BAP (6 - benzyl amino purin) là hormone sinh trưởng thuộc nhóm cytokinin có vai trò chủ yếu là kích thích sự phân chia tế bào. BAP ảnh hưởng rõ rệt lên sự hình thành và phân hóa của cơ quan thực vật, đặc biệt là sự phân hóa chồi. Thông qua cơ chế di truyền BAP tác động lên quá trình sinh tổng hợp protein, từ đó ảnh hưởng đến sự tổng hợp protein, enzyme cần thiết cho sự phân chia và sinh trưởng của tế bào. Ngoài ra, BAP còn có tác dụng ngăn chặn sự già hóa của tế bào thực vật, ngăn chặn sự phân hủy protein, axit nucleic và chlorophyll.
Để nghiên cứu sự ảnh hưởng của BAP đến sự phát triển chồi lan Thạch hộc, chúng tôi đã tách các cụm chồi nhỏ phát sinh từ protocorm cấy chuyển vào môi trường MS bổ sung đường saccharose 30 g/l; agar 7g/l; nước dừa 50ml/l; than hoạt tính 1g/l và BAP với nồng độ thay đổi ở bốn công thức (CT) thí nghiệm: CT1 - không bổ sung BAP; CT2 - 0,5mg/l BAP; CT3 - 1mg/l BAP; CT4 - 1,5mg/l BAP.
Bảng 3.7. Ảnh hưởng của BAP đến sự phát triển cụm chồi lan Thạch hộc
Môi trường Nồng độ BAP (mg/l) Số chồi/cụm
Chiều cao
chồi (mm) Số lá/chồi Hình thái chồi
CT1 0 7,22 ± 0,07 11,5 ± 0,08 2,9 ± 0,05 Chồi nhỏ, lá xanh nhạt CT2 0,5 7,85 ± 0,12 14,7 ± 0,1 3,82 ± 0,2 Chồi nhỏ, lá xanh CT3 1 8,32 ± 0,09 16,5 ± 0,12 3,7 ± 0,16 Chồi BT, lá xanh đậm CT4 1,5 9,75 ± 0,23 17,25 ± 0,2 4,1 ± 0,15 Chồi to, lá xanh đậm Kết quả ở bảng 3.7 cho thấy ở tất cả các môi trường đều có sự nhân chồi. Tuy nhiên, chúng tôi nhận thấy có sự chênh lệch lớn về hệ số nhân chồi cũng như
khả năng phát triển của chồi khi thay đổi nồng độ BAP. Trong đó, môi trường CT1 chúng tôi không bổ sung BAP, các mẫu thu được cho hệ số nhân chồi thấp nhất chỉ đạt 7,72 chồi/cụm. Chiều cao chồi trung bình chồi là 11,5 mm và số lá trên chồi là 2,9, chồi nhỏ, lá xanh nhạt, cho thấy khả năng nhân nhanh cũng như sự phát triển của chồi chưa thực sự tốt. Sau đó chúng tôi bổ sung BAP vào môi trường, các chỉ tiêu theo dõi đã có sự thay đổi khá rõ rệt theo từng công thức, với môi trường CT2 chúng tôi bổ sung 0,5mg/l BAP thì số chồi/ cụm là 7,85 và chỉ số này tăng dần với môi trường CT3 và CT4. Qua quá trình theo dõi, chúng tôi nhận thấy trên môi trường CT4 cho hệ số nhân chồi cao nhất với hệ số nhân chồi đạt 9,75 chồi/cụm, chiều cao chồi đạt 17,25 mm và số lá là 4,1 lá/chồi, các chồi phát triển khỏe mạnh, đồng đều và có màu xanh đậm.
CT2 - BAP 0 mg/l CT4 - BAP 1,5mg/l
Hình 3.6. Ảnh hưởng của BAP tới sự nhân nhanh chồi lan Thạch hộc
Như vậy, chúng tôi kết luận khả năng nhân chồi của giống lan Thạch hộc cao nhất ở môi trường MS bổ sung 30g/l đường saccharose; 6g/l agar; 50ml/l nước dừa; 1g/l than hoạt tính; 1,5mg/l BAP.
Tuy nhiên, chúng tôi nhận thấy khi không bổ sung chất kích thích vẫn cho kết quả tạo chồi, điều này có khả năng loài lan này có chứa lượng cytokinin nội sinh cao nên vẫn tự tạo được lượng chồi tương đối dù không có bổ sung cytokinin vào môi trường. Đây là một trong những ưu thế của giống lan
lượng chất điều hòa sinh trưởng nhiều, điều này vừa kinh tế lại vừa hạn chế được hiện tượng đột biến cho mẫu cấy.