L ỜI CẢM TẠ
3.8.1 Thí nghiệm thăm dò xác định khoảng nồng độ Quinalphos gây độc cho
cho Moina dubia
Mục tiêu thí nghiệm: nhằm xác định khoảng nồng độ gây chết từ 10 – 90%
Moina dubia. Đây là khoảng nồng độ làm cơ sở cho việc bố trí thí nghiệm LC50.
Cách tiến hành thí nghiệm: Thí nghiệm được tiến hành trong đĩa Petri, mỗi đĩa cho vào 10 cá thể Moina dubia. Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên ở
6 mức nồng độ (0,05; 0,2; 0,8; 3,20; 12,8; 51,2 µg/L) và đối chứng. Thể tích dung
dịch sử dụng trong thí nghiệm là 40 mL cho từng mức nồng độ. Thí nghiệm được
thực hiện lặp lại 3 lần cho từng nghiệm thức. Nước được sục khí trước khi pha với
thuốc để khử chlorine và tăng cường oxy.
Thuốc được pha loãng từ dung dịch gốc thành dung dịch mẹ có nồng độ hoạt
chất 500 µg/L. Pha dung dịch mẹ và dung dịch thí nghiệm theo công thức: C1V1 = C2V2
Trong đó:
C1 là nồng độ thuốc cần cho thí nghiệm
V1 là thể tích dung dịch cần cho thí nghiệm
C2 là nồng độ dung dịch mẹ
V2 là thể tích dung dịch thuốc cần dùng trong thí nghiệm
Để pha 100 mL dung dịch mẹ C có nồng độ 500000 µg Quinalphos/L từ
thuốc trừ sâu Kinalux có 250g Quinalphos/L thì thể tích dung dịch Kinalux cần pha
là:
V2 = C1V1/C2 = 500.000 µg x 100 mL/250.000.000 µg = 0,2 mL (hay 200 µL).
Pha 100 mL dung dịch mẹ B có nồng độ 500 µg Quinalphos/L từ dung dịch
mẹ C có nồng độ 500.000 Quinalphos/L thì thể tích dung dịch mẹ C cần dùng là: V3 = C2V2/V3 = 500 µg x 100 mL/500.000 µg = 0,1 ml (hay 100 µL). Áp dụng công thức trên để pha các nồng độ thuốc cho thí nghiệm:
Lấy 20 µL dung dịch mẹ B cho vào bình định mức 200 mL, đong đầy bằng nước được dung dịch thí nghiệm có nồng độ 0,05 µg/L.
Lấy 80 µL dung dịch mẹ B cho vào bình định mức 200 mL, đong đầy bằng nước được dung dịch thí nghiệm có nồng độ 0,2 µg/L.
Lấy 320 µL dung dịch mẹ B cho vào bình định mức 200 mL, đong đầy
Lấy 1280 µL dung dịch mẹ B cho vào bình định mức 200 mL, đong đầy
bằng nước được dung dịch thí nghiệm có nồng độ 3,2 µg/L.
Lấy 5120 µL dung dịch mẹ B cho vào bình định mức 200 mL, đong đầy
bằng nước được dung dịch thí nghiệm có nồng độ 12,8 µg/L.
Lấy 20460 µL dung dịch mẹ B cho vào bình định mức 200 mL, đong đầy
bằng nước được dung dịch thí nghiệm có nồng độ 51,2 µg/L.
Theo dõi hoạt động của Moina dubia tại ở các thời điểm 1, 3, 6, 9, 12, 24, 36
và 48 giờ. Khi phát hiện sinh vật chết (không bơi lội, cử động) thì vớt ra khỏi dung
dịch thí nghiệm bằng ống nhỏ giọt có ghi rõ nồng độ thí nghiệm để tránh làm nhiễm
thuốc giữa các nghiệm thức với nhau. Ghi nhận số cá thể chết, tính toán tỷ lệ chết ở
các khoảng thời gian nêu trên.