2.5.1. Chuẩn bị nhựa và cột:
y Anionit (Dovvex 2): được chuyển thành dạng acetat bằng cách rửa nhựa trên cột với dung dịch natri acetat 3N, cho tới khi nước chảy ra khỏi cột không còn chứa ion c r (không còn chứa tủa trắng với AgNOg). Sau đó anionit được rửa bằng nước cất cho tới khi nuớc chảy ra không còn chứa natri acetat (không cho màu đỏ với FeCl3)
> Cationit (Dowex 50): được chuyển lúc đầu thành dạng muối natri bằng cách ngâm một đêm với dung dịch NaOH 2N. Sau đó rửa cationit bằng nước cất tới trung hoà, rồi chuyển nhựa trở lại dạng acid bằng cách xử lý
nhựa với 1 thể tích HCl 4N, rồi lần lượt với 6 thể tích HCl 2N, HCl IN và nước cất tới trung tính.
Những ống nhựa có kích thước 0,7 X 30 cm được chọn để làm cột đựng nhựa. Đặt ở phần dưới cột 1 lớp đệm bằng bông thuỷ tinh, rồi cho nhựa vào cột đủ để có một lófp dày 2,0 ± 01 cm. Điều chỉnh tốc độ chảy dung dịch qua cột nhựa vào
khoảng 3ml/ 10 phút (6 giọt / phút).
2.5.2. Cách láy mẫu:
Lấy nước tiểu bãi của 9 người dân sống trong nội thành Hà Nội đựng vào lọ nhựa đã được rửa sạch trước khi dùng.
Lấy nước tiểu bãi của 30 học sinh sống tại một làng nghề thuộc tỉnh Hưng Yên đựng vào lọ nhựa đã được rửa sạch trước khi dùng.
2.5.3.Bảo quản mẫu:
Việc bảo quản mẫu để xác định hàm lượng ỏ - ALA có trong nước tiểu là rất quan trọng. Nếu mẫu không được bảo quản tốt, các thành phần trong nước tiểu sẽ bị phân huỷ, ảnh hưởng rất lớn tới kết quả phân tích. Vì vậy nước tiểu cần được bảo quản với aid acetic băng theo tỷ lệ Iml acid acetic băng / lOOml nước tiểu trong môi trường lạnh (trong hộp đá hoặc tủ lạnh).
2.5.4. Xây dựng đường chuẩn:
Từ dung dịch mẫu chuẩn mẹ nồng độ lOOịxg/ml pha thành các dung dịch có nồng độ Ci, Cj, C3, C4 có nồng độ lần lượt là: 2,5,10,20 (¡Ẳg/ml) như sau:
- Hút 4 ml dung dịch chuẩn mẹ vào bình định mức 20 ml, thêm nước cất vừa đủ được nồng độ là C4 = 20 ịxg/ml.
- Hút 5 ml dung dịch C4 vào bình định mức 10 ml, thêm nước cất vừa đủ được nồng độ là C3 = 10 [Ấg/ml.
- Hút 5 ml dung dịch C4 vào bình định mức 20 ml, thêm nước cất vừa đủ được nồng độ là C2 = 5 ỊẲg/ml.