Theo nghiên cứu trước đây (Vũ Đình Giáp & cs, 2015). Chủng nấm A. Pullulans được lên men dưới điều kiện lắc 200 vòng/phút trong 24 ngày ở 25oC trên 6 cơ chất: cà chua (CC), đậu tương (ĐT), rơm rạ (RR); mùn gỗ (MG); bã ngô (BN). Tác giả nhận thấy chủng A. pullulans sinh tổng hợp acetyl esterase mạnh trên môi trường bổ sung các cơ chất như rơm, khoai tây, đỗ tương và mùn gỗ với hoạt tính enzyme cao nhất trong thời gian nuôi cấy là từ 347 UL-1 (trên môi trường cơ chất bã ngô) đến 1025 UL-1 (trên môi trường cơ chất rơm). Ở tất cả các môi trường này sự sinh tổng hợp enzyme của nấm bắt đầu ngay sau 3 ngày nuôi cấy và sinh tổng hợp mạnh sau từ ngày thứ 12. Tuy nhiên hoạt tính cao nhất ở mỗi môi trường là khác nhau, theo đó hoạt tính enzyme cao nhất thu được sau ngày nuôi cấy thứ 12 đối với cơ chất bã ngô và đậu tương, trong khi ở môi trường có cơ chất cà chua, khoai tây và mùn gỗ ở ngày 15-18 và rơm ở ngày thứ 21.
Do vậy trong nghiên cứu này chúng tôi tiến hành lên men chủng A. pullulans sử dụng cơ chất là rơm để tiến hành thu dịch lên men để phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ cũng như pH lên quá trình sinh tổng hợp enzyme. Kết quả nhận thấy chủng A. pullulans
sinh tổng hợpenzyme bắt đầu từ ngày thứ 3 (213,6 UL-1) và hoạt tính enzyme tăng cao từ ngày thứ 12 (Hình 8) và hoạt tính đạt cực đại ở ngày thứ 21 (989,73 UL-1) sau đó hoạt tính giảm dần sau ngày thứ 24 (805,6 UL-1) của quá trình lên men. Như vậy, trong nghiên cứu này kết quả là tương đồng so với nghiên cứu trước đó.
Nguyễn Hà Bích Huyền 30 CNSH 12-02
Hình 8: Động học sinh tổng hợp acetyl esterase của nấm Aureobasidium pullulans var. namibiae trên môi trường sử dụng cơ chất rơm Theo nghiên cứu này hoạt tính enzyme acetyl esterase A. pullulans cao hơn rất nhiều so với chủng Xylaria polymorpha (X. polymorpha) mà tác giả Đỗ Hữu Nghị & cs, (2015) đã nghiên cứu, theo đó hoạt tính acetyl esterase là 989,73 UL-1 của nấm A. pullulans lớn hơn so với chủng X. polymorpha là 93.5 UL-1 ở cùng điều kiện lên men dịch thể; số liệu đã được đăng trên tạp chí
Journal of The Korean Society for Applied Biological Chemistry, JKSABC, 2015.
Ngoài ra, enzyme này từ một số loài Nấm đảm (Basidiomycetes) cũng đã được nghiên cứu. Tsujiyama & Nakano (1996) công bố khả năng sinh acetyl esterase từ nấm mục gỗ Coriolus versicolor (C. versicolor) trên môi trường có cơ chất mùn gỗ. Thời gian lên men để sinh tổng hợp acetyl esterase của chủng này lâu hơn nhiều so với chủng A. pullulans (sinh enzyme mạnh sau 12 ngày nuôi cấy so với 6 tuần ở chủng C. versicolor).
Như vậy, qua kết quả nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp enzyme acetyl esterase bởi nấm A.pullulans cho thấy đây là chủng rất tiềm năng với hoạt tính enzyme cao và thời gian lên men sinh tổng hợp ngắn.
Đây là cơ sở để chúng tôi tập trung nghiên cứu các điều kiện khác ảnh hưởng tới quá trình lên men là nhiệt độ và pH.
Nguyễn Hà Bích Huyền 31 CNSH 12-02