- Với CA: tương tự lấy phổ các dung dịch hỗn hợp chuẩn chia cho phổ hấp thụ của NB 15 |ag/mL để xây dựng phổ tỷ đối Phổ tỷ đối thu được như hình 2.3, bước
2.2.3. Phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm:
2.2.3.1. Xác định bước sĩng định lượng:
Từ các phổ hấp thụ của các dung dịch chuẩn đơn thành phần và hỗn hợp, xây dựng các phổ đạo hàm bậc 1 và bậc 2.
Ở PĐH bậc 1, tại các bước sĩng 245 nm và 273 nm thành phần CA cĩ giá trị PĐH bằng 0. Cho nên tại đĩ, giá trị PĐH của dung dịch chỉ phụ thuộc vào nồng độ NB mà khơng bị ảnh hưởng bởi CA. Điều đĩ được chứng minh trên hình
2.6. Các phổ đạo hàm bậc 1 của 4 dung dịch cĩ cùng nồng độ NB nhưng khác nhau về nồng độ CA cắt nhau tại 2 điểm tương ứng với 2 bước sĩng là 245 nm và 273 nm. Vì vậy, ta cĩ thể định lượng NB bằng phổ đạo hàm bậc 1 tại một trong hai bước sĩng đĩ.
Hình 2.6 - Phổ đạo hàm bậc 1 của 4 dung dịch cĩ cùng nồng độ NB nhưng cĩ nồng độ CA khác nhau.
Tương tự ởPĐH bậc 2, tại các bước sĩng 275,8 nm và 280 nm thành phần NB cĩ giá trị PĐH bằng 0. Cho nên tại đĩ, giá trị PĐH của dung dịch khơng bị ảnh hưởng bời NB mà chỉ phụ thuộc vào nồng độ CA. Điều đĩ được chứng minh trên hình 2.7. 0.0030 0.0020 000 -0.0020 -0.0030 273.0 ---— ĩ... ... ... ỉ... ... ....— ... ịy' ... —_____i 1....... .... 275.0 285.0
Hình 2.7 - Phổ đạo hàm bậc 2 của 4 dung dịch cĩ cùng nồng độ CA nhưng cĩ nồng độ NB khác nhau. f Jf,,
Cả 4 PĐH bậc 2 trên cắt nhau tại điểm tương ứng vĩi bước sĩng 280 nm. Cịn tại điểm 275,8 nm các dải phổ cắt nhau khơng thật rõ ràng trên thực nghiệm. Do vậy chỉ nên tiến hành định lượng CA tại bước sĩng 280 nm.