Methyl hóa HpaII

Một phần của tài liệu đề tài modifying enzymes (Trang 41 - 43)

Methyl hóa HpaII, còn được gọi là S-adenosyl-L-methionine: DNA (cytosine-5)-methyltransferase (EC 2.1.1.37) [9037-42-7], được lấy từ Haemophilus parainfluenzae.

Thuộc tính methyl hóa HpaII được phân lập từ H. parainfluenzae chứa methyl hóa cúm gia cầm là tốt [1885], [1886]. Methyl hóa dịch cúm gia cầm hoạt động trên DNA sợi đôi bằng cách chuyển nhóm methyl từ S adenosylmethionine để địa điểm nhận dạng xuôi ngược

5’ CCGG 3’

3’GGCC 5’

Kết quả là 5-methyl hóa trong cả hai của cytosines [1885], [1887].

Một đơn vị của methyl hóa HpaII được định nghĩa là hoạt động của enzyme cần thiết để bảo vệ 1 mg lDNA đến> 95% so với phân cắt bởi HpaII endonuclease giới hạn trong 1 giờ ở 37 8C [1885]. Sợi đơn DNA được methyl hóa bởi methyl hóa HpaII có hiệu quả rất thấp. Tuy nhiên, methyl hóa HpaII có khả năng Methyl hóa trình tự nhận biết hemimethylated [2011]. Kể từ khi các cation hóa trị hai như Mg2 + là không cần thiết cho hoạt động của nó, methyl hóa DNA với methyl hóa HpaII có thể được thực hiện trong sự hiện diện của axit Ethylenediaminetetraacetic. Methyl hóa vùng cụ thể của DNA bởi methyl hóa HpaII bảo vệ DNA chống lại phân hủy bởi endonuclease HpaII giới hạn trình tự tương đồng tetrameric CCGG [1888]. Tuy nhiên, hoạt động của enzyme giới hạn endonuclease MspI, một isoschizomer của HpaII, không bị ảnh hưởng bởi dư lượng methyl hóa CCGG với methyl hóa HpaII vì MspI chỉ nhạy cảm với methyl hóa của dư lượng cytosine bên ngoài [1889], [1890]. Ngoài ra, hoạt động của SmaI giới hạn endonuclease có vị trí nhận

biết CCCGGG là một tập hợp các điểm HpaII, cũng bị ức chế bởi methyl hóa dư lượng cytosine bên trong với methyl hóa HpaII. Ngược lại, hoạt động của XmaI methyl hóa.

TÀI LIỆU THAM KHẢO

[1] Enzymes in Industry Production and Applications _Edited by Wolfgang Aehle _Third, Completely Revised Edition. [2] Thuật ngữ sinh học Anh – Việt_Mai Đình Yên, Vũ Văn Vụ, Đình Lương_Hà Nội – 2006.

Một phần của tài liệu đề tài modifying enzymes (Trang 41 - 43)

Tải bản đầy đủ (DOCX)

(43 trang)
w