Bảng 6: So sánh thời gian xử lí đến hiệu quả khử trùng của HgCl2 0,1% đối với vật liệu khởi đầu là đỉnh sinh trưởng
Giống mía Thời gian xử lý HgCl2 0,1% Số mẫu nhiễm (%) Số mẫu chết (%) Số mẫu bật chồi (%) C95-186 5 phút 20% 13,33% 66,67% VN84-4137 10 phút 16,67% 12,50% 70,83%
Bảng 7: So sánh hiệu quả nhân nhanh của các chất điều tiết sinh trưởng khác nhau lên chồi mía in vitro
Công thức nhân nhanh đã bổ sung
chất ĐTST Giống mía Hệ số nhân nhanh (lần) MS + 8 g/l Agar + 20 g/l saccaroza + 5 ppm KI + 10% nước dừa VN84-4137 4,0 MS + 9 g/l Agar + 30 g/l saccaroza +
1 ppm BAP + 15% nước dừa C95-186 3,5
Bảng trên trình bày sự so sánh kết quả của chúng tôi với công trình nghiên cứu của Lê Phi Long, K47 K2 Nông học. Kết quả cho thấy:
Cùng chất khử trùng là HgCl2 0,1% và cùng vật liệu khởi đầu là đỉnh sinh trưởng thì thời gian xử lí thích hợp nhất của đề tài là 5 phút trong khi đó nghiên cứu trên có thời gian xử lí thích hợp là 10 phút. Mặc dù hiệu quả bật chồi của mẫu là xấp xỉ nhau
Trong giai đoạn nhân nhanh, với chất điều tiết sinh trưởng khác nhau cho hiệu quả nhân nhanh khác nhau rõ rệt. Với chất điều tiết sinh trưởng là KI cho hệ số nhân nhanh lên đến 4 lần, trong khi đó kết quả đối với chất điều tiết sinh trưởng là BAP cho hệ số nhân nhanh tối đa là 3,5 lần.
Như vậy: Trong nhân giống vô tính in vitro, với các đối tượng nghiên
cứu khác nhau thì yêu cầu kĩ thuật không giống nhau. Chính vì vậy, quy trình kĩ thuật của đối tượng này không thể áp dụng cho đối tượng khác. Mặt khác, khi xây dựng quy trình công nghệ nhân giống một giống mới cần thử nghiệm nhiều công thức, nhiều loại hoá chất khác nhau để đưa ra công thức tối ưu nhất. Điều cần thiết là phải xây dựng quy trình nhân giống cho từng đối tượng, nhất là đối với các giống mới.
Từ những kết quả nghiên cứu thu được, chúng tôi đề xuất công thức nhân giống in vitro giống mía C95-186 ở giai đoạn vào mẫu và nhân nhanh như sau:
Quy trình Điều kiện nuôi cấy
Các đỉnh sinh trưởng
Giai đoạn vào mẫu, cấy gây
Mẫu in vitro
Giai đoạn nhân nhanh
Chồi in vitro
Giai đoạn ra rễ, tạo cây hoàn chỉnh
Cây in vitro hoàn chỉnh
Giai đoạn huấn luyện thích nghi
Cây in vitro
Vườn ươm
Một số hình ảnh về giai đoạn vào mẫu Khử trùng bằng HgCl2 0,1% trong 5 phút
Công thức khử trùng HgCl2 0,1% trong 5 phút Thời gian cấy gây là 4 tuần
Môi trường nhân nhanh MS + 9g/l Agar + 30g/l saccaroza
+ 15% nước dừa + 1 ppm BAP Thời gian nhân nhanh là 5 - 6 tuần (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Sau 10 ngày nuôi cấy Sau 2 tuần nuôi cấy
Sau 3 tuần nuôi cấy Sau 4 tuần nuôi cấy
Một số hình ảnh giai đoạn nhân nhanh Bổ sung 1ppm BAP chất điều tiết sinh trưởng
Sau 2 tuần nhân nhanh Sau 3 tuần nhân nhanh
Sau 4 tuần nhân nhanh
Sau 5-6 tuần nhân nhanh