Bâng 3 Két quâ SKLM mot chiêu vâi hê dung mơi 3.
2.2.2.4. Dinh luong flavonoid bàng phuong phâp do quang.
a. Chuân bi:
- Dich kiêm: Trơn rỵơng thë tỵch câc dung dich NaOH 0,1N và NaHC03 0,05M.
- Dung djch Rutin gơc qua quâ trinh thirc nghiêm nhân thâ'y nơng dơ rutin tir lmg% dê'n 5mg% tuân theo dinh luât Lamber- Bear.
b. Tien hành
Cân trên cân phân tich duac 0,0300g rutin chuân hồ tan bàng methanol trong bïnh dinh mire 100ml. Thêm methanol toi vach, duac dung dich rutin gơc. Pha câc dung dich trong binh dinh mire 10ml dë do quang theo bàng 4.
Bàng 4: Nơng dơ Rutin chuan
\ . Mâu Dich 1 2 3 4 5 6 7 8 Dung dich Rutin gơc (ml) 0,25 0,50 0,75 1,00 1,25 1,50 1,75 0,00 Dung dich kiêm (ml) 5 5 5 5 5 5 5 5 Methanol vd 10 ml vd 10 ml vd 10 ml vd 10 ml vd 10 ml vd 10 ml vd 10 ml vd 10 ml Dë yên 1 giơ, dem do quang à buơc sơng 420 nm cho kê't quâ sau:
Bàng 5: Su liên hê giüa nơng dơ (C mg%) và mât dơ quang (D) cüa dung dich Rutin chuan
Mâu 1 2 3 4 5 6 7 8
C mg% 0,750 1,500 2,225 3,000 3,750 4,500 5,520 0,000 D 0,120 0,248 0,437 0,598 0,703 0,833 1,005 0,000
c. Dinh luong mâu thü
Cân chmh xâc 20g duoc liêu, cho vào bỵnh Soxhlet chiét bàng ether dàu hô den hët màu. Bơ bâ duoc liêu ra dé ngồi khơng khi cho bay hét dung mơi roi cho vào binh càu dun hơi liru câch thüy vơi methanol 3 làn (30ml, 20ml, 20ml) mơi làn 1 giơf, gơp dich chiét, loc. Lâ'y dich loc câ't thu hơi dung mơi duoc cao dâc, chiét flavonoid trong cao dâc bàng ethylacetat dén khi ethylacetat khơng con phân ûng cüa flavonoid. Cơ dich chiét ethylacetat à
nhiêt dơ 70°C dén cân. Hồ tan cân vơi methanol vào binh dinh mûc 100ml thêm methanol toi vach (dich 1). Lâ'y 10ml dich 1 cho vào bỵnh dinh mûc
100ml, thêm methanol tơi vach (dich 2).
Dùng pipet chfnh xâc hüt 1ml dich 2 cho vào binh dinh mûc 10ml, thêm vào dơ 5ml dich kiêm, thêm methanol vüa dü dê'n vach. De yên 1 giơ dem do quang à buơc sơng 420nm.
y = 0.1869x- 0.0039 R2 = 0.9934
C mg%
Hinh 6. Do thi biêu diên su liên hê giüa mât dơ quang D và nong dơ Cmg% cüa rutin chuan.
Bâng 6. Két quâ dinh luong Flavonoid tồn phân. Lân D C mg% 1 0,186 1,016 2 0,187 1,021 3 0,184 1,005 TB 0,186 1,014
Hàm luçmg flavonoid duoc tmh theo (CT1) : X% = 1,24%.
Két luân: Bàng phuong phâp do quang, két quâ cho thây hàm luong flavonoid trong lâ Don lâ xanh là 1,24%.