M: luçfng duofc liêu dem cân.
x: dơ âm cüa duçrc liêu.
3.1.1.6 Phân lâp flavonoid trong cây Giao co lam bàng sac kÿ cơt
- Cơt thüy tinh co duong kmh 2,4 cm, chiêu dài 40 cm. Chat nhơi cơt là Silicagel 60 (MERCK) cơ hat 0,015-0,040 mm.
- Nap Silicagel vào cơt theo phuong phâp nhơi cơt uơt.
- Dùng dung mơi chloroform và tâng dan dơ phân eue bàng metanol dé ma giâi.
- Hüng dich nia giâi lân luçrt vào câc ơ'ng nghiêm nhơ dâ duoc dânh sơ'. Kiëm tra dich rüa giâi bàng SKLM vơi hê dung mơi Toluen: EtOAc : HCOOH [5:6:1 ]. Gơp câc ơ'ng cơ cùng mơt vêt. Sau dơ dé bay hoi tu nhiên thu duoc cân. Kê't tinh lai nhiêu lân thu duoc dang tinh thé hỵnh kim (hinh 3.7, 3.8, 3.9).
Kê't quâ: thu duoc 3 châ't tinh khiê't kÿ hiêu là HG, tuong üng vơi vêt sơ' 1 và HG2 tuong üng vơi vêt sơ' 3 trong sàc dơ flavonoid tồn phân (hỵnh 3.3), HG3 ơ vj tri gan vơi vêt sơ' 5 trong sac dơ flavonoid tồn phân (hỵnh 3.4).
Kiém tra dơ tinh khiê't cüa HG, bàng sàc kÿ lơp mơng vơi 3 hê dung mơi: hê I, hê II, hê IV dêu cho mơt vêt. Kê't quâ thë hiên ơ bàng 3.3 và ânh sàc dơ ơ hỵnh 3.5. Chüng tơ HG, dat dơ tinh khiê't cân thiê't.
Kiëm tra dơ tinh khiê't cûa HG2 bàng sàc kÿ lơp mơng vơi 3 hê dung mơi: hê I, hê II, hê III dêu cho mơt vêt. Kê't quâ thë hiên ơ bâng 3.3 và ânh sac dơ ơ hỵnh 3.6. Chüng tơ HG2 dat dơ tinh khiê't cân thiê't.
Bâng 3.3 Kiém tra dơ tinh khiét cüa HG, và HG2 bàng SKLM
STT Tinh thë Rf Màu sac Hê I Hê II Hê III Hê IV As thuơng A lCL3/as thuơng AICI3/UV 1 HG, 0,06 0,51 0,57 Vàng Vàng Vàng sâng
Hinh 3.2 Sâc dơ Hinh 3.3 Vi tri HG,(1) và HG2(2) Hinh 3.4 Vi tri flavonoid tồn trong sâc dơ flavonoid tồn phân HG3 (hê I, thuơ'c
phàn trong lâ( 1 ) và thü FeCL)
thân(2)
Hỵnh 3.5 Sâc dơ cüa HG, trong 3 hê dung mơi
Hỵnh 3.6 Sâc dơ cüa HG2 trong 3 hê dung mơi