Phương pháp định lượng RGZ ừong dịch sinh học bằng HPLC đă được công bố ừong nhiều tài liệu [11], [14], [17], [19]. Tuy nhiên, các tài liệu trên ít đề cập đến vấn đề tìiẩm định phương pháp phân tích hoặc chỉ mới thẩm định một vài chỉ tiêu. Phương pháp HPLC định lượng RGZ trong huyết tương sử dụng trong nghiên cứu đã được thẩm định theo các chỉ tiêu của FDA bao gồm; túứi chọn lọc - đặc hiệu, đường chuẩn - khoảng tuyến tính, độ chính xác, độ đúng, giới hạn định lượng, hiệu suất chiết và độ ổn định của mẫu.
- Với một điều kiện sắc ký không quá phức tạp, dễ dàng tìiển khai tại các phòng thí nghiệm của Việt Nam, hoạt chất RGZ và chất chuẩn nội PRP đã phân tách hoàn toàn khỏi các thành phần tạp có trong mẫu huyết tưomg với tìiời gian triển khai sắc ký 9,5 phút, thấp hơn nhiều so với các công trình nghiên cứu đã công bố (>12 phút). Do đó tiết kiệm được rất nhiều thời gian và chi phí, đặc biệt là trong điều kiện hạn hẹp về thiết bị hiện đại và tài chính.
- Trong phương pháp nghiên cứu trong đề tài chúng tôi lựa chọn chuẩn nội là Propyl paraben vừa có phát xạ huynh quang gần với RGZ đồng thời có cực đại hấp thụ tử ngoại gần với Metformin nên có thể sử dụng frong định lượng cả 2 hoạt chất trong chế phẩm phối hợp đang có mặt rộng rãi trên thị trường - AVANDAMET.
- Phương pháp trong đề tài có giới hạn định lượng dưới thấp (LLOQ = 40 ng/mL, sấp xỉ bằng 1 / 2 0 giá trị Cmax). Đạt yêu cầu về giới hạn định lượng dưới trong phép phân tich.
- So với các phương pháp đã được công bố, phương pháp trong nghiên cứu của đề tài đã được thẩm định và đạt các yêu cầu về các chỉ tiêu vể thẩm định phưong pháp phân tích dược chất trong dịch sinh học: