HIỆU QUẢ ĐỐI KHÁNG CỦA BỐN LOẠI DỊCH TRÍCH THỰC VẬT

ĐỐI VỚI SỰ PHÁT TRIỂN CỦA NẤM BIPOLARIS SP. VÀ PITHOMYCES

SP. GÂY BỆNH LEM LÉP HẠT LÚA TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO 3.2.1 Hiệu quả đối kháng của bốn loại dịch trích thực vật đối với sự phát triển của nấm Bipolaris sp. gây bệnh lem lép hạt lúa t ng điều kiện in vitro

Số liệu ở Bảng 3.5 ghi nhận sự phát triển ĐKKT của nấm Bipolaris sp. khi được xử lý với các loại dịch trích thực vật cỏ hôi, lá neem, lá sống đời và củ nghệ. Kết quả cho thấy tất cả nghiệm thức xử lý với dịch trích thực thực vật ở các thời điểm (trừ 144, 168 h) đều có ĐKKT thấp hơn có ý ngh a so với nghiệm thức đối chứng. Tại thời điểm 48h, trung bình ĐKKT của nghiệm thức xử lý dịch trích cỏ hôi, lá neem, lá sống đời và củ nghệ thấp hơn đối chứng (1,68 cm) và dao động trong khoảng 0,90-1,50 cm. Tuy nhiên, nghiệm thức lá sống đời và củ nghệ cho khả năng ức chế cao hơn cỏ hôi và lá neem. Ở thời điểm 144h, các nghiệm thức lá neem, cỏ hôi, lá sống đời và củ nghệ ở nồng độ 2% và củ nghệ ở nồng độ 4% có ĐKKT nấm không khác biệt có ý ngh a so với đối chứng. Đến thời điểm 168h, các nghiệm thức xử lý với dịch trích không thể hiện khả năng ức chế khuẩn ty nấm và không khác biệt với nghiệm thức đối chứng. Ngoại trừ, nghiệm thức xử lý với củ nghệ 8% (8,42 cm) có khả năng ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm và khác biệt có ý ngh a với đối chứng (9 cm).

27

Bảng 3.5. Ảnh hưởng của bốn loại dịch t ích đối với sự phát triển đường kính (cm) của khu n ty nấm Bipolaris p. t ng điều kiện in vitro

Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 % ns: khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5 %.

Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ au khi đặt khoanh khu n ty)

Loai dịch trích N ng độ 24h 48h 72h 96h 120h 144h 168h

Lá Neem 2% 1,50 b 2,17 ef 4,63 b 6,26 b 7,58 bc 8,52 ab 9,00 a

Lá Neem 4% 1,45 bc 2,80 def 4,37 de 5,82 e 7,18 ef 8,32 bcd 8,94 a

Lá Neem 8% 1,33 de 3,02 b 4,16 f 5,56 f 6,86 f 8,04 d 8,82 a

Cây Cỏ hôi 2% 1,34 de 2,93 bcd 4,58 bc 6,16 b 7,60 bcd 8,64 ab 9,00 a

Cây Cỏ hôi 4% 1,38 cd 2,97 bc 4,56 bc 6,10 bc 7,48 cde 8,46 bc 9,00 a

Cây Cỏ hôi 8% 1,28 e 2,85 cde 4,51 bcd 5,90 de 7,38 de 8,34 bcd 8,92 a

Lá Sống đời 2% 0,96 f 2,67 fg 4,50 bcd 6,24 b 7,88 b 8,54 ab 9,00 a Lá Sống đời 4% 0,93 f 2,53 g 4,00 g 5,56 f 6,94 f 8,12 d 8,78 a Lá Sống đời 8% 0,94 f 2,69 efg 4,25 ef 5,52 f 6,92 f 8,48 bc 9,00 a Củ Nghệ 2% 0,91 f 2,68 fg 4,43 cd 6,20 b 7,74 bcd 8,62 ab 9,00 a Củ Nghệ 4% 0,90 f 2,70 ef 4,37 de 6,08 bcd 7,58 bcd 8,60 ab 9,00 a Củ Nghệ 8% 0,94 f 2,67 fg 4,36 de 5,96 cde 7,38 de 8,18 cd 8,42 b Đối chứng 1,68 a 3,44 a 5,20 a 6,84 a 8,30 a 8,82 a 9,00 a Mức ý ngh a * * * * * * * CV (%) 5,19 4,03 2,47 2,42 3,47 2,66 2,35

28

Ở thời điểm 24h cả 4 loại dịch trích cỏ hôi, lá neem, lá sống đời, củ nghệ ở các nồng độ 2%, 4%, 8% đều hạn chế sự phát triển ĐKKT nấm và khác biệt có ý ngh a so với đối chứng. Trong đó, nghiệm thức xử lý củ nghệ và lá sống đời cho hiệu quả cao hơn và khác biệt có ý ngh a so với các nghiệm thức còn lại. Ở các thời điểm 48, 72 và 96h, các nghiệm thức xử lý dịch tr ch đều có hiệu quả ức chế và khác biệt có ý ngh a đối với đối chứng. Ở thời điểm 120h, chỉ có nghiệm thức lá sống đời 2% là không khác biệt so với đối chứng. Đến thời điểm 144h, nghiệm thức xử lý lá neem và sống đời 8% có hiệu quả ức chế cao và khác biệt có ý ngh a đối so với đối chứng. Ở thời điểm 168h, chỉ có nghiệm thức xử lý củ nghệ 8% cho hiệu suất đối kháng có sự khác biệt có ý ngh a so với đối chứng (Bảng 3.6).

Qua kết quả kháng nấm của các loại dịch tr ch đối với nấm Bipolaris sp. cho thấy dịch trích từ củ nghệ, lá neem và lá sống đời có hiệu quả cao. Theo Amadioha (2000) dịch trích từ lá và hạt neem có khả năng hạn chế sự phát triển ĐKKT của

nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn lúa và một nghiên cứu khác của Paul và

Sharma (2002) cho rằng chiết xuất từ lá neem và nước theo tỷ lệ 1:10 hạn chế sự phát triển bệnh đốm lá trên cây lúa mạch (trích dẫn Hazmi, 2013). Hazmi (2013) cho biết dịch trích từ lá và hạt neem bằng nước và ethanol làm chậm sự phát triển của 6 loài nấm Pythium aphnidermatum, Alternaria alternata, Bipolaris

sorolaniana, Fusarium oxysporium, Helminthosporium sp. và Thilaeviobisis sp.

theo các tỷ lệ khác nhau. Theo Ahmed (2013) cho biết dịch trích từ tỏi, neem, chirat và bishkatali với các nồng độ phá loãng (1:1, 1:2) hạn chế sự phát triển của

Alternaria spp. Bipolaris sorokiniana, Curvularia lunata, Fusarium spp. Thí

nghiệm của Shukla và ctv., (2001) cho biết những tinh dầu chiết từ củ nghệ ở nồng độ 1,4 ml/ml có thể ức chế sự phát triển của nấm gây bệnh cây: Aspergillus

parasiticus, Cladosparium, Curvularia lunata, Colletotrichum capsici, Fusarium

29

Bảng . . Hiệu uả ức chế ( ) ự phát t iển khu n ty nấm Bipolaris p. của ốn dịch t ích t ng điều kiện in vitro

Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 % ns : khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5 %.

Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ au khi đặt khoanh khu n ty)

Loai dịch trích N ng độ 24h 48h 72h 96h 120h 144h 168h Lá Neem 2% 10,57 e 21,14 ab 10,89 e 8,46 e 6,34 cd 3,33 ab 0,00 b Lá Neem 4% 13,55 de 18,59 bc 15,91 bcd 14,89 abc 13,48 ab 5,62 ab 0,67 b Lá Neem 8% 20,56 bc 12,17 e 19,97 ab 18,69 ab 17,32 a 8,81 a 2,00 ab

Cây Cỏ hôi 2% 20,08 bc 14,74 cde 11,88 de 9,91 de 8,41 a-d 1,96 ab 0,00 b

Cây Cỏ hôi 4% 17,67 cd 13,59 de 12,29 de 10,80 cde 9,87 abc 4,02 ab 0,00 b

Cây Cỏ hôi 8% 23,72 b 17,06 bcd 13,18 de 13,71 bc 11,07 abc 5,40 ab 0,89 b

Lá Sống đời 2% 42,77 a 22,25 ab 13,40 cde 8,74 e 5,05 de 3,10 ab 0,00 b Lá Sống đời 4% 44,61 a 26,41 a 23,06 a 18,68 ab 16,36 a 7,87 a 2,44 ab Lá Sống đời 8% 43,89 a 21,80 ab 18,23 abc 19,26 a 16,58 a 3,79 ab 0,00 b Củ Nghệ 2% 45,75 a 22,04 ab 14,81 bcd 9,33 de 6,71 bcd 2,20 ab 0,00 b Củ Nghệ 4% 46,38 a 21,45 ab 15,93 bcd 11,08 cde 8,66 a-d 2,43 ab 0,00 b Củ Nghệ 8% 43,84 a 22,35 ab 16,09 bcd 12,85 cd 11,06 abc 7,08 ab 6,44 a Đối chứng 0,00 f 0,00 f 0,00 f 0,00 f 0,00 e 0,00 b 0,00 b Mức ý ngh a * * * * * * * CV (%) 7,79 7,29 8,65 8,68 10,02 17,93 81,10

30

Hình 3.2. Hiệu quả của bốn loại dịch trích đối với sự phát triển của nấm Bipolaris sp. gây lem lép hạt sau 168h

(A) Cỏ hôi 8% (C) Sống đời 4%; (E) Đối chứng

(B) Lá neem 8% (D) Củ nghệ 8%

A

C D

E

31

3.2.2 Hiệu quả đối kháng của bốn loại dịch trích thực vật đối với sự phát triển của nấm Pithomyces p. t ng điều kiện in vitro

Bảng 3.7 ghi nhận khả năng ức chế sự phát triển ĐKKT của các loại dịch trích từ lá neem, cỏ hôi, lá sống đời và củ nghệ đối với nấm Pithomyces sp. trong điều kiện in vitro. Ở thời điểm 24 GSTN, nghiệm thức xử lý với các loại dịch trích ở cả 3 nồng độ (2%, 4%, 8%) đều cho khả năng ức chế sự phát triển ĐKKT nấm, trừ các nghiệm thức xử lý lá neem là không khác biệt ý ngh a so với đối chứng. Ở thời điểm 48 GSTN, tất cả nghiệm thức xử lý với dịch trích củ nghệ, lá sống đời và cỏ hôi 8% đều có ĐKKT dao động từ 1,19-1,45 cm, thấp hơn và khác biệt có ý ngh a so với nghiệm thức đối chứng (1,53 cm), các nghiệm thức còn lại khác biệt không ý ngh a so với đối chứng. Ở thời điểm 72 GSTN, có 5 nghiệm thức xử lý với lá neem 2% và 8%, cỏ hôi 2%, 4% và 8% không khác biệt so với đối chứng, các nghiệm thức còn lại đều có khả năng ức chế sự phát triển ĐKKT và khác biệt có ý ngh a so với đối chứng. Ở các thời điểm 96, 120 GSTN, các nghiệm thức xử lý củ nghệ và lá sống đời đều thể hiện khả năng ức chế sự phát triển ĐKKT nấm với đường kính thấp hơn và khác biệt có ý ngh a so với đối chứng. Đến thời điểm 144 GSTN, tất cả các nghiệm thức đều có đường kính thấp thấp hơn đường k nh đối chứng (4,30 cm) và dao động từ 3,38-3,98 cm, trừ nghiệm thức xử lý cỏ hôi 8%. Tại thời quan sát cuối cùng 168 GSTN, ngoại trừ nghiệm thức xử lý với lá neem 8%, các nghiệm thức còn lại đều có khả năng ức chế sự phát triển đường kính khuẩn ty nấm và khác biệt có ý ngh a đối với đối chứng.

32

Bảng 3.7. Ảnh hưởng của bốn loại dịch t ích đối với sự phát triển đường kính (cm) của khu n ty nấm Pithomyces sp. trong in vitro

Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 % ns: khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5 %

Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ sau khi đặt khoanh khu n ty)

Loai dịch trích N ng độ 24h 48h 72h 96h 120h 144h 168h

Lá Neem 2% 0,90 a 1,45 c 2,22 ab 2,74 abc 3,38 ab 3,98 b 4,62 bc

Lá Neem 4% 0,88 a 1,55 ab 2,04 cd 2,68 bc 3,34 abc 3,86 bcd 4,68 b

Lá Neem 8% 0,90 a 1,56 a 2,30 a 2,88 a 3,44 ab 3,84 bcd 4,98 a

Cây Cỏ hôi 2% 0,83 b 1,51 abc 2,23 ab 2,76 ab 3,38 ab 3,98 b 4,62 bc

Cây Cỏ hôi 4% 0,83 b 1,48 bc 2,12 bc 2,70 bc 3,20 bcd 3,98 b 4,46 b-e

Cây Cỏ hôi 8% 0,81 b 1,31 d 2,14 bc 2,68 bc 3,24 bcd 4,28 a 4,52 bcd Lá Sống đời 2% 0,72 c 1,19 f 1,94 de 2,58 cd 3,20 bcd 3,72 cd 4,38 cde Lá Sống đời 4% 0,72 c 1,25 def 1,74 f 2,31 f 2,72 e 3,38 e 3,90 f Lá Sống đời 8% 0,69 cd 1,25 def 1,86 e 2,40 ef 3,06 d 3,84 bcd 4,50 bcd Củ Nghệ 2% 0,70 cd 1,28 de 1,96 de 2,61 bcd 3,26 bcd 3,88 bc 4,58 bcd Củ Nghệ 4% 0,69 cd 1,28 de 1,92 e 2,50 de 3,12 cd 3,74 cd 4,22 e Củ Nghệ 8% 0,66 d 1,22 ef 1,88 e 2,50 de 3,04 d 3,68 d 4,34 de Đối chứng 0,90 a 1,53 ab 2,22 ab 2,88 a 3,56 a 4,30 a 5,00 a Mức ý ngh a * * * * * * * CV (%) 3,24 3,95 4,10 4,69 5,29 3,37 4,08

33

Bảng 3.8 cho thấy hiệu quả ức chế sự phát triển đường kính khuẩn ty nấm

Pithomyces sp. trong điều kiện in vitro. Ở thời điểm 24 GSTN, nghiệm thức xử lý

với các loại dịch tr ch đều cho hiệu quả ức chế đối với nấm ngoại trừ nghiệm thức xử lý với lá neem 2%, 8% là không khác biệt ý ngh a so với đối chứng, trong đó các nghiệm thức xử lý với lá sống đời và củ nghệ cho hiệu quả ức chế cao nhất. Nghiệm thức xử lý với lá neem khác biệt không ý ngh a đối với nghiệm thức đối chứng. Tại thời điểm ghi nhận 48 GSTN, nghiệm thức xử lý với lá sống đời, củ nghệ có hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm cao hơn các nghiệm thức còn lại và khác biệt ý ngh a 5% với đối chứng về m t thống kê. Ở các thời điểm ghi nhận tiếp theo (72, 96, 120, 168 GSTN) nghiệm thức xử lý với lá sống đời và củ nghệ ở các nồng độ 2, 4 và 8% tiếp tục thể hiện hiệu quả đối với đối chứng. Nghiệm thức xử lý với lá sống đời có hiệu quả dao động trong khoản 13-24%, củ nghệ 12-16%, các nghiệm thức còn lại dao động từ 5-10%. Các nghiệm thức xử lý đều khác biệt ý ngh a với đối chứng trừ nghiệm thức xử lý với lá neem ở nồng độ 8%.

Từ kết quả phân tích cho thấy dịch trích từ lá sống đời và củ nghệ có khả năng hạn chế sự phát triển của nấm Pithomyces sp. là cao nhất trong 4 loại dịch trích. Dịch trích từ lá neem và cỏ hôi cho khả năng hạn chế sự phát triển nấm tương đối thấp. Võ Ch Cương (2007) tìm ra được 28 loài dịch trích thực vật có khả năng kháng bệnh bệnh cháy lá Pyricularia oryzae trên lúa. Trong đó 2 loại dịch trích sông đời và cỏ hôi có hiệu quả kháng nấm cao so với các loại dịch trích còn lại. Bhowmick và Vardhan (1981) cho biết dịch trích từ la neem làm hạn chế sự tăng trưởng của Curvularia lunata và hạn chế sự nảy mầm của một số bào tử gây bệnh (trích dẫn Hazmi, 2013).

34

Bảng . . Hiệu uả ức chế ( ) ự phát t iển khu n ty nấm Pithomyces p. của ốn l ại ịch t ích t ng điều kiện in vitro

Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 % ns : khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5%.

Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ sau th nghiệm)

Loại dịch trích N ng độ 24h 48h 72h 96h 120h 144h 168h

Lá Neem 2% 0,00 d 5,10 b 0,08 efg 4,83 de 5,05 def 7,42 b 7,53 b

Lá Neem 4% 2,22 c 0,00 bc 8,06 bcd 6,83 b-e 6,16 b-e 10,11 b 6,34 b

Lá Neem 8% 0,00 d 0,00 bc 0,00 efg 0,00 fg 3,32 ef 10,63 ab 0,34 c

Cây Cỏ hôi 2% 7,78 b 1,16 bc 0,00 efg 4,07 ef 5,05 cde 7,28 b 7,58 b

Cây Cỏ hôi 4% 7,78 b 3,16 b 4,47 cde 6,17 cde 10,13 a-d 7,31 b 10,76 b

Cây Cỏ hôi 8% 7,78 b 14,31 a 3,60 def 6,88 b-e 8,97 bcd 0,33 c 9,58 b

Lá Sống đời 2% 20,00 a 22,19 a 12,57 a-d 10,38 a-d 10,08 a-d 13,49 ab 12,39 ab

Lá Sống đời 4% 20,00 a 18,25 a 21,58 a 19,75 a 23,62 a 21,28 a 21,98 a

Lá Sống đời 8% 23,33 a 18,25 a 16,21 ab 16,61 ab 14,06 abc 10,51 ab 9,93 b

Củ Nghệ 2% 22,22 a 16,27 a 11,66 a-d 9,31 a-e 8,38 bcd 9,69 ab 8,35 b

Củ Nghệ 4% 23,33 a 16,23 a 13,48 abc 13,14 abc 12,35 abc 12,91 ab 15,46 ab

Củ Nghệ 8% 26,67 a 20,10 a 15,26 ab 13,11 abc 14,57 ab 14,28 ab 13,14 ab

Đối chứng 0,00 d 0,00 bc 0,00 efg 0,00 fg 0,00 f 0,00 c 0,00 c

Mức ý ngh a * * * * * * *

35

Hình 3.3. Hiệu quả của bốn loại dịch trích thực vật đối với sự phát triển của nấm

Pithomyces sp. sau 168h

(A) Cỏ hôi 4% (C) Sống đời 4% (E) Đối chứng

(B) Lá neem 2% (D) Củ nghệ 8%

E

A B

36

CHƯƠNG 4

KẾT LUẬN – ĐỀ NGHỊ

4.1 KẾT LUẬN

Các nghiệm thức xử lý Tiltsuper 300EC, Help 400SC và Kasumin 2L ở cả ba nồng độ đều có khả năng ức chế nấm Bipolaris sp. và Pithomyces sp. Trong đó, Tiltsuper 300EC 46,9 µl/100ml ở nồng độ cho hiệu ức chế 82,22% và Kasumin 2L 560 µl/100ml đạt 84,00% đối với nấm Bipolaris sp.. Đối với nấm Pithomyces sp. thì Tilt super 300EC ở nồng độ 46,9 µl/100ml và Help 400SC 46,9 µl/100ml cho hiệu quả cao nhất lần lượt là 86,43%, 77,96%. Tilt super 300EC ức chế hoàn toàn sự phát triển của nấm Pithomyces sp..

Các nghiệm thức xử lý với dịch trích thực vật cỏ hôi, lá neem, lá sống đời và củ nghệ ở các nồng độ 2%, 4%, 8% trên hai loại nấm Bipolaris sp. và Pithomyces

sp. đều cho hiệu quả ức chế nấm. Tuy nhiên, sau 24 GSTN thì hiệu quả của các loại dịch trích giảm dần. Trong điều kiện phòng thí nghiệm việc xử lý với dịch trích thực