B3: Phá hủy mẫu (Bước này cần thiết thực hiện khi trong mẫu thử có nitơ hữu cơ ở các dạng khác urê hoặc mẫu chưa biết rõ thành phần)
- Chuyển lượng mẫu cân vào bình tam giác 250 ml, thêm 20g hỗn hợp xúc tác ( 18g K2SO4 + 2g CuSO4.5.H2O) và thêm cẩn thận 30 ml H2SO4.
- Chuyển lượng mẫu cân vào bình tam giác 250 ml, thêm 20g hỗn hợp xúc tác ( 18g K2SO4 + 2g CuSO4.5.H2O) và thêm cẩn thận 30 ml H2SO4. B4: Chưng cất và chuẩn độ.
- Chuyển toàn bộ dung dịch vừa phá mẫu vào bình cầu hai cổ dùng để chưng cất (loại bình 500 ml) và cho vào đó vài viên đá bọt (Tạo tâm sôi trong chưng cất (loại bình 500 ml) và cho vào đó vài viên đá bọt (Tạo tâm sôi trong quá trình cất).
- Cho thêm khoảng 200ml nước cất vào bình cầu, và lắp bình cầu vào hệ thống chưng cất. thống chưng cất.
- Lấy 50ml dung dịch H2SO4 0,1N vo cốc 250ml và đặt đầu ra của ống sinh hàn ngập vào dung dịch, tiếp đó cho thêm 5 giọt hỗn hợp chỉ thị (Metyl sinh hàn ngập vào dung dịch, tiếp đó cho thêm 5 giọt hỗn hợp chỉ thị (Metyl đỏ và Metyl xanh).
- Dùng phễu và rót từ từ vào bình chưng cất 80ml dung dịch NaOH 400g/l. (Lúc rót mà thấy dung dịch trong bình có phản ứng và sôi lên thì cho 400g/l. (Lúc rót mà thấy dung dịch trong bình có phản ứng và sôi lên thì cho thêm một ít nước cất vào bình chưng, sau đó mới tiếp tục rót dung dịch NaOH 400g/l.). Lấy nước cất trong phễu và đậy nắp cổ bình chưng.
- Tiến hành chưng cất cho đến khi thu được khoảng 200ml dung dịch trong cốc hứng. Hạ cốc hứng xuống và rồi mới ngừng đun. trong cốc hứng. Hạ cốc hứng xuống và rồi mới ngừng đun.