hấp thụ tử ngoại - khả kiến.
Từ kết quả khảo sát phép định tính Palmatin clorid bằng đo quang phổ hấp thụ tử ngoại - khả kiến (mục 2.2.23) cho thấy: Palmatin clorid có khả
năng hấp thụ ánh sáng tử ngoại - khả kiến tốt, phổ hấp thụ của Palmatin clorid cho các pic rõ ràng trong các dung môi đo. Để tiến hành khảo sát chúng tôi đặt ra các mục tiêu:
- Chọn dung môi đo - Chọn bước sóng đo - Xây dựng phương pháp - Đánh giá phương pháp
a. Chọn dung môi đo.
Các dung môi đươc dùng đê xác đinh phô CU3. P3.lrn3.tin clond lâ cthânol tuyệt đối methanol và dung dịch acid sulfuric 2%. Trong các dung dịch Palmatin clorid bền vững, ít biến đổi tuy nhiên màu sắc của dung dịch phụ thuôc nhiều vào pH dung dich do đó ảnh hưởng đên độ hâp thụ. Đê lam ro sự ảnh hưởng của pH tới độ hấp thụ tôi pha một loạt dung dịch Palmatin clorid chuẩn trong nước có pH tăng dần (bằng cách sử dụng dung dịch Natri hydroxyd 10% và Acid sulfuric 10%) với cùng một nồng độ Pdlmatin clorid là 0 001%. Đem quét phổ để xác định cực đại; chọn một cực đại tại 345nm. Đo độ hấp thụ của các dung dịch tại cực đại này, có kết quả sau:
pH 4,5 5,1 5,8 6,2 6,4 6,8 7,2 7,4 7,9 8,3 8,6 Độ hấp
thụ
0,636 0,636 0,637 0,639 0,635 0,670 0,710 0,731 0,733 0,750 0,752
Từ kết quả trên thấy rằng:
- ở vùng có pH acid, đô hấp thu CU3. Pâlmatin clond Ít bien đôi.
- Khi pH tăng đến vùng pH kiềm thì độ hấp thụ tăng và không tỉ lệ thuận với sự tăng pH.
Như vậy dung môi đo phải đảm bảo pH ổn định và tốt hơn là ở vùng acid. Với phân tích trên đây, chúng tôi chọn dung môi acid sulfuric 2%, bởi lẽ: dung môi này tao ra pH ổn đinh ở vùng acid, ít bay hơi hơn ethanol va methanoỉ.
b. Chọn bước sống đo.
Quang phổ hấp thụ của Palmatin clorid trong dung môi acid sulfuric 2% có các cực đại đạt tại: 225nm, 270nm, 345nm, và 421nm. Nhận thấy tại cực đại 345nm, phổ của Palmatin clorid pic hẹp, gọn, độ lệch với cực đại gần đó của phổ Berberin clorid là 3nm. Mặt khác tại bước sóng 345nm, phổ của Jatrorhizin clorid (là tạp chính trong chế phẩm) ở gần giá trị cực tiểu. Do đó chúng tôi chọn bước sóng 345nm để khảo sát phương pháp định lượng đo quang.
c. Xây dựng phương pháp.
Để phương pháp định lượng đo quang cho kết quả chính xác, nồng độ dung dịch đem đo quang phải có giá trị sao cho giá trị của độ hấp thụ ở trong khoảng 0,2 - 0,6. Để xác định nồng độ đó, chúng tôi pha 1 loạt dung dịch Palmatin clorid chuẩn với nồng độ giảm dần rồi đem đo độ hấp thụ ở bước sóng 345nm. Kết quả: Nồng độ % 0,01 0,004 0,002 0,001 0,0005 0,0004 Độ hấp thụ Không xác định được 2,552 1,272 0,637 0,320 0,256
Từ bảng, tôi chọn nồng độ dung dịch dùng để đo quang trong phép định lượng là khoảng 0,0005% - 0,001%.
Từ những kết quả và nhận định trên đây, chúng tôi xây dựng các bước tiến hành định lượng như sau: Cân chính xác một lượng bột Palmatin clorid. Khoảng 0,1000g cho vào 1 bình định mức 100ml, thêm dung môi là dung dịch acid sulfuric 2% vào bình, lắc kỹ cho tan, thêm tiếp dung môi cho đến vạch (dung dịch 1). Dùng pipet chính xác 5ml, hút 5ml dung dịch 1 cho vào bình định mức 100ml, thêm dung môi vừa đến vạch, lắc đều (dung dịch 2). Dùng pipet chính xác hút 10ml dung dịch 2 cho vào bình định mức 100ml. Thêm dung môi vừa đến vạch, lắc đều (dung dịch 3).
Song song, tiến hành như trên với một mẫu Palmatin clorid chuẩn đã biết hàm lượng. Đo độ hấp thụ của các dung dịch 3 của mẫu thử và mẫu chuẩn ở bước sóng 345nm với cuvet dày lem.
* Cách tính k ế t Quả:
Gọi mlh: khối lượng mẫu thử đã cân (g) mch: khối lượng mẫu chuẩn đã cân (g)
Q : Nồng độ dung dịch thử đem đo quang (%) C0: Nồng độ dung dịch chuẩn đem đo quang (%) Ath: Độ hấp thụ của dung dịch thử
Ach: Độ hấp thụ của dung dịch chuẩn
c% : Hàm lượng Palmatin clorid trong mẫu thử Cch: Hàm lượng Palmatin clorid trong mẫu chuẩn Theo định luật Lambert - Beer có: