o- quinon + Fe(CN)64 tyrosinase diphenol + Fe(CN)63-
CH3COCOO H+ H3PO 4+ 1/2 O2 CH3CO P+ H2O 2+ CO
Các hợp chất chứa nitrat, nitrit cĩ thể định lượng theo phản ứng oxy hĩa khử xúc tác bởi nitratreductase và nitritreductase:
NO3- + 2H+ NO2- + H2O NO2- + H+ NH4+ + 2H2O
NH3 OH-
Bảng 5.5: Định lượng nitrit, nitrat, sulfat
Chất Enzym Điện cực chỉ thị Giới hạn phát hiện (mmol/l)
Nitrit Nitrit reductase Điện cực NH3 50
Nitrate Nitrat reductase và nitrit reductase Điện cực NH4+ 50
Sufate Arylsulfatase Điện cực Pt 100
Bảng 5.6: Điện cực enzym định lượng phosphate:
Enzym (mmol/l)Nồng độ Sai số (%) Điện cực chỉ thị Thời gian đáp ứng (phút) Tính ổn định
Phosphatase và
glucooxydase ≥ 0.01 5.9 H2O2 5 – 10 nghiệm (TN)/ > 100 thí 3 tháng
Nucleosiphosphorilase và xanthinoxydase 10 – 250 5.9 H2O2 2 30 TN Pyruvat oxydase 12 – 80 5.9 O2 7 7 ngày (khả năng đáp ứng giảm 50%) Nucleosiphosphorilase và xanthinoxydase 0.5 – 100 5 O2 1.5 > 8 ngày/ 300 ngày d) Định lượng các chất độc
Các loại thuốc trừ sâu phospho cĩ độc tính rất cao, ngồi tác dụng độc sơ cấp, chúng cịn làm biến đổi các quá trình trao đổi chất của tế bào bằng cách tác dụng lên các enzym thiết yếu của tế bào như esterase, oxydase, phosphorylase, dehydrogenase. Theo tiêu chuẩn EC, nồng độ tối đa cho phép của dư lượng các chất này trong nước uống là 0.1 mg/l đối với mỗi loại riêng biệt và 0.5 mg/l đối với hỗn hợp. Việc xác định các chất độc này được thực hiện bằng sắc ký lỏng cao áp (HPLC) hoặc sắc ký khối phổ (GC/MS) nhưng thiết bị đắt tiền, phương pháp phức tạp và trình độ kỹ thuật cao.
Sử dụng điện cực cĩ gắn enzym cholinesterase dựa vào đặc điểm các chất độc này sẽ kìm hãm enzym này đem lại nhiều thuận lợi trong phân tích.
Quá trình phản ứng thủy phân cholin nhờ cholinesterase như sau:
CH3COS(CH2)2N+(CH3)3 Acetylcholinesterase CH3COO- + HS(CH2)2N+(CH3)3
Acetyltiocholin Acetate Tiocholin