụùc ủo trẽn maựy FTIR 8201 (SHIMADZU) ụỷ Khoa Dửụùc - Trửụứng ẹH Y Dửụùc TPHCM.
- Hoaởc ủửụùc ủo trẽn maựy ủo phoồ hoăng ngoái EQUINO α55, BRUKER ụỷ Phãn vieọn Khoa hóc Vaọt lieọu TPHCM.
♦ Phoồ coọng hửụỷng tửứ hát nhãn(13C-NMR) cuỷa genin G2 ủửụùc ủo baống maựy AC 200 BRUKER (25MHz) vaứ caực genin G3, G5, G7, G8 ủửụùc ủo baống maựy AC 500 BRUKER (125MHz) vụựi dung mõi sửỷ dúng laứ pyridin-d5 vaứ chaỏt chuaồn noọi tetrametyl silan (TMS), ủoọ dụứi hoựa hóc δ tớnh theo ppm.
Nụi thửùc hieọn : Trung Tãm Phãn Tớch dũch Vú Thớ Nghieọm.
♦ Caực phoồ 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMQC, HMBC, cuỷa genin G1, G4 vaứ G6 ủửụùc ủo baống maựy AVANCE 500 BRUKER vụựi dung mõi sửỷ dúng laứ pyridin-d5 hoaởc aceton-d6 vụựi chaỏt chuaồn noọi tetrametyl silan (TMS), ủoọ dụứi hoựa hóc δ tớnh theo ppm.
Nụi thửc hieọn : Vieọn Hoựa Hóc - Trung tãm KHTN vaứ Cõng Ngheọ Quoỏc Gia Haứ Noọi.
3.4.3. Xaực ủũnh ủoọ aồm vaứ ủoọ tro
Theo phú lúc 7.5, 7.6 vaứ 9.6, Dửụùc ủieồn Vieọt Nam III [4]
3.4.4. Xaực ủũnh thaứnh phaăn acid beựo
- Duứng phửụng phaựp saộc kyự khớ trẽn maựy HP 6890 – Plus cuỷa haừng Hewlett Packard. Coọt mao quaỷn Inowax; Chửụng trỡnh nhieọt: Giửừ ụỷ nhieọt ủoọ 500C trong 3 phuựt, taờng daăn 80C/phuựt cho ủeỏn 2400C/20 phuựt.
- Nụi phãn tớch: Vieọn Nghiẽn Cửựu Daău Thửùc Vaọt -Tinh Daău -Hửụng Lieọu -Myừ Phaồm.
3.4.5. Xaực ủũnh caực nguyẽn toỏ ủa, vi lửụùng. (nhử phaăn 3.1.3 trang 19)Maĩu dửụùc lieọu ủửụùc than hoựa ụỷ nhieọt ủoọ khõng quaự 1800C. Maĩu dửụùc lieọu ủửụùc than hoựa ụỷ nhieọt ủoọ khõng quaự 1800C.
3.4.6. Phãn tớch sụ boọ thaứnh phaăn hoựa hóc
Caực maĩu dửụùc lieọu thu thaọp ủửụùc phãn tớch sụ boọ thaứnh phaăn hoựa hóc theo phửụng phaựp Rumani.
Sau khi ủũnh tớnh sụ boọ, tieỏn haứnh xaực ủũnh caực hụùp chaỏt chớnh ủaừ phaựt hieọn baống caựch chieỏt xuaỏt trửùc tieỏp tửứ dửụùc lieọu roăi xaực ủũnh baống caực phaỷn ửựng hoựa hóc chuyẽn bieọt thửụứng qui cho caực nhoựm hụùp chaỏt sau: alcaloid, flavonoid vaứ anthocyan, coumarin, tanin, anthraquinon vaứ saponin theo giaựo trỡnh chieỏt (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
a
xuaỏt dửụùc lieọu vaứ caực phửụng phaựp nghiẽn cửựu cãy thuoỏc-hoaự thửùc vaọt cuỷa Khoa Dửụùc - Trửụứng ẹái hóc Y Dửụùc Tp. HCM, naờm 2002-2003 [3,7].
3.4.7. Khaỷo saựt hụùp chaỏt saponin trong laự, thãn vaứ reĩ 3.4.7.1. ẹũnh lửụùng saponin tp baống phửụng phaựp cãn 3.4.7.1. ẹũnh lửụùng saponin tp baống phửụng phaựp cãn
Haứm lửụùng saponin tp ủửụùc ủũnh lửụùng theo phửụng phaựp Namba [36]: cãn 5-20 g boọt dửụùc lieọu (tuứy maĩu khaỷo saựt) chieỏt baống Soxhlet vụựi MeOH cho ủeỏn kieọt saponin. Dũch MeOH ủửụùc cõ giaỷm aựp cho ủeỏn caộn. Hoứa caộn trong moọt lửụùng nửụực gaỏp 10 laăn. Dũch nửụực ủửụùc laộc vụựi ete cho ủeỏn khi lụựp ete khõng maứu hoaởc maứu raỏt nhát. Lụựp nửụực laộc tieỏp vụựi n-BuOH baừo hoứa nửụực cho ủeỏn khi kieọt saponin. Rửỷa nửụực lụựp n-BuOH (khoaỷng 3 laăn). Cõ giaỷm aựp dũch n- BuOH thu ủửụùc caộn, laứm khõ trong tuỷ saỏy chãn khõng ủeỏn khoỏi lửụùng khõng ủoồi, ta ủửụùc saponin tp. Cãn vaứ tớnh haứm lửụùng saponin tp trong dửụùc lieọu. Tieỏn haứnh ủũnh lửụùng 3 laăn, laỏy giaự trũ trung bỡnh.
Haứm lửụùng saponin tp ủửụùc tớnh theo cõng thửực:
Vụựi X%: haứm lửụùng saponin tp tớnh trẽn dửụùc lieọu khõ kieọt. Y%: haứm lửụùng saponin tp tớnh trẽn dửụùc lieọu sửỷ dúng. A : ủoọ aồm cuỷa dửụùc lieọu.
a: khoỏi lửụùng saponin tp.
d: khoỏi lửụùng dửụùc lieọu ban ủaău.
3.4.7.2. ẹũnh tớnh saponin tp baống phửụng phaựp SKLM
Theo phú lúc 4.4, DẹVN III [4]
Chaỏt haỏp phú: baỷn moỷng traựng saỹn sillicagel 60 F254 (Merck). Heọ dung mõi khai trieồn. [16,36]
- CHCl3 – MeOH – H2O (tyỷ leọ thay ủoồi tuứy maĩu). - n-BuOH – AcOH – H2O (4 :1:5, lụựp trẽn)
Thuoỏc thửỷ phaựt hieọn. [16, 36]
- H2SO4 10% trong coăn. Phun saỏy ụỷ 1100C trong 5 phuựt.
X % = d – (d ìA)
Y % = a
3.4.8. Khaỷo saựt sapogenin thuyỷ phãn tửứ saponin tp trong laự, thãn vaứ reĩ 3.4.8.1. Thuỷy phãn saponin vaứ chieỏt sapogenin tp 3.4.8.1. Thuỷy phãn saponin vaứ chieỏt sapogenin tp
Laỏy moọt lửụùng saponin tp chieỏt tửứ caực maĩu nguyẽn lieọu theo sụ ủoă 1 vaứ cho vaứo bỡnh tam giaực, thẽm vaứo 250 ml EtOH 50% (coự chửựa 7% HCl) vụựi tyỷ leọ 1/50, ủun hoăi lửu thuỷy phãn trong 4 giụứ. ẹeồ nguoọi, thẽm khoaỷng 1/3 theồ tớch nửụực vaứo dũch thuỷy phãn, cõ giaỷm aựp cho ủeỏn heỏt EtOH. Dũch nửụực acid laộc vụựi CHCl3 (50 ml ì 6 laăn). Lụựp CHCl3 ủửụùc rửỷa nửụực (50 ml ì 3 laăn) (ủeỏn khi nửụực rửỷa trung tớnh). Laứm khan dũch CHCl3 baống Na2SO4 khan, cõ giaỷm aựp thu hoăi dung mõi, thu ủửụùc sapogenin tp[20].
3.4.8.2. ẹũnh tớnh sapogenin tp baống SKLM
Sau khi thu ủửụùc sapogenin tp, ủũnh tớnh sapogenin tp caực maĩu baống SKLM, so vụựi chaỏt chuaồn: acid oleanolic.
Tieỏn haứnh vụựi heọ dung mõi khai trieồn :[20] - CHCl3–MeOH (9 : 1).
- C6H6–CHCl3–MeOH (2 : 3 : 0,5).
Sụ ủoă 1. Sụ ủoă chieỏt xuaỏt saponin tp
Cõ giaỷm aựp ụỷ 500C
Thẽm nửụực Nguyẽn lieọu
Baừ dửụùc lieọu Dũch chieỏt MeOH
Chieỏt noựng vụựi MeOH, lóc
Caộn MeOH
Rửỷa qua DiaionHP-20 laăn lửụùt baống nửụực caỏt vaứ MeOH Laộc vụựi Et2O ủeỏn khi nhát maứu (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Cõ giaỷm aựp ụỷ 500C Dũch ether Dũch nửụực
Dũch MeOH
Saponin tp
3.4.8.3. Phãn laọp vaứ tinh khieỏt hoựa caực sapogenin chớnh trong caực boọ phaọn cuỷa ba loaứi
Sapogenin tp thu ủửụùc tửứ múc 3.4.8.1. ủửụùc duứng ủeồ phãn laọp caực sapogenin baống phửụng phaựp saộc kyự coọt. ẹieău kieọn tieỏn haứnh nhử sau:
Chaỏt haỏp phú: Silicagel 60 F254 (0,063 – 0,200 mm) (Merck).
Heọ dung mõi rửỷa coọt: Laăn lửụùt rửỷa vụựi caực heọ dung mõi phãn cửùc daăn theo tổ leọ sau:
CHCl3:MeOH = (9:0); (9:0,1); (9:0,2)…....(9:1). Hoaởc Benzen:EtOAc = (1:0,2); (1:0,4);....(1:1).
Heọ dung mõi kieồm tra trẽn SKLM: CHCl3:MeOH (9:1) Phaựt hieọn: H2SO4 10%, 110oC/5 phuựt.
3.4.8.4. Xaực ủũnh caỏu truực caực sapogenin
ẹo caực chổ tiẽu phoồ IR, 1H NMR, 13C NMR, DEPT, HMQC, HMBC trẽn caực thieỏt bũ phãn tớch múc 3.4.2.2.
Dửùa trẽn caực chổ tiẽu trẽn vaứ ủoỏi chieỏu vụựi caực thõng soỏ phoồ cuỷa caực hụùp chaỏt ủaừ bieỏt ủeồ xaực ủũnh caỏu truực.
3.4.9. Xaực ủũnh khaỷ naờng tớch luừy hoát chaỏt cuỷa caực loaứi Schefflera
Thu thaọp caực maĩu laự, thãn chuỷ yeỏu cuỷa loaứi S. elliptica móc hoang ụỷ Vửụứn Quoỏc gia Caựt Tiẽn theo thaựng ủeồ theo doừi sửù bieỏn ủoọng veă haứm lửụùng saponin tp baống phửụng phaựp cãn theo múc 3.4.7.1. ẹoỏi chieỏu so saựnh vụựi maĩu S. elliptica
troăng ụỷ trái Cam Ly- ẹaứ Lát thu thaọp ủửụùc.
3.5. Thửỷ taực dúng dửụùc lyự 3.5.1. Nguyẽn lieọu 3.5.1. Nguyẽn lieọu
Caực dửụùc lieọu ủửụùc nẽu ụỷ múc 3.4.1 vaứ reĩ cuỷ Hoăng sãm Trieău tiẽn coự nhaỷn hieọu thửụng phaồm laứ Korean Red Ginseng, loái thửụùng (heaven) cuỷa cõng ty Korean Ginseng Corp. mua tái cõng ty coồ phaăn Dửụùc lieọu TW2.
3.5.1.1. ẹieău cheỏ cao meăm
Chieỏt xuaỏt boọt dửụùc lieọu baống phửụng phaựp chieỏt ngaỏm kieọt qua 2 phãn ủoán coăn 96o vaứ coăn 45o theo tổ leọ 1:10. Troọn hoĩn hụùp 2 dũch chieỏt naứy vaứ cõ caựch thuỷy thaứnh dáng cao meăm ( theo qui ủũnh Dửụùc ẹieồn Vieọt Nam III ) ủửụùc sửỷ dúng cho nghiẽn cửựu taực dúng dửụùc lyự.
3.5.1.2. Tiẽu chuaồn hoaự cao meăm
Aựp dúng caực chổ tiẽu veă caỷm quan, ủoọ aồm, ủoọ tro, ủũnh tớnh baống phaỷn ửựng hoaự hóc vaứ phửụng phaựp saộc kyự lụựp moỷng, ủũnh lửụùng saponin toaứn phaăn baống phửụng phaựp cãn ủeồ tiẽu chuaồn hoaự cao baựn thaứnh phaồm.
3.5.1.3. Cao meăm thửỷ nghieọm
- Cao meăm hoăng sãm
- Cao meăm voỷ thãn Schefflera elliptica - Cao meăm thãn Schefflera corymbiformis
- Cao meăm thãn Schefflera sp3 - Cao meăm laự Schefflera elliptica
- Cao meăm laự Schefflera corymbiformis - Cao meăm laự Schefflera sp3
Caực maĩu cao meăm ủửụùc cãn chớnh xaực, quy ra tróng lửụùng khõ kieọt vaứ pha vụựi nửụực caỏt thaứnh dung dũch thửỷ tửụng ửựng vụựi lieău sửỷ dúng mong muoỏn:
Caực maĩu dung dũch thửỷ phoỏi hụùp vụựi hoăng sãm theo tổ leọ 200mg:200mg hoaởc 100mg:200mg.
3.5.2. Suực vaọt thửỷ nghieọm
Chuoọt nhaột traộng ủửùc (chuỷng Swiss albino) tróng lửụùng trung bỡnh 20g± 2 ủửụùc cung caỏp bụỷi Vieọn Pasteur TP. HCM vaứ ủửụùc ủeồ oồn ủũnh 1 tuaăn trửụực khi thửỷ nghieọm. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chuoọt ủửụùc cho uoỏng nguyẽn lieọu thửỷ hoaởc nửụực caỏt tuứy theo lõ vụựi theồ tớch uoỏng laứ 0,1ml/10g tróng lửụùng.
3.5.3. Thửỷ ủoọc tớnh caỏp
(Phửụng phaựp xaực ủũnh ủoọc tớnh caỏp cuỷa thuoỏc - ẹoĩ Trung ẹaứm) [5]
Nguyẽn taộc: ủeồ ửụực lửụùng ủoọc tớnh caỏp cuỷa moọt dửụùc phaồm ngửụứi ta dửùa
vaứo lieău laứm cheỏt 50% suực vaọt thửỷ nghieọm (kớ hieọu LD50) trong thụứi gian 48 giụứ vụựi nhửừng ủieău kieọn nhaỏt ủũnh, sau khi cho chuoọt moọt lieău thuoỏc thõng qua ủửụứng tiẽm hoaởc qua ủửụứng duứng thuoỏc khaực.
Phửụng phaựp thửỷ:cho moĩi chuoọt 0,3-0,5 ml dung dũch thửỷ qua ủửụứng uoỏng,
coự theồ cho uoỏng toỏi ủa moĩi con 1,5ml. Duứng moọt canul ủaău tuứ ủeồ ủửa thuoỏc qua thửùc quaỷn vaứo dá daứy.
Chuoọt nhaột traộng ủửụùc chia laứm nhieău lõ, moĩi lõ 6 con. Laứm thửỷ nghieọm sụ khụỷi tỡm lieău toỏi ủa dung náp vaứ lieău toỏi thieồu laứm cheỏt taỏt caỷ suực vaọt thửỷ. Sau ủoự laứm thửỷ nghieọm xaực ủũnh vụựi caực lieău trong khoaỷng 2 lieău trẽn. Theo doừi tỡnh tráng chung, tổ leọ chuoọt cheỏt sau 48 giụứ, giaỷi phaĩu vaứ quan saựt caực cụ quan noọi táng (tim, gan, phoồi..)
Tớnh toaựn keỏt quaỷ
Theo phửụng phaựp Karber – Behrens: LD50 = Df -
n ab
Df : lieău thuoỏc toỏi thieồu laứm cheỏt taỏt caỷ suực vaọt
a : trũ soỏ trung bỡnh toồng soỏ suực vaọt cheỏt ụỷ 2 lieău keỏ tieỏp nhau b : hieọu soỏ giửừa 2 lieău keỏ tieỏp nhau
n : trung bỡnh soỏ suực vaọt duứng moĩi lõ.
3.5.4. Thửùc nghieọm taờng lửùc
Nghieọm phaựp chuoọt bụi kieọt sửực cuỷa Brekhman (swimming test, caỷi tieỏn ủeồ aựp dúng trẽn chuoọt nhaột traộng) [10,11].
Chuoọt ủửụùc mang vaứo ủuõi gia tróng baống 5% theồ tróng, cho bụi tửứng con trong thuứng nửụực coự dung tớch 20 lớt, ủửụứng kớnh 40cm, chieău cao coọt nửụực 25cm, nhieọt ủoọ 29± 10C. Chuoọt ủửụùc cho bụi laăn 1, thụứi gian bụi tớnh tửứ khi chuoọt ủửụùc thaỷ vaứo thuứng nửụực, bụi cho ủeỏn khi chỡm khoỷi maởt nuụực 20 giãy vaứ khõng troăi lẽn ủửụùc nửừa, luực ủoự vụựt chuoọt ra lau khõ (T0). Cho chuoọt nghổ 5 phuựt, chia lõ thớ nghieọm vaứ cho chuoọt uoỏng nguyẽn lieọu thửỷ hoaởc nửụực caỏt tuyứ theo lõ, ủeồ nghổ 60 phuựt vaứ cho bụi laăn 2 (T60 ). Suực vaọt ủửụùc phãn boồ ụỷ caực lõ thửỷ nghieọm sao cho thụứi gian bụi laăn 1 ụỷ caực lõ khõng coự sửù khaực bieọt ủát yự nghúa thoỏng kẽ.
Ghi nhaọn thụứi gian bụi laăn 1 vaứ laăn 2 ụỷ caực lõ thửỷ vaứ so saựnh thoỏng kẽ vụựi lõ chửựng. Taực dúng taờng lửùc tửực thụứi ủửụùc ủaựnh giaự khi tổ leọ % thụứi gian bụi laăn 2 / laăn 1 cuỷa lõ thửỷ > % thụứi gian bụi laăn 2 / laăn 1 cuỷa lõ chửựng.
Chuoọt ủửụùc tieỏp túc cho uoỏng nửụực hoaởc nguyẽn lieọu thửỷ liẽn túc trong 7 ngaứy, moĩi ngaứy moọt laăn vaứo moọt giụứ nhaỏt ủũnh (8:30). Ngaứy thửự 7, sau uoỏng thuoỏc thửỷ 60 phuựt , tieỏn haứnh cho chuoọt bụi laăn 3. Ghi nhaọn thụứi gian bụi laăn 3 (T7) ụỷ caực lõ thửỷ vaứ so saựnh vụựi lõ chửựng. Taực dúng taờng lửùc sau 7 ngaứy ủửụùc ủaựnh giaự khi % thụứi gian bụi laăn 3 / laăn 1 cuỷa lõ thửỷ > % thụứi gian bụi laăn 3/ laăn 1 cuỷa lõ chửựng.
3.5.5. Thửùc nghieọm stress noựng 3.5.5.1. Maĩu thửỷ nghieọm 3.5.5.1. Maĩu thửỷ nghieọm
Cao meăm caực maĩu ủửụùc cãn chớnh xaực, qui ra tróng lửụùng cao khõ kieọt vaứ pha vụựi nửụực caỏt thaứnh dung dũch thửỷ tửụng ửựng vụựi lieău sửỷ dúng 200mg/kg suực vaọt thửỷ nghieọm.
3.5.5.2. Nghieọm phaựp chũu noựng [13]
Chuoọt ủửụùc cho uoỏng dung dũch thửỷ hoaởc nửụực caỏt (ụỷ lõ chửựng) haứng ngaứy vaứo moọt giụứ nhaỏt ủũnh (8:00) vaứ keựo daứi trong 10 ngaứy. ẹeỏn ngaứy thửự 10, sau khi cho chuoọt uoỏng dũch thửỷ laăn cuoỏi 60 phuựt, cho chuoọt vaứo buoăng noựng ụỷ nhieọt ủoọ 42 ± 10 C vaứ coự heọ thoỏng thõng gioự. Theo doừi haứnh vi cuỷa chuoọt liẽn túc. Thụứi gian chũu ủửùng stress nhieọt ủửụùc tớnh tửứ thụứi ủieồm ủửa chuoọt vaứo buoăng noựng cho ủeỏn luực chuoọt ngửứng thụỷ.
3.5.6. Thửùc nghieọm stress cõ laọp [10]
Stress cõ laọp ủửụùc baựo caựo laứ moọt trong nhửừng stress tãm lyự tiẽu bieồu gãy sửù ruựt ngaộn thụứi gian nguỷ ụỷ suực vaọt thửỷ nghieọm thõng qua nhửừng cụ cheỏ thuoọc veă dửụùc lyự thaăn kinh (trúc HPA, phửực hụùp GABA-A, dopamine). Thửùc nghieọm cho thaỏy nhoựm stress coự nhửừng bieồu hieọn bũ stress tãm lyự nhử : thụứi gian nguỷ bũ ruựt ngaộn (giaỷm 30% thụứi gian nguỷ so vụựi nhoựm bỡnh thửụứng), coự haứnh vi taỏn cõng khi tieỏp xuực vụựi chuoọt lá (aggressive behaviour), tráng thaựi thú ủoọng-traăm caỷm (depressive behaviour).
Chuựng tõi chón chổ tiẽu stress cõ laọp laứm ruựt ngaộn thụứi gian nguỷ cuỷa pentobarbital ủeồ nghiẽn cửựu taực dúng antistress cuỷa caực nguyẽn lieọu . Nhửừng nghiẽn cửựu trửụực ủãy ủaừ xaực ủũnh nhửừng chaỏt chuỷ vaọn lẽn heọ dopamin (dopamin agonists), caực chaỏt chuỷ vaọn lẽn heọ thoỏng GABA, ủaởc bieọt laứ phửực hụùp GABA-A (GABA-ergic agonists), caực benzodiazepine nhử diazepam, midazolam…, coự taực dúng phúc hoăi giaỏc nguỷ pentobarbital bũ ruựt ngaộn do stress cõ laọp .
Tieỏn haứnh :
Suực vaọt ủửụùc chia laứm 2 nhoựm:
- Nhoựm bỡnh thửụứng : ủửụùc nuõi theo nhoựm 8-10 chuoọt trong nhoựm - Nhoựm stress : ủửụùc nuõi cõ laọp tửứng con trong thụứi gian 4 tuaăn. Suực vaọt thửỷ ủửụùc uoỏng nửụực hoaởc nguyẽn lieọu thửỷ 1 giụứ trửụực khi tiẽm phuực mõ pentobarbital (pentobarbital natri, lieău 50mg/kg). Thụứi gian nguỷ cuỷa pentobarbital ủửụùc ghi nhaọn tửứ luực maỏt phaỷn xá thaờng baống (righting reflex) cho ủeỏn khi hoăi phúc lái phaỷn xá naứy.
Taực dúng antistress ủửụùc ghi nhaọn khi thuoỏc thửỷ nghieọm phúc hoăi lái mửực ủoọ bỡnh thửụứng cuỷa giaỏc nguỷ barbital bũ ruựt ngaộn bụỷi stress . (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.6. Tớnh toaựn thoỏng kẽ
Soỏ lieọu ủửụùc xửỷ lyự theo pheựp phãn tớch phửụng sai 1 yeỏu toỏ” ANOVA: single factor” vaứ Duncan Multirang test trong nghiẽn cửựu khaỷ naờng nhãn gioỏng vaứ gieo troăng. Tớnh toaựn soỏ lieọu trong caực thửỷ nghiieọm dửụùc lyự baỳng pheựp xửỷ lyự thoỏng kẽ caực giaự trũ trung bỡnh vaứ sai soỏ chuaồn (M; SEM) ụỷ ủoọ tin caọy 95% khi P< 0,05 so vụựi ủoỏi chửựng: chón chửụng trỡnh Anova: Single Factor vaứ t-Test: Two-Sample Assuming Unequal Variances [6].
4. KÊT QUẠ NGHIEĐN CệÙU
4.1. Keỏt quaỷ ủieău tra sửù phãn boỏ vaứ sụ boọ ủaựnh giaự trửừ lửụùng cuỷa caực loaứi khaỷo saựt trẽn caực khu vúc khaực nhau ụỷ Tãy Nguyẽn vaứ ẹõng nam loaứi khaỷo saựt trẽn caực khu vúc khaực nhau ụỷ Tãy Nguyẽn vaứ ẹõng nam boọ (phú lúc 1)
4.1.1. Khu vửùc phãn boỏ caực loaứi Schefflera 4.1.1.1. ẹoỏi vụựi loaứi S.elliptica 4.1.1.1. ẹoỏi vụựi loaứi S.elliptica
Baỷng 12. Toồng hụùp keỏt quaỷ ủieău tra phãn boỏ loaứi S. elliptica
Keỏt quaỷ STT ẹũa ủieồm Hieỏm Raừi raực Khu vửùc nhoỷ Nhieău khu
nhoỷ gaăn nhau Baừi lụựn
Khõng gaởp I.
1 Lãm ẹoăng Rửứng Proựh ì
2 Khu vửùc ủeứo Di Linh ì
3 Rửứng Lang Bian ì
4 Vửụứn Quoỏc gia Pidoup ì
5 Rửứng Taứ In ì
6 Thaực ẹửực Tróng ì
7 Rửứng Lãm Haứ – Phuự Sụn ì
8 Rửứng Taứ Nung ì
II. Kon Tum ì
III.
1 Vửụứn Quoỏc gia Caựt Tiẽn Ngaừ Ba Thaực Trụứi vaứo
Thaực Trụứi ì
2 Beỏn Cửù ủeỏn Thaực Trụứi ì 3 quanh Baứu Saỏu ì 4 Suoỏi ẹaự Baứng ì
4.1.1.2. ẹoỏi vụựi loaứi S.sp3
Baỷng 13. Toồng hụùp keỏt quaỷ ủieău tra phãn boỏ loaứi S. sp3
Keỏt quaỷ ST
T ẹũa ủieồm Hieỏm Raừi raực Khu vửùc nhoỷ Nhieău khu nhoỷ gaăn nhau Baừi lụựn Khõng gaởp I.
1 Lãm ẹoăng Rửứng Proựh ì
2 Khu vửùc ủeứo Di Linh ì
3 Rửứng Lang Bian ì
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});