Đĩa thử 1: Cho 1ml chất thử ở nồng độ thích hợp. Đĩa thử 2: 1 ml chất thử + 1ml nhũ dịch vi sinh vật.
Đĩa chứng: 1ml nước cất vô trùng + 1ml nhũ dịch vi sinh vật
Cho vào mỗi đĩa 15 - 20 ml môi trường dinh dưỡng thích hợp đã để nguội dưới 45oC. Ủ 30 - 35oC/ 24 - 48 giờ đối với vi khuẩn và 25 - 28oC/48 - 72 giờ đối với C. albicans.
Nhận xét kết quả:
Đếm số khuẩn lạc vi sinh vật trên các đĩa thí nghiệm. Gọi A là số khuẩn lạc ởđĩa 1. Gọi B là số khuẩn lạc ở đĩa 2. Gọi C là số khuẩn lạc ở đĩa chứng đĩa 1. Gọi B là số khuẩn lạc ở đĩa 2. Gọi C là số khuẩn lạc ở đĩa chứng
• Nếu B gần bằng A + C mẫu thử không có chất ức chế.
• Nếu B gần bằng A hoặc B << A + C mẫu thử có chất ức chế vi sinh vật.
Chất ức chế phải được xử lý bằng cách tăng thể tích môi trường, trung hoàchất ức chế bằng các chất trung hoà thích hợp như tween 20 4%. Nếu mẫu có chất ức chế bằng các chất trung hoà thích hợp như tween 20 4%. Nếu mẫu có chất ức chế quá mạnh phải thử bằng phương pháp màng lọc.
* Kiểm tra chất ức chế cũng có thể được thực hiện theo cách sau:
Cấy khoảng 100 tế bào các vi khuẩn vào các ống môi trường chọn lọc không có mẫu thử và có mẫu thử ở nồng độ thích hợp cho E. coli Salmonella, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa.
Mẫu thử không có tác dụng ức chế nếu vi khuẩn mọc tốt như nhau ở cả hai ống môi trường.
Đếm số lượng vi sinh vật:
- Đối với vi khuẩn: Cho vào mỗi đĩa petri 1ml chất thử ở nồng độ thích hợpsao cho không quá 300 khuẩn lạc trong 1ml. Thêm 15 - 20ml môi trường