Mỗi mẫu chúng tôi tiến hành đo trên máy HPLC hai lần kết quả nh sau: Mẫu 1:
Lần Diện tích peak
1 6497807
2 6199927
Diện tích peak trung bình=6497807 6199927
2
+
=6348867
Dựa vào đờng chuẩn suy ra nồng độ CAP trong thức ăn tôm là 0,0226 mg/ml.
Vì thể tích sau khi chiết pha rắn thu đợc 2ml mẫu nên ta co thể tính đợc nồng độ của CAP trong mẫu 1 là: 0,0226ì2 =0,0452 mg.
Vì xét trong 50 g mẫu thức ăn nuôi tôm nên khối lợng CAP trong 100 g là 0,0452 mgì2 = 0,0904 mg
Nh vậy % khối lợng CAP trong mẫu thức ăn nuôi tôm là: %CAP=0,0904 10 3 100
100
−
ì ì =9,04.10-5 % Mẫu 2:
Lần Diện tích peak
1 7467373
2 7339276
Diện tích peak trung bình= 7467373 7339276
2
+
=7403324,5
Dựa vào đờng chuẩn suy ra nồng độ CAP trong thức ăn tôm là 0,0264 mg/ml.
Vì thể tích sau khi chiết pha rắn thu đợc 2ml mẫu nên ta co thể tính đợc nồng độ của CAP trong mẫu 2 là:
0,0264-0,0226=0,0038 mg/ml Từ đó suy ra khối lợng CAP trong 2 ml mẫu là: 0,0038ì2 = 0,0076 mg HSTH = 0,0076 1000,01ì = 76% Mẫu 3: Lần Diện tích peak 1 45753448 2 45654668
Diện tích peak trung bình= 45753448 45654668
2
+ =45704058
Dựa vào đờng chuẩn suy ra nồng độ CAP trong thức ăn tôm là 0,1627 mg/ml.
Vì thể tích sau khi chiết pha rắn thu đợc 2ml mẫu nên ta co thể tính đợc nồng độ của CAP trong mẫu 3 là:
0,1627-0,0226=0,1401mg/ml. Từ đó suy ra khối lợng CAP trong 2 ml mẫu là: 0,1401 ì2=0,2802 mg/ml.
HSTH = 0, 2802 100 0,3 ì = 93,4% Mẫu 4: Lần Diện tích peak 1 53378796 2 50016856
Diện tích peak trung bình= 53378796 50016856
2
+
=51697826
Dựa vào đờng chuẩn suy ra nồng độ CAP trong thức ăn tôm là 0,1840 mg/ml.
Vì thể tích sau khi chiết pha rắn thu đợc 2ml mẫu nên ta có thể tính đợc nồng độ của CAP trong mẫu 4 là:
0,1840 - 0,0226 = 0,1614 mg/ml. Từ đó suy ra khối lợng CAP trong 2 ml mẫu là: 0,1614 ì 2 = 0,3228 mg/ml. HSTH = 0,3228 1000, 4ì = 80,7%
Nh vậy độ thu hồi của CAP trong 3 lần xử lý mẫu là: HSTHTB = 76 93, 4 80,7
3
+ + = 83,37%
Để xác định giới hạn phát hiện chúng tôi sử dụng phơng pháp pha loãng nồng độ đến khi không thấy xuất hiện peak thì nồng độ trớc đó đợc coi là nồng độ nhỏ nhất có thể phát hiện ra CAP . Theo phơng pháp này, trên thiết bị HPLC mà chúng tôi đang nghiên cứu có giới hạn phát hiện đến 10-10 mg/ml. Chúng tôi đã lặp lại thí nghiệm 3 lần và kết quả thu đợc là:
Lần Diện tích peak
1 25623
3 18719
Chúng tôi khảo sát độ lặp lại tại nồng độ 0,02 mg/ml và kết quả thu đợc nh sau:
Lần Diện tích peak Lần Diện tích peak
1 892397 6 841550
2 895124 7 857360
3 880589 8 865523
4 882486 9 866629
5 890974 10 856958
Giá trị diện tích peak trung bình:
x= 1 1 n i x n∑= =872959 Độ lệch chuẩn: 1( )2 1 n i n x x s n − − = − ∑ =0,176
Độ lệch chuẩn tơng đối: RSD(%) = S 100
xì = 0,176%
3.2.Thảo luận:
Quá trình thực nghiệm đã đợc hoàn thành với kết quả tốt, những kết quả trên có độ chính xác và độ tin cậy cao, không hề có sự sửa chữa số liệu điều này có thể đánh giá dựa vào peak thực của các mẫu đã đo.
Vì thời gian có hạn nên chúng tôi cha khảo sát đợc một số phơng pháp khác để đối chứng.
Chơng 4: kết luận và đề xuất 4.1.kết luận:
Căn cứ vào nhiệm vụ của đề tài luận văn đã hoàn thành đợc những nhiệm vụ nh sau:
+ Về lý thuyết:
- Lý thuyết về phơng pháp sắc kí lỏng cao áp. - Lý thuyết chung về Cloramphenicol
+Về thực nghiệm:
- Đã nghiên cứu đợc các phản ứng định tính cloramphenicol
- Đã nghiên cứu quy trình xác định hàm lợng cloramphenicol trong mẫu thức ăn nuôi tôm
- Đã xác định hàm lợng lợng cloramphenicol trong mẫu thức ăn nuôi tôm: 9,04.10-5 %
- Đã xác định độ lặp lại của cloramphenicol trong mẫu thức ăn nuôi tôm tại nồng độ 0,02 mg/ml.
- Đã xác định đợc giới hạn phát hiện cloramphenicol trong mẫu thức ăn nuôi tôm:
+Giới hạn phát hiện hệ thống là 2.10-10 +Giới hạn phát hiện phơng pháp là 4.10-10
- Đã xác định đợc độ thu hồi của cloramphenicol trong mẫu thức ăn nuôi tôm là 83,37 %
4.2.đề xuất:
Với kết quả thu đợc trong luận văn này, hy vọng góp phần đánh giá l- ợng d thừa cloramphenicol trong thức ăn nuôi tôm.
tài liệu tham khảo
I. Tiếng Việt
1.N.X. Acmetop (1984). Hóa học vô cơ, tập 2. Nxb ĐH & THCN
2.A.K.Bako (1995). Phân tích trắc quang phần 1-2. Nxb Giáo dục, Hà Nội.
3.Nguyễn Trọng Biểu, Mai Hửu Đua (1974) .Chuẩn bị dung dịch cho phân tích hóa học. Nxb KHKT Hà Nội.
4. Nguyễn Trọng Biểu, Từ Văn Mạc (2002) .Thuốc thữ hữu cơ. Nxb KHKT, Hà Nội.
5.F.Cotton,G, Wilicinson (1984). Cơ sở hóa vô cơ, tâp 2.NXB ĐH & THCN.
6.Nguyễn Tinh Dung (2000). Hóa học phân tích, Phần III Các ph– ơng phơng pháp định lợng hóa học. NXB Giáo dục, Hà Nội.
7. Doeffel (1983). Thống kê trong hóa học phân tích.NXB ĐH & THCN, Hà Nội.
8.Trần Thị Đà, Nguyễn Thế Ngôn(2001). Hóa học vô cơ, tập 2. Nxb Giáo dục, Hà Nội.
9. Phan Đình Châu, Nguyễn Việt Hơng, Từ Minh Koóng, Đỗ Hữu Nghị. Kĩ
thuật sản xuất dợc phẩm, tập 1. Trờng Đại học Dợc Hà Nội.
10.Trần Tứ Hiếu (2002). Hóa học phân tích.Nxb ĐHQG,Hà Nội.
11.Từ Vọng Nghi, Huỳnh Văn Trung,Trần Tứ Hiếu(1986). Phân tích nớc. NXB KHKT, Hà Nội.
12.Hoàng Nhâm(2000). Hóa học vô cơ, tập II. NXB Giáo dục, Hà Nội. 13. Lơng Đức Phẩm (2003). Công nghệ sử lí nớc thải bằng sinh học.NXB Giáo dục, Hà Nội.
14. Hồ Viết Quý (1991). Các phơng pháp phân tích hóa lí. ĐHSP Hà Nội. 15. Hồ Việt Quý (1995). Phức chất phơng pháp nghiên cứu và ứng dụng
trong hóa học hiên đại. ĐHSP Quy Nhơn.
16. Hồ Việt Quý (1999). Các phơng pháp phân tích quang học trong hóa
học. NXB ĐHQG Hà Nội.
18. Hồ Viết Quý, Đặng Trân Phách (dịch), Nguyễn Tinh Dung (hiệu đính) (1995). Hóa học phân tích quang học trong hóa học. nxb ĐHQG, Hà Nội.
19.Hồ Việt Quý (1994). Xử lí số liệu thực nghiệm bằng phơng pháp toán
học thống kê. ĐHSP Quy Nhơn.
20.Hồ Viết Quý (1998). Các phơng pháp phân tích hiên đại và ứng dụng
trong hóa học. Nxb ĐHQG Hà Nội.
21.Hồ Viết Quý (2005). Các phơng pháp phân tích công cụ trong hóa học
hiên đại. Nxb ĐHSP Hà Nội.
22. Nguyễn Đình Triệu (2001), Các phơng pháp phân tích vật lí và hóa lí,
Tập 1. NXB Khoa học và kĩ thuật.
23. Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999), ứng dụng một số phơng pháp
phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử. NXBGD Hà Nội.
24.Đinh Văn Thành(2006), Nghiên cứu ứng dụng chiết pha rắn để định l-
ợng vitamin D trong một số chế phẩm Multivitamin bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao, Hà Nội
II. Tiếng Anh
25.Hinilicova M., Sommer (1961). 4-(2-pyridilazo)- resorcinol
accelerator mertic chemical indicator . Col. Czech. Chem. Comm. 26, p.2198-
2205.
26. Kimitoshi S, Mitsishita, Takashi G. (1999). Preconcentration of trace
cadmium from water sample using 4-(2- pyridilazo)- resorsinol.
Capriquat loaded silicagel.
27. B. Reanak and J. Korbl (1960). Collecction of czechoslovak chemical
aommunications. Vol.24, N03,p. 797
28. Roston D.A. (1984). Precolumn chelation with PAR for
determination of metal ions by liquid chromatography.Analytical
Chemistry,Vol.56,p.241-244.
29.Siroki M., Marie L., Stefanae Z., Herak M.J. Characterization of
complexes involved in the spectrophotometric determination of cobalt 4-(2- pyridilazo )-resorsinol. Analytical Chimical Acta,Vol.75,p110-109.
30. Shabana Amin (1997) Doctor of philosophy. Kinetic and
thermodynamic aspects of complexation of trivalent metals (Al3+ and Fe3+) by Maltol.
31. Chen,Jiansong, Teo, Khay Chuan (2002). Determination of
cadimium,copper, lead, and zinc in water samples by flame automic absortion spectrometry after cluod point extraction. Analytical Chimical
Acta,450 (1-2), 215-222. Chem.Abs.Vol.136,p.188,936.
32. N.N. Greenwood and A.Earnshaw (1998). Chemitry of the elements. Buttrt worth,Heinemann,p..216-229.
33. Kirk (1992). Othmer encyclopedia of chemical technology. 4 th edn, Vol.2, Aluminium and aluminium alloys, p.184-251; aluminium compuonds,
34.Akio Yuchi,Tomoaki Okubo , Hiroko Wada and Genkichi NAkagawa (2006). Complexation equilibria of cadmium ions with xylenol orange as
studied by cadmiumion selective electrode. Analytical sciences April 1987,
Vol.3, Inist CNRS
35. Chan-Il Park, Huyn-Sookim, and Ki- Woncha (1999). Separation of
Fe(III) and concentration of metal ions using cation exchane resin bonder with xylenol orange. Journal of the Korean Chemical Society, Vol.43, NO.6,
p.401
36.Các trang web : www.hoahocvietnam.com www.hoahoc.org