Kết quả nghiên cứu vòng đời tự nhiên của H. pluvialis trong bình tam giác 250 ml trên mơi trường RM được trình bày ở hình 5, hình 6 và bảng 2,
bảng 3.
Hình 5: Mật độ tế bào của H. pluvialis ni ở bình tam giác 250ml trong mơi trường RM
Bảng 2: Mật độ tế bào trung bình trong mơi trường RM (104 TB/ml)
Ngày MĐTB Ngày MĐTB Ngày MĐTB
0 6,12 16 33,85 32 50 2 6,75 18 35,52 34 47,28 4 12,11 20 36,61 36 40,16 6 21,48 22 39,13 38 33,72 8 26,66 24 43,2 40 30,19 10 27,02 26 43,78 42 27,754 12 30,25 28 47,3 46 22,84 14 32,5 30 49,18 50 21,09 MĐTB – mật độ trung bình
Hình 6: Sự thay đổi của hàm lượng sắc tố (chlorophyll a, astaxanthin) và protein của H. pluvialis ni ở bình tam giác 250ml trong mơi trường RM
Bảng 3: Hàm lượng các chất trong TB H. pluvialis trong mơi trường RM Ngày Chlo a (µg/l) Astaxanthin (µg/l) (pg/TB)Protein Ngày Chlo a (µg/l ) Astaxanthin (µg/l ) (pg/TB)Protein
0 148,91 52,99 241,67 26 614,77 396,08 79,23 2 193,4 51,37 212,5 28 643,21 390,11 77,65 4 205,84 62,38 198,73 30 656,11 388,71 70,06 6 212,82 60,21 177,09 32 723,99 423,63 68,97 8 220,15 111,48 153,81 34 754,2 502,89 67,29 10 224,48 153,66 141,67 36 785,33 600,06 65,88 12 287,27 207,14 125,31 38 794,7 693,62 63,37 14 326,5 241,7 142,2 40 816,79 812,25 59,96 16 371,44 283,5 106,27 42 790,22 839,76 57,12 18 419,97 298,67 98,22 44 761,39 870,1 53,5 20 482,23 323,01 96,06 46 674,7 942,23 51,19 22 508,24 358,45 92,27 48 635,93 932,19 49,75 24 563,42 387,3 86,36 50 600,08 935,24 45,34
Kết quả theo dõi được đã cho thấy: Ở cấp độ bình tam giác 250ml, trong mơi trường RM, vi tảo H. pluvialis sinh trưởng và đạt mật độ TB cao nhất là 50,00x104 TB/ml sau 32 ngày ni cấy (bảng 2 và hình 5). Khi thời gian nuôi tảo đạt từ 0 – 36 ngày, hàm lượng protein nội bào và hàm lượng sắc tố (chlorophyll a và astaxanthin) có sự thay đổi rõ nét và theo hướng ngược chiều nhau. Trong suốt quá trình ni, hàm lượng protein nội bào có xu hướng giảm dần. Khi TB tảo có màu đỏ đậm, tức là hồn tồn chuyển sang giai đoạn bào nang hồn chỉnh thì hàm lượng protein nội bào của TB H.
pluvialis có giá trị nhỏ hơn 100 pg/TB (bảng 3 và hình 6).
Hàm lượng chlorophyll a trong TB tăng dần theo thời gian nuôi tảo và đạt giá trị cực đại là 816,79 µg/lit ở thời điểm 40 ngày (bảng 3 và hình 6). Sau đó hàm lượng này giảm dần ở những ngày ni tiếp theo. Kết quả thí nghiệm chúng tôi thu được phù hợp với công bố của Sperry (1970) đã phát hiện thấy hàm lượng chlorophyll có xu hướng giảm dần trong q trình tích lũy astaxanthin [34]. Tuy nhiên, điều này lại trái ngược với cơng trình của
trong suốt q trình tích lũy astaxanthin [38]. Ở 40 ngày đầu nuôi cấy, hàm lượng astaxanthin bắt đầu được tích luỹ và tăng chậm khi TB tảo chuyển từ dạng sinh dưỡng sang dạng tạo bào nang. Hàm lượng sắc tố này tăng đột ngột khi thời gian nuôi khoảng từ 40 đến 50 ngày. Đây là lúc môi trường trở nên thiếu dinh dưỡng. Hàm lượng astaxanthin tích lũy cao nhất là 942,23 µg/l ở 46 ngày ni (bảng 3 và hình 6). Ngồi ra, kích thước tế bào ở giai đoạn này tăng mạnh và đạt cực đại vào khoảng 40 µm.
3.2.2. Nghiên cứu vịng đời của Haematococcus pluvialis trong bình tam giác 250 ml trên môi trường C: