II.1. Phơng pháp pha hoá chất:
- Dung dịch Đimêtylglyoxim:
Hoà tan Đimêtylglyoxim trong rợu etylic, thêm vào vài giọt NH3. - Dung dịch 1 - Nitroso - 2- Naphtol:
Hoà tan 1 - Nitroso - 2- Naphtol trong axit axetic 50% rồi thêm vào đó dung dịch CH3COONa, đung nóng.
- Dung dịch gốc CoSO4:
Hoà tan 0,26g CoSO4 trong một lít nớc cất 2 lần ta đợc dung dịch chứa 0,1 g Co/lit.
- Dung dịch gốc NiSO4.6H2O:
Hoà tan 0,45 g NiSO4.6H2O trong 1 lít nớc cất 2 lần, ta đợc dung dịch chứa 0,1 g Ni/lit.
- Pha chế mẫu:
Lấy 10ml dung dịch CoSO4 + 8 ml dung dịch NiSO4 . 6 H2O cho vào bình định mức 100ml, thêm nớc cất 2 lần đến vạch (chú ý : vừa thêm nớc cất vừa lắc cho hỗn hợp trộn đều) ta đợc mẫu phân tích chứa (10mg Co + 8mg Ni)/lit.
- Pha chế dung môi :
Lấy 9ml axêtôn + 5ml H2O + 4,5ml HCl cho vào bình tam giác, lắc đều, đậy kín.
I. 2. Phơng pháp chọn dung môi .
- Khi chọn dung môi, chúng tôi đã chú ý những vấn đề sau: + Dung môi hoà tan tơng đối tốt tất cả các cấu tử phân tích + Bị hấp phụ tối thiểu trên pha tĩnh (chất hấp phụ).
+ Không phản ứng hoá học với chất tan cũng nh chất hấp phụ. + Độ bay hơi, độ nhớt
+ Sự phân lớp (đặc biệt khi dùng hỗn hợp dung môi). + Dung môi phải tinh khiết.
- Dựa vào quy tắc chọn dung môi nh phần lý thuyết đã trình bày và trên cơ sở những điều cần chú ý trên. Chúng tôi tiến hành thử nghiệm những dung môi khác nhau:
+ Hỗn hợp dung môi (NH3 + NH4NO3 + CH3OH + H2O). + Hỗn hợp dung môi (CH3COCH3 + H2O + HCl).
- Để hiện đợc vết tròn, đẹp theo đúng yêu cầu. Ta phải chọn tỷ lệ dung môi thích hợp. Vì vậy trong quá trình thực nghiệm, chúng tôi đã lần lợt thay đổi tỷ lệ của 2 dung môi nói trên. Kết quả, chúng tôi đã chọn cho mình hệ dung môi với tỷ lệ thích hợp nh sau:
Axêtôn - nớc - axit clohyđric: 9 : 5 : 4,5
II.3. Phơng pháp chọn thuốc thử .
- Muốn hiện Co2+ và Ni2+ trên một sắc đồ, ta phải dùng thuốc hiện chung và phải soi dới đèn UV. Do điều kiện phòng thí nghiệm nên tôi chọn phơng pháp hiện từng chất riêng biệt trên 2 bản mỏng giống nhau, điều kiện chuẩn bị và thời gian tiến hành đều nh nhau để phân tích hỗn hợp.
- Để thử, chúng tôi cắt những bản mỏng nhỏ (2 x 5cm), tiến hành sắc ký và thử thuốc thử định tính đối với từng chất riêng biệt nh đã trình bày trong mục I.2. Và quá trình tiến hành thực nghiệm nh sau:
+ Tiến hành sắc ký mẫu phân tích.
+ Cho thuốc thử vào bình phun, phun để hiện sắc đồ * Thuốc thử:
+ Thử lần lợt các dung dịch: NaOH, NH4OH, H2S, KSCN, (NH4)2[Hg(SCN)4], 1-Nitroso 2-Naphtol đối với Co2+.
+ Với Ni2+: Thử lần lợt các dung dịch: NaOH, H2S, NH4OH, Đimêtylglyoxim.
* Để giảm bớt chi phí bản mỏng cho quá trình chọn thuốc thử, chúng tôi tiến hành nh sau:
Lấy 2 ml dung dịch mẫu phân tích cho vào ống nghiệm, thêm vào đó vài giọt dung dịch thuốc hiện.
+ Phản ứng nào có độ nhạy lớn, chúng tôi chọn để hiện sắc đồ.
+ Sau khi phun thuốc hiện, chúng tôi đợc sắc đồ tơng ứng với mỗi loại thuốc thử.
* Kết quả chúng tôi đã chọn đợc thuốc hiện nh sau:
Ni2+ : Dùng dung dịch đimêtyl glyoxim trong môi trờng kiềm Co2+ : Dùng dung dịch 1 - nitroso - 2 naphtol
II.4. Phơng pháp chọn bản mỏng:
Hiện nay trên thị trờng có bán các bản mỏng Silicagen tráng sẵn cho sắc ký lớp mỏng với kích thớc và bề dày khác nhau, những bản này rất thuận lợi và tốt.
Trong luận văn này, để đảm bảo độ chính xác, nên chúng tôi chọn bản mỏng tráng sẵn. Nhng chúng tôi cũng đã thử tự tạo cho mình một bản mỏng theo ý muốn bằng những cách sau:
II.4.1. Chọn bản:
Bản mỏng tự tráng thờng dùng bản là kính với u điểm là dễ kiếm và rẻ tiền.
- Kính có nhiều cớ theo yêu cầu: + 2 x 10 cm (dùng thử sơ bộ)
+ 5 x 10 cm, 5 x 15 cm : thờng dùng
+ 10 x 10 cm, 15 x 15 cm : dùng sắc ký 2 chiều và dùng để tách vết trên lớp mỏng.
- Chọn kính tốt, chịu nhiệt và cùng độ dày (2-3 mm). Trớc khi tráng kính phải rửa sạch bằng xà phòng, phải phơi hoặc sấy khô.
- Cách tráng kính : có nhiều cách bằng máy hoặc bằng tay.
II.4.2. Đa lớp mỏng chất hấp phụ lên bảng:
Có 4 phơng pháp để điều chế lớp mỏng dính: Trát vữa (quệt), tới vữa (huyền phù), nhúng bản vào vữa, phun vữa lên bản. Phổ biến nhất là phơng pháp trát không và dùng thiết bị đặc biệt.
a. Phơng pháp không dùng thiết bị:
Dùng thìa đáy bằng hoặc dùng đũa thuỷ tinh làm thành một viền nhỏ vữa xung quanh bản kính, sau đó đổ vữa còn lại vào giữa bản và dùng thìa hoặc đũa thuỷ tinh đó san bằng, để bản kính lên lòng bàn tay nghiêng đi nghiêng lại và rung nhẹ để cho lớp mỏng thật đều. Sau đó đặt bản lên một mặt bàn thật bằng (kiểm tra bằng ống thăng bằng). Tất cả các động tác này làm càng nhanh càng tốt.
b. Phơng pháp dùng thiết bị:
Trong các máy rải, phổ biến nhất là máy kiểu Stall Việc tiến hành rải qua 3 giai đoạn:
+ Sắp xếp các phiến và chuẩn bị máy rải
+ Chế một dung dịch keo của chất cần rải và cho vào máy rải + Rải trên những phiến.
II.4.3. Xử lý những bản đã rải:
* Sấy khô :
Ta để nguyên những phiến tại chỗ tới khi nào mặt trên hết bóng (khoảng 10 phút). Cách tốt nhất là để cho khô một đêm ngoài không khí, với cách này những lớp mỏng dính rất chặt vào kính. Đối với nhiều công trình, loại kính này có thể dùng đợc.
* Hoạt hoá:
Cho các phiến vào tủ sấy sau khi lớp mỏng đã se lại, nghĩa là khi bề mặt hết bóng. Nhiệt độ và thời gian sấy tuỳ thuộc vào hoạt độ muốn chọn. Sấy 30 phút ở 1050C thì đợc một hoạt độ đại khái tơng ứng với hoạt độ của
nhôm ôxit trung tính đã tiêu chuẩn hoá. Sấy lâu hơn ở nhiệt độn cao hơn thì đợc những lớp mỏng hoạt tính cao hơn.
* Bảo quản:
Vì các phiến hoạt hoá dễ mất hoạt tính trong không khí ẩm nên ngời ta bảo quản chúng trong bình hút ẩm đờng kính 30cm hay trong một cái tủ xếp phiến có chứa sẵn trong chất hút ẩm. Vì lẽ đó, vòi của bình hút ẩm cũng có một ống chứa Silicagen xanh. Tất nhiên còn phải tìm mọi cách bảo vệ các phiến kính khỏi bị các loại khí trong thí nghiệm và h hại do va chạm.
II.4.4. Kiểm tra các phiến Silicagen:
Những lớp mỏng phải thể hiện sự đồng nhất khi soi hoặc nhìn từ trên xuống. Bề mặt phải nhẵn và không đợc có hạt quá cỡ. Độ dính phải đạt tới mức khi lấy ngón tay quệt nhẹ thì lớp mỏng không bị suy suyển đáng kể.
Để khoanh rõ lớp mỏng, ta có thể gạt bỏ một dải rộng 2mm, ở các cạnh xung quanh bằng một dao quẹt hoặc dùng ngón tay trỏ và ngón tay cái.
II.5. Phơng pháp chọn bình khai triển:
Những bình khai triển phần nhiều là những bình bằng thuỷ tinh hình hộp hay hình trụ. Loại hình hộp thích hợp với những phiến 20x20 cm. Cũng có thể dùng những ắc quy có nắp mài hay những bình dùng để bảo quản những tiêu bản giải phẫu. Những lọ đựng mứt, có đệm cao su kín thích hợp với những phiến hẹp. Trong đa số trờng hợp các bình phải đợc đậy kín. Tuy nhiên, cũng có thể dùng bình hở nh Bêse chẳng hạn, nếu là lớp trao đổi ion.
Nhìn chung bình khai triển yêu cầu phải: + Kín
+ Đáy bằng và không rộng lắm (tránh hao dung môi).
+ Có giấy lọc dùng bão hoà dung môi trong bình (giảm thời gian khai triển)
+ Trong quá trình khai triển, không di động bình, đặt bình vào nơi kín gió.
+ Đong dung môi đúng tỷ lệ đã định và trộn thật nhiều trớc khi rót vào bình.
* ở đây do dùng bản mỏng loại nhỏ để sắc ký đi lên nên tôi chọn bình khai triển là cốc thuỷ tinh trong suốt, loại nhỏ, đáy nhỏ có bán trên thị trờng với giá rẻ.
II.6. Xây dựng quy trình thực nghiệm:
Qua phần tổng quan các phơng pháp xác định hỗn hợp Niken, Coban. Qua một số vấn đề khi áp dụng phơng pháp sắc ký lớp mỏng để tách hỗn hợp Niken, Coban và căn cứ vào thực tế của phòng thí nghiệm, chúng tôi chọn quy trình phân tích lợng nhỏ 2 nguyên tố đó trên bản mỏng nh sau:
* B
ớc 1: Chuẩn bị bản mỏng
Trong bớc này, chúng tôi đã chọn bản mỏng tráng sẵn. Vì vậy tuỳ thuộc vào thực tế thí nghiệm mà cắt bản mỏng cho phù hợp.
* B
ớc 2: Chấm chất phân tích
Yêu cầu:
- Vết chấm phải nhỏ và đều nhau
- Lợng chất phải đồng nhau giữa các vết chấm. - Chia quảng cách đều nhau (cách nhau 1cm).
Muốn vậy chúng tôi đã dùng xiranh để chấm các chất phân tích, lợng chấm có thể điều chỉnh đợc. Khi chấm đặt bản trên một mặt phẳng và dùng máy sấy, sấy khô.
* B ớc 3: Khai triển bằng dung môi * ớc 4:B Hiện vết
* ớc 5:B Ghi kết quả
Trong trờng hợp này tôi dùng cách là chụp ảnh để lu lại và tính giá trị Rf .
*B ớc 6: Định lợng