Hợp chất này có màu đỏ tím khi đun nóng và cho phản ứng dương tính sử dụng thuốc hiện màu H2SO4 10% cho phép dự đoán đây là một hợp chất tritecpenoit. Phổ 1
H-NMR cũng đặc trưng cho một hợp chất tritecpenoit. Trong đó, sự xuất hiện của 7 nhóm metyl bậc ba được xác định bởi các tín hiệu singlet cộng hưởng tại 0,96 (H-23 và H-27), 0,76 (H-24), 0,91 (H-25), 1,05 (H-26), 0,80 (H-28) và 1,68 (H-30). Sự chuyển dịch mạnh về vùng trường thấp của nhóm metyl tại 1,68 cùng với sự xuất hiện của 02 proton cộng hưởng tại 4,56 (1H, d, J = 1.0 Hz, Ha-29) và 4,68 (1H, d, J = 2,0 Hz, Hb-29) gợi ý cho sự có mặt của một nhánh isopropenyl. Ngoài ra, hai tín hiệu cộng hưởng tại 3,43 (1H, dd, J = 11,5, 4,5 Hz, H-1) và 3,24 (1H, dd, J =
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học
Hình 3.1.1.a1. Phổ 1
H-NMR của hợp chất 18A-GE-12A
Hình 3.1.1.a2. Phổ 1
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học HO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 OH
Hình 3.1.1.b. Cấu trúc hóa học của hợp chất 18A-GE-12E
Trên phổ 13
C-NMR của hợp chất 18A-GE-12A xuất hiện các tín hiệu của 30 nguyên tử cacbon. Trong đó, sự xuất hiện của một nhánh isopropenyl được khẳng định bởi các tín hiệu cacbon đặc trưng cộng hưởng tại 151,03 (C-20), 109,67 (C-29) và 19,43 (C-30). Ngoài ra, các tín hiệu cộng hưởng tại 79,23 (C-1), 75,96 (C-3) xác nhận sự có mặt của 02 nhóm oximetin.
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học
Hình 3.1.1.c. Phổ 13
C-NMR của hợp chất 18A-GE-12A
Hình 3.1.1.d. Phổ HSQC của hợp chất 18A-GE-12A
Thêm vào đó, sự có mặt 06 nhóm metyl bậc 3 được chứng minh bởi các tín hiệu cacbon cộng hưởng tại 28,06 (C-23), 15,15 (C-24), 12,10 (C-25) 16,44 (C-26), 14,66 (C-27) và 18,25 (C-28). Các số liệu cacbon được gán với các số liệu proton tương ứng thông qua phổ HMQC và kết quả được tổng hợp trong bảng 3.1.
Bảng 3.1. Kết quả phổ NMR của 18A-GE-12A
C # Ca,b Ha,c mult, (J = Hz) HMBC (HC) 1 79,0 79,23 3,43 dd (11,5, 4,5) 2, 3, 5, 10, 25 2 37,5 38,28 1,68/1,84
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học 3 75,7 75,96 3,24 dd (12,5, 4,5) 1, 4, 23, 24 4 38,9 39,10 - 5 53,1 53,32 0,58 dd (11,5, 2,0) 4, 6, 10, 23, 24, 25 6 18,0 18,20 1,59 7 34,1 34,32 1,38 8 41,3 41,57 - 9 51,4 51,69 1,51 10 43,5 43,79 - 11 23,8 24,04 1,38 */2,18 m 12 25,0 25,30 1,14/1,68* 13 38,0 37,79 1,68* 14 42,8 43,12 - 15 27,4 27,73 1,01/1,68* 16 35,5 35,83 1,38/1,49 17 42,9 43,12 - 18 48,3 48,54 1,35* 19 47,9 48,20 2,39 m 13, 18, 20, 21, 29, 30 20 150,8 151,03 - 21 29,7 29,98 1,27/1,92 22 39,9 40,21 1,20/1,39 23 14,9 15,15 0,96 s 3, 4, 5, 24 24 27,8 28,06 0,76 s 3, 4, 5, 23 25 11,9 12,10 0,91 s 1, 5, 9, 10 26 16,2 16,44 1,05 s 7, 8, 9, 14 27 14,4 14,66 0,96 s 8, 13, 14, 15 28 18,0 18,25 0,80 s 16, 17, 18, 22 29 109,4 109,67 4,56 d (1,0)/4,68 d (2,0) 19, 20, 30 30 19,2 19,43 1,68 s 19, 20, 29
ađo trong CDCl3, btại 125 MHz, ctại 500 MHz, *tín hiệu bị che khuất, #
số liệu của lup-20(29)-en-1,3-diol [1]
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học
Hình 3.1.1.f. Phổ H-H COSY dãn rộng của hợp chất 18A-GE-12A
HO
OH
Hình3.1.1.g. Các tương tác H-H COSY của hợp chất 18A-GE-12A
Từ các dữ kiện thu được cho phép nhận định hợp chất 18A-GE-12A có cấu trúc khung tritecpen lup-20(29)-en và trong phân tử có 2 nhóm oximetin. Phân tích chi tiết các tương tác ghi nhận được trên phổ H-H COSY (hình 2.2.e-g) của hợp chất 18A-GE-12A cho phép ghép nối các mảnh cấu trúc C- 1/C-2/C-3, C-5/C-6/C-7, C-9/C-11/C-12/C-13/C-18/C-19/C-21/C-22 và C- 15/C-16. Các kết quả trên cùng với các tương tác xa nhận được trên phổ HMBC cho phép ghép nối các đơn vị cấu trúc lại với nhau và xây dựng nên cấu trúc tổng thể cả phân tử của hợp chất 18A-GE-12A (hình 2.2.h). Tương tác HMBC từ proton H-25 ( 0,91) sang cacbon C-1 ( 79,23) và từ proton H-
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học
1 ( 3,43) sang cacbon C-25 ( 12,10) cho phép xác định vị trí liên kết của nhóm hydroyl thứ nhất tại cacbon C-1. Vị trí của nhóm oximetin còn lại được khẳng định tại C-3 bởi tương tác xa ghi nhận được trên phổ HMBC từ các proton metyl H-23 ( 0,96) và H-24 (0,76) sang cacbon C-3 ( 75,96) và từ proton H-3 ( 3,24) sang các cacbon metyl C-23 ( 28,06) và C-24 ( 15,15).
Hình 3.1.1.h. Phổ HMBC của hợp chất 18A-GE-12A
Cấu hình không gian tại các tâm bất đối của hợp chất 18A-GE-12A được xác định bởi sự phù hợp hoàn toàn về số liệu phổ NMR tại các vị trí
Phan Thị Thanh K31D- Khoa Hoá Học
tương ứng so với các số liệu đã được công bố [1]. Từ tất cả các phân tích đã nêu, hợp chất 18A-GE-12A được xác định là lup-20(29)-en-1,3-diol.