A.Kết iuân
Qua quá trình thực hiện đề tài “nghiên cứu xây dựng phương pháp định lượng Rosiglitazone trong huyết tưong bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao” chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
t/ => về mặt nhận thức:
- Biết cách triển khai cơ bản một nghiên cứu khíia^học: tra cứu, tìm hiểu tài liệu; bố ừí và tiến hành thực nghiệm; xử lý kết quả và báo cáo kết quả.
- Nắm rõ hơn cơ sở lý thuyết và cách tiến hành của phưong pháp phân tích thuốc ừong dịch sinh học bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao.
- Bước đầu tiếp cận với những kiến thức tiên tiến trong ngành kiểm nghiệm thuốc ừên thế giới.
<=> v ề thực nghiệm:
►Xây dựng được phưomg pháp định lượng RGZ ừong huyết tưomg với các đỉều kiện như sau
♦ Ouv trình xử Iv mẫu:
> Lấy ImL huyết tương (mẫu trắng/chuẩn/thử) cho vào ống ly tâm. > Thêm SO^iL dung dịch Propylparaben 250 ^ig/mL (nội chuẩn). > và 1,0 lĩiL NaOH 0,05M. Lắc xoáy 30 giây.
> Thêm 7 lĩiL hỗn hợp dung môi Dicloromethan ; Diethylether tỷ lệ 30/70 (v/v). Lắc 10 phút.
> Ly tâm 4000 vòng/phút ưong 10 phút.
> Lấy 5mL dịch nổi, bốc hơi bằng khí Nitơ và nhiệt độ, thu cắn
> Hòa tan cắn bằng ImL pha động, lắc xoáy 1 phút, lọc qua giấy lọc 0,45 ^m, dung dịch thu được đem tiêm sắc ký.
* Điều kiên sấc kv:
> Gột Gemini C18, 5 Ịim, 250 X 4 mm. Nhiệt độ cột 40°c
> Pha động: MeCN - Đệm Natri Acetat (lOmM, pH5) tỷ lệ 45 : 55 (v/v) > Tốc độ dòng 1,25 mL/phút.
> Thể tích tiêm 10 nL.
> Nội chuẩn là Propylparaben (nồng độ =12,5 ng/mL)
> Detector RF: Ex = 247nm, Em = 367nm (sens. = medium; gain X 4). ► Phương pháp đã được thẩm định theo hướng dẫn của dược điển Mỹ: đặc hiệu - chọn lọc với RGZ, giới hạn định lượng dưới là 40 ng/iĩiL, khoảng nồng độ tuyến tính tìr 40 - 1600 ng/ĩĩiL, độ đúng xấp xỉ 100% , ...đáp ứng các yêu cầu của phưomg pháp phân tích dùng trong sinh học.
B. Đề xuất
- Do điều kiện về thời gian và kinh phí còn hạn hẹp nên nghiên cứu mới chỉ dừng lại ở mức nghiên cứu in vivo cho chế phẩm chứa RGZ đơn thành phần mà chưa được tiến hành nghiên cứu in vitro hay trong chế phẩm phối hợp của RGZ như chế phẩm Avandamet. Vì vậy chúng tôi đề nghị tiếp tục tiến hành nghiên cứu hoàn chỉnh hom cho phương pháp đã xây dựng, để có thể đưa kết quả của nghiên cứu vào ứng dụng thực tế lâm sàng cũng như trong đánh giá SKD, TĐSH và công tác đảm bảo chất lượng thuốc.