- Dùng công thức C1V1 = C2V2 để lượng dung môi hòa tan (thường
200 pmol protein P trộn với lượng tăng dần (0 đến 500 ng) của protein Q Các hỗn hợp này thu
đến 500 ng) của protein Q. Các hỗn hợp này thu
được được phân tách bởi gel 10%
polyacrylamide. Gel được nhuộm bằng
Coomassie blue và thu được như bên. Hãy tính
Phân tích các đề thi thực hành “Sinh
PTN Hóa sinh học học và Sinh học
Coomassie blue và thu được như bên. Hãy tính
tỉ số (RATIO) mol liên kết của protein P và Q? (5 điểm).
Trả lời: P : Q = 1 : 2 (hoặc 1/2)
Diễn giải: Tất cả P (200 pmol) sẽ liên kết với Q ở nồng độ Q = 400 ng = 400.000 pg = (400.000/1000 =) 400 pmol; vậy tỉ số liên kết P : Q = 200 pmol : 400 pmol = 1 : 2.
Kỹ năng diễn giải kết quả thí nghiệm
với này chuyển Cho 0 thu % bằng tính
Sinh học tế bào” IBO 2011 (Taiwan)
học tế bào tính Q? Q = kết nghiệm
CÂU 2.1 (10 điểm) Hãy tính các nồng độ của
các ô còn trống trong bảng của phiếu trả lời (5 điểm Dùng các giá trị này để xây dựng đường chuẩn bình sau 2 lần lặp lại (trục Y). Vẽ đường chuẩn
Trả lời:
Bài 2. Định lượng protein
Vật liệu Vị
Phân tích các đề thi thực hành “Sinh
PTN Hóa sinh học học và Sinh học
Kỹ năng thiết kế thí nghiệm (pha loãng
Vật liệu
A1 & B1 A2 & B2 0.5 mg/mL BSA (µL) 0 2
H2O (µL) 10 8
Nồng độ BSA sau khi pha
loãng (mg/mL) 0
của BSA trong mỗi mẫu chuẩn (10 µL) và điền vào
điểm).
chuẩn nồng độ BSA (trục X) và giá trị hấp thụ trung vào Phiếu trả lời (5 điểm).
Vị trí giếng trên khay thử ELISA
Sinh học tế bào” IBO 2011 (Taiwan)
học tế bào
loãng dung dịch)
A3 & B3 A4 & B4 A5 & B5 A6 & B6
4 6 8 10
CÂU 2.1 (10 điểm) Hãy tính các nồng độ của BSA trong mỗi mẫu chuẩn (10
µL) và điền vào các ô còn trống trong
bảng của phiếu trả lời (5 điểm).
Dùng các giá trị này để xây dựng đường chuẩn nồng độ BSA (trục X) và giá trị hấp thụ trung bình sau 2 lần lặp lại (trục Y). Vẽ đường chuẩn vào
Phân tích các đề thi thực hành “Sinh
PTN Hóa sinh học học và Sinh học
lại (trục Y). Vẽ đường chuẩn vào Phiếu trả lời (5 điểm).
Kỹ năng thu thập và biểu diễn số liệu thí nghiệm
2 μl 0.452
Sinh học tế bào” IBO 2011 (Taiwan)
học tế bào
CÂU 2.2 (12 điểm) Chọn các điểm mẫu
của dung dịch X và Y và điền rồi bảng trong
Trả lời:
Dung dịch X
Thể tích mẫu (µL) 2
Phân tích các đề thi thực hành “Sinh
PTN Hóa sinh học học và Sinh học
Kỹ năng thực hiện thí nghiệm
Thể tích mẫu (µL) 2 4 6
H2O (µL) 8 6 4
Mật độ quang OD595
nm 0,859
mẫu pha loãng tốt nhất từ mỗi dãy pha loãng trong Phiếu trả lời.
X Dung dịch Y
4 6 8 10
Sinh học tế bào” IBO 2011 (Taiwan)
học tế bào
8 10 2 4 6 8 10
2 0 8 6 4 2 0
CÂU 2.3 (8 điểm) Dựa vào các điểm
nồng độ của 2 dung dịch gốc (X và Y) của độ được biểu thị bằng đơn vị mg/mL. Viết
Trả lời:
Nồng độ của X (mg/mL)
Nồng độ của Y (mg/mL)
Phân tích các đề thi thực hành “Sinh
PTN Hóa sinh học học và Sinh học
Kỹ năng thu thập, xử lý số liệu thí nghiệm
2.0(1.6-2.4) (1.6-2.4)
0.26(0.21-0.31) (0.21-0.31)
dung dịch tốt nhất mà em đã chọn, tính của enzym E từ đường chuẩn BSA. Nồng Viết câu trả lời vào Phiếu trả lời..
Sinh học tế bào” IBO 2011 (Taiwan)
học tế bào
CÂU 3.1 (7 điểm) Đánh dấu (X) vào ống có sự thay đổi màu đậm nhất vào phiếu trả lời. Đệm nào (A hay B) được dùng để chiết rút protein?
Phân tích các đề thi thực hành “Sinh
PTN Hóa sinh học học và Sinh học
Bài 3. Tinh sạch protein
Ống A1 A2 A3 B1 B2 B3
Kỹ năng thực hiện thí nghiệm
Ống A1 A2 A3 B1 B2 B3 Thay đổi mầu nhiều nhất X
Sinh học tế bào” IBO 2011 (Taiwan)
học tế bào Bể chứa dung dịch đệm chiết rút Mẫu Cột sắc ký
Các phân đoạn được thu theo thời gian
Đệm
A B
X
Kỹ năng diễn giải kết quả thí nghiệm
CÂU 3.2. (5 điểm) Enzym A có điện tích A có thể chiết rút được bằng sắc ký trao ion dương cao. Enzym A có đặc điểm về