Thí nghiệm được tiến hành nuôi cấy trên môi trường cơ bản MS bổ sung chất
điều hòa sinh trưởng.
Môi trường cơ bản (MS):Muối đa lượng, vi lượng, vitamin, axit amin theo Murashige and Skoog (Murashige and Skoog, 1962).
Mục đích thí nghiệm: Xác định nồng độ NAA kết hợp với BAP thích hợp trong môi trường nuôi cấy in vitro cho tạo cây hoàn chỉnh của các giống cây có múi khác nhau và ảnh hưởng của các kiểu gen khác nhau đối với tạo chồi in vitro.
Nghiên cứu ảnh hưởng của các nồng độ NAA kết hợp với BAP phát triển chồi và ra rễ của các kiểu gen cây có múi khác nhau trong nuôi cấy in vitro, các mẫu mắt ngủ sau khi bật chồi trên môi trường tạo chồi sẽ được cấy chuyển sang bình môi trường nuôi cấy với 6 công thức thí nghiệm và 3 lần lặp lại mỗi công thức thí nghiệm 3 bình:
- Công thức 1: Được xác định trên thí nghiệm 3.3.2
MS + 30g đường Sacharosse/l + 6g Agar/l + 0 mg NAA/l+ BAP - Công thức 2: Được xác định trên thí nghiệm 3.3.2
MS + 30g đường Sacharose/l + 6g Agar/l +0,5 mg/l NAA+ BAP - Công thức 3: Được xác định trên thí nghiệm 3.3.2
MS + 30g đường Sacharose/l + 6g Agar/l + 1 mg NAA/l + BAP - Công thức 4: Được xác định trên thí nghiệm 3.3.2
MS + 30g đường Sacharose/l + 6g Agar/l + 2mg NAA/l+ BAP - Công thức 5: Được xác định trên thí nghiệm 3.3.2
MS + 30g đường Sacharose/l + 6g Agar/l +3mg NAA/l+ BAP - Công thức 6: Được xác định trên thí nghiệm 3.3.2
MS + 30g đường Sacharose/l + 6g Agar/l +5mg NAA/l+ BAP
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 32
Phòng nuôi cấy: nhiệt độ phòng 25oC -27oC, cường độ ánh sáng 2400- 3000lux, độẩm < 70% .
Thời gian chiếu sáng: 8h - 12h/24h.
Các dụng cụ buồng cấy được khử trùng bằng cồn và nhiệt.
Độ pH của môi trường: 5,6 – 5,8
+ Các chỉ tiêu theo dõi : Tỷ lệ kéo dài chồi và tỷ lệ ra rễ