3.4. Ứng dụng phương pháp định lượng đồng thời paracetamol và tramadol HCl trong chế phẩm HCl trong chế phẩm
Sử dụng phương pháp đã xây dựng, chúng tôi đã định lượng paracetamol và tramadol HCl trong 2 mẫu chế phẩm Ultracet và Gramadol. Kết quả thực nghiệm được tập hợp trong bảng 3.9 và 3.10, hình 3.7 và 3.8.
34
Bảng 3.9: Kết quả định lượng trong chế phẩm Ultracet
Khối lượng trung bình 1 viên Lượng cân Tramadol HCl Paracetamol Diện tích Hàm lượng Hàm lượng so với HL GTN Diện tích Hàm lượng Hàm lượng so với HL GTN g g mV.s mg/viên % mV.s mg/viên % 0,4374 0,0990 157220 38,47 102,6 2755094 330,98 101,8 0,1011 160998 38,57 102,9 2839466 334,02 102,8 0,1001 158925 38,46 102,6 2818435 334,86 103,0 TB 38,50 102,7 333,29 102,6 SD 0,06 0,2 2,04 0,6 Nồng độ chất chuẩn (µg/mL) 87,56 747,30 Diện tích chất chuẩn (mV.s) 158112 2748397
35
Bảng 3.10: Kết quả định lượng trong chế phẩm Gramadol
Khối lượng trung bình 1 viên Lượng cân Tramadol HCl Paracetamol Diện tích Hàm lượng Hàm lượng so với HL GTN Diện tích Hàm lượng Hàm lượng so với HL GTN g g mV.s mg/viên % mV.s mg/viên % 0,4017 0,0944 237147 39,74 106,0 4145652 317,89 97,8 0,0917 223377 38,54 102,8 4148328 327,46 100,8 0,0939 225688 38,02 101,4 4257537 328,21 101,0 TB 38,77 103,4 324,52 99,9 SD 0,88 2,4 5,75 1,8 Nồng độ chất chuẩn (µg/mL) 87,56 747,30 Diện tích chất chuẩn (mV.s) 222427 4147008
Hình 3.8: Kết quả định lượng mẫu chế phẩm Gramadol
Nhận xét: Tất cả các mẫu chế phẩm có hàm lượng đều nằm trong giới hạn cho phép theo tiêu chuẩn của Dược điển Việt Nam IV và USP 35 – NF 30.
36
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận
Đề tài đã hoàn thành được các mục tiêu đề ra, cụ thể như sau:
Xây dựng phương pháp điện di mao quản để định lượng đồng thời paracetamol và tramadol HCl trong chế phẩm lưu hành trên thị trường. Phương pháp tiến hành đơn giản, thời gian phân tích nhanh, tốn ít dung môi, hóa chất, ít độc hại. Chuẩn bị mẫu bằng cách hòa tan trực tiếp nên tiến hành nhanh chóng và ít gây sai số. Phương pháp CZE được tiến hành trong điều kiện:
- Mao quản: tổng chiều dài 62,5 cm; chiều dài hiệu dụng 50 cm; đường kính trong 75 µm.
- Detector PDA, phát hiện ở bước sóng 210 nm - Điện thế đặt vào mao quản: 20 kV
- Dung dịch điện ly nền: Dung dịch Dikali hydrophosphat 25 mM pH 9,2.
- Nhiệt độ mao quản: 25oC - Nhiệt độ bảo quản mẫu: 25oC
- Chế độ tiêm mẫu: 0,5 psi trong 10 giây
- Trước mỗi lần phân tích, mao quản được rửa theo thứ tự: Nước trong 2 phút, NaOH 0,1M trong 2 phút, nước trong 1 phút và dung dịch điện ly nền trong 2 phút.
Thẩm định được phương pháp vừa xây dựng với các tiêu chí: độ phù hợp hệ thống, độ đặc hiệu, khoảng tuyến tính, độ đúng, độ lặp lại. Các kết quả cho thấy hệ thống điện di phù hợp với việc định lượng đồng thời hai chất này vàphương pháp có độ đặc hiệu, độ đúng, độ lặp lại tốt và tuyến tính trong khoảng khảo sát.
Đã ứng dụng được phương pháp xây dựng được để định lượng đồng thời paracetamol và tramadol HCl trong chế phẩm Gramadol, Ultracet đang được lưu hành trên thị trường cho kết quả đạt yêu cầu về hàm lượng theo Dược điển Việt Nam IV.
37
Kiến nghị
Là phương pháp có nhiều ưu điểm về độ nhạy và tiến hành đơn giản, do đó điện di mao quản nên được tiếp tục đầu tư, nghiên cứu và phát triển như một công cụ hỗ trợ cho HPLC.
Do phương pháp định lượng đồng thời paracetamol và tramadol chưa có trong Dược điển Việt Nam IV nên cần tiếp tục thẩm định lại quy trình trên, so sánh với phương pháp HPLC trong USP, đồng thời nghiên cứu thêm các phương pháp khác để tìm ra được phương pháp phân tích hiệu quả mà thuận lợi nhất.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
1. Trần Tử An (2006), Hóa phân tích II: Phân tích dụng cụ, Nhà xuất bản Y học,
Hà Nội. tr. 215-235.
2. Bộ Y tế (2007), Dược lý học tập 1, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội. tr. 114. 3. Bộ Y tế (2007), Hóa dược tập 1, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội. tr. 101-102.
4. Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội. tr. 462, PL-465, PL-220.
5. Bộ Y tế (2009), Dược thư Quốc Gia Việt Nam, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội. tr. 904-905, 1114-1115.
6. Bộ Y tế (2011), Dược lâm sàng, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội. tr. 220-234.
7. Thái Nguyễn Hồng Thu , Phạm Gia Huệ (2015), Điện di mao quản, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội. tr. 11-75.
8. Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia (2010), Thẩm định phương pháp trong phân tích hóa học và vinh vật, Nhà xuất bản Khoa học và kỹ
thuật, Hà Nội. tr. 16-57.
Tiếng Anh
9. Adriana Ciurba, Gabriel Hancu, Livia-Maria Cojocea, Emese Sipos , Nicoleta Todoran (2014), "Development of new formulation and its evaluation by capillary electrophoresis of tablets containing tramadol hydrochloride and paracetamol",
Pharmaceutical Development and Technology, 19 (7), pp. 833-838.
10. Barbara G. Wells, Joseph T. DiPiro, Terry L. Schwinghammer , Cecily V. DiPiro (2015), Pharmacotherapy Handbook, 9th, McGraw-Hill Education, Europe. pp. 566.
11. British National Formulary (2007), BNF 68, BMJ Group and Pharmaceutical
Press, UK. pp. 276, 280, 290.
12. British Pharmacopoeia (2013), BP 2013 Electronic version.
13. Devalaraju Ravisankar, Vishnumolakala Sridevi , Putta Geetha Kumar (2015), "Development and validation of hplc method for the simultaneous quantification of
acetaminophen and tramadol in combined pharmaceutical dosage forms with UV detection", International Journal of Applied Biology and Pharmaceutical Technology, 6 (2), pp. 174-181.
14. European Pharmacopoeia (2008), European Pharmacopoeia, 6th, Vol. 2,
European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare, France. pp. 2611, 3104.
15. H. Shintani , J. Polonský (1997), Handbook of Capillary Electrophoresis Applications, Blackie Academic and Professional, UK. pp. 1-18.
16. Harry G. Brittain (2013), Profiles of Drug Substances, Excipients and Related Methodology, Vol. 38, Academic Press, UK. pp. 464-466.
17. International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (2005), Validation of Analytical
Procedures: Text and Methodology (ICH Q2(R1).
18. Jaime N. Delgado , William A. Remers (1998), Wilson and Gisvold's Textbook of Organic Medicinal and Pharmaceutical Chemistry, 10th, Lippincott-Raven, US.
pp. 704, 915.
19. Kevin D. Altria (1996), Capillary Electrophoresis Guidebook: Principles, Operation, and Applications, Humana Press, US. pp. 73.
20. Kevin D. Altria (1998), Analysis of Pharmaceuticals by Capillary Electrophoresis, Vieweg+Teubner Verlag. pp. 1-6.
21. M. Gandhimathi , T.K. Ravi (2008), "RP-HPLC and HPTLC Estimation of Tramadol Hydrochloride and Paracetamol in Combination", Asian Journal of Chemistry, 20 (6), pp. 4940-4942.
22. Maha A. Sultan, Hadir M. Maher, Nora Z. Alzoman, Mona M. Alshehri, Rizk. Mohamed S., Mona S. Elshahed , Ileana V. Olah (2013), "Capillary Electrophoretic Determination of Antimigraine Formulations Containing Caffeine, Ergotamine, Paracetamol and Domperidone or Metoclopramide", Journal of chromatographic science, 51 (6), pp. 502-510.
23. Roger Walker , Cate Whittlesea (2012), Clinical Pharmacy and Therapeutics,
5th, Churchill Livingstone Elsevier, Netherlands. pp. 519-523.
24. Tarek Belal, Tamer Awad , C. Randall Clark (2009), "Determination of Paracetamol and Tramadol Hydrochloride in Pharmaceutical Mixture Using HPLC and GC-MS", Journal of chromatographic science, 47, pp. 849-854.
25. Tian Zhu, Li Ding, Xiaofeng Guo, Lin Yang , Aidong Wen (2007), "Simultaneous Determination of Tramadol and Acetaminophen in Human Plasma by LC-ESI-MS", Chromatographia 2007, 66, pp. 171-178.
26. The United States - Food and Drug Administration (2015), Guidance for Industry: Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics.
27. U.S.Pharmacopoeia National Formulary (2012), USP35-NF30. pp. 2030-2034,
2060-2062, 4904-4906.
28. V.V.Vaidya, K.V.Mangoakar, Shikha M.N.Roy, P.S.Barde , A.Y.Desai (2008), "Simultaneous RP-HPLC determination of aceclofenac, paracetamol and tramadol HCl in pharmaceutical preparations", Analytical CHEMISTRY An Indian Journal, 7 (9), pp. 710-713.