- Cân 10g mẫu và đem đi sấy khô ở 105oC ( ký hiệu m1). - Cân lại mẫu cho đến khi có khối lượng không đổi (m2).
B1: Cân chính xác trên cân phân tích 0,2 - 0,5 mẫu đã sấy khô ở 105oC. Cho vào bình tam giác 250ml.
B2: Thêm chính xác 10ml dung dịch K2Cr2O7 1N lắc cho thật đều.
B3: Thêm cẩn thận 20 ml axit H2SO4 đặc từ ống đong hay pipet, lắc cho thật đều dung dịch (Chú ý: Sau bước này, nếu dung dịch trong bình tam giác có màu xanh lá cây, màu của Crom III (Cr3+), chứng tỏ đã thiếu dung dịch K2Cr2O7, có thể cho thêm dung dịch K2Cr2O7 hoặc bỏ mẫu đó đi, cân lại với lượng mẫu nhỏ hơn và làm lại với các bước ban đầu).
B4: Đặt bình tam giác lên bếp điện (có tấm amiăng) và đun nhẹ trong 30 phút.
B5: Sau đó cho thêm 100 ml nước cất và 10 ml axit H3PO4 đặc, lắc cho thật đều dung dịch, và để nguội dung dịch.
B6: Thêm 0,5ml chỉ thị màu Ferrolin.
B7: Dùng dung dịch muối Morh đề chuẩn độ dung dịch này. Nhỏ từng giọt muối Morh và lắc thật đều cho đến khi màu của dung dịch chuyển từ màu vàng đậm sang màu xanh và kết thúc là màu nâu đỏ (Màu của dung dịch chỉ thị màu Ferroin).
3. Cách tính kết quả
* Phần trăm cacbon hữu cơ (OC):
% OC =
(V2 – V1) * V3 * 4 * 100
Ghi chú: V1: Thể tích dung dịch muối Morh để chuẩn độ mẫu trắng V2: Thể tích dung dịch muối Morh để chuẩn độ mẫu thực
m: Khối lượng mẫu đem phân tích (bước 1) V3: Thể tích dung dịch K2Cr2O7 sử dụng ở bước 2 N: Nồng độ của dung dịch K2Cr2O7 (nồng độ là 1N)
4: (Số mili đương lượng của C = 12/4 = 3 mg C, phương pháp này được xác định oxy hóa 75% tổng chất hữu cơ, do đó: 4 = 3*100/75).
2.1.3. Phương pháp xác định hàm lượng nitơ
Nitơ là nguyên tố dinh dưỡng cần thiết cho sinh vật và thực vật phát triển. Nitơ tồn tại ở chủ yếu ở các dạng: Nitơ hữu cơ; nitơ trong amoni (NH4+), nitrit (NO2-), nitrat (NO3-); v N2.
Tổng nitơ là tổng hàm lượng của nitơ hữu cơ; nitơ trong amoni (NH4+), nitrit (NO2-), nitrat (NO3-). Nitơ hữu cơ được xác định bằng phương pháp Kjeldahl. Tổng nitơ Kjeldahl là tổng của nitơ hữu cơ, nitơ trong amoni (NH4+).
a. Nguyên tắc:
Mẫu được tro hóa trong bình Kjeldanl bằng H2SO4 có mặt chất xúc tác của (K2SO4, CuSO4, Se) kết quả các hợp chất amonia hữu cơ chuyển thành NH4+, ammonic tự do cũng chuyển thành NH4+ Phương trình phản ứng: R-CH(NH2)-COOH + H2SO4 CO2 + H2O + (NH4)2SO4 (NH4)2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2NH3 + 2H2O NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4 + H2SO4( dư) b. Hóa chất - Axit H2SO4 đặc (d = 1,84 g/ml)
Stt Pha từ ống chuẩn
H2SO4 Nồng độ dung dịch H2SO4 thu được
Thể tích dung dịch thu được 1 0,1 N 0,1 N 1000 ml 2 0,1 N 0,2N 500 ml 3 0,1 N 0,5 N 200 ml Axit HCl đặc (d = 1,18 g/ml)
Dung dịch NaOH 400g/l: Hoà tan 400 g NaOH vào 500 ml nước cất và sau đó định mức thành 1000ml.
Dung dịch NaOH 0,1 N: Hòa tan 2g NaOH vào khoảng 200 ml nước cất và sau đó định mức thành 500ml. (Chuẩn lại dung dịch này bằng dung dịch H2SO4 0,1N với chỉ thị l phenolphtalein. Lấy 5ml dung dịch NaOH vừa pha cho vào cốc, nhỏ 5 giọt chỉ thị phenolphtalein, dung dịch có màu hồng, dùng dung dịch H2SO4 0,1N chuẩn cho đến khi hết màu, tính nồng độ NaOH qua công thức V1.N1= V2.N2).
- Đá bọt.
- Hỗn hợp khử ( Hỗn hợp bột crom,...) - Hỗn hợp xúc tác: K2SO4 v CuSO4.5H2O.
- Hỗn hợp chỉ thị: Hồ tan 0,1 g Metyl đỏ vào 50ml cồn tuyệt đối (Rượu etylic), thêm vào 0,05g Metyl xanh, lắc cho tan hết, và thêm cồn tuyệt đối đến vạch định mức 100 ml.
c. Quy trình xác định chuẩn bị mẫu:
- Nghiền nhỏ mẫu và rây qua rây 0,2 mm.
- Cn 10 (g) mẫu v đem đi sấy khô ở 105oC (ký hiệu m1) - Cân lại mẫu cho đến khi có khối lượng không đổi (m2) - Xác định được độ ẩm (hay hệ số khô kiệt)
B1: Cân chính xác trên cân phân tích 2g mẫu đã sấy khô ở 105oC và đã qua rây 0,20mm. Cho vào bình tam giác 250ml.
B2: Khử nitơ ở dạng nitrat về amoni (Bước này không cần thực hiện nếu biết chắc chắn rằng mẫu chỉ có nitơ tồn tại ở dạng amoni)